鞣质含量测定法.doc

文件编号 SOP-QC-628 版号 A 页码3/31.目的 建立鞣质含量测定法操作规程。2.适用范围 本规程适用于鞣质含量测定法。3.编制依据 药品生产质量管理规范（1998年修订）国家药品监督管理局（1999）4.责任4.1 QC质检员对本规程的实施负责。4.2 QC主管对本规程的有效执行承担监督检查责任。5.正文5.1简述5.1.1中国药典2010年版一部附录 B为磷钼钨酸干酪素紫外可见分光光度法。5.2仪器与用具5.2.1紫外可见分光光度计。5.2.2量瓶、移液管、具塞锥形瓶。5.3试药与试液5.3.1没食子酸对照品。5.3.2磷酸、盐酸（分析纯）。5.3.3干酪素（生化试剂）。5.3.4磷钼钨酸试液应符合中国药典2010年版一部附录 B的规定。5.3.5 29%碳酸钠溶液取碳酸钠（NaCO310H2O）29g或无水碳酸钠10.8g，加水100ml溶解。5.4操作方法 本实验应避光操作。5.4.1对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照品50mg，置100ml棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含没食子酸0.05mg）。5.4.2标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置25ml棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸试液1ml，再分别加水11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应的试剂为空白，照紫外可见分光光度法（附录 A），在760nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。5.4.3供试品溶液的制备按各品种项下规定的量取样，精密称定，置250ml棕色量瓶中，加水150ml，放置过夜，超声处理10分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，静置（使固体物沉淀）。滤过，弃去初滤液50ml，精密量取续滤液20ml，置100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。5.4.4测定法5.4.4.1总酚 精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg），计算，即得。5.4.4.2不被吸附的多酚 精密量取供试品溶液25ml，加至已盛有干酪素0.6g的100ml具塞锥形瓶中，密塞，置30水浴中保温1小时，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg），计算，即得。5.5记录与计算5.5.1记录对照品、供试品的称样量，测定过程供试品溶液稀释、量取的体积等；标准曲线的制备中对照品溶液的量取体积以及相应的吸光度值，计算回归方程。5.5.2分别按标准曲线法计算总酚量和不被吸附的多酚量，两者之差为鞣质含量。即：鞣质含量=总酚量=不被吸附的多酚量5.6注意事项5.6.1药材一般应粉碎过三号筛；5.6.2显色溶液在30分钟后反应完全，在3小时内稳定。因此，规定显色后放置30