第8章对氨基苯甲酸酯类药物分析(2012年)

分类与典型药物 理化特征 鉴别试验 杂质检查 含量测定 本章内容 化学结构 1 亲脂性芳香环2 中间连接功能基3 亲水性胺基 对氨基苯甲酸酯类 酰苯胺类 第一节对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质 一 对氨基苯甲酸酯类基本结构与典型药物 苯佐卡因 benzocaine 盐酸丁卡因 tetracainehydrochloride 盐酸普鲁卡因胺 procainamidehydrochloride 盐酸普鲁卡因 procainehydrochloride 二 酰苯胺类药物的基本结构与典型药物 基本结构 盐酸利多卡因 lidocainehydrochloride 盐酸布比卡因 bupivacainehydrochloride 盐酸罗哌卡因 1 芳伯氨基特性 对氨基苯甲酸酯类结构中有芳伯氨基 发生重氮化 偶合 与芳醛缩合 易氧化变色 盐酸丁卡因无此特性 酰苯胺类分子结构中含有芳酰氨基 酸水解后显芳伯氨基的特性反应 注意空间位阻的影响 三 主要理化性质 2 水解特性 对氨基苯甲酸酯类分子结构中的酯键易水解 除盐酸丁卡因水解产物为对丁基苯甲酸外 其余均为对氨基苯甲酸 PABA 3 弱碱性 该类药物分子结构中含有脂烃胺侧链为叔胺氮原子 具有一定碱性 可成盐 可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应 可相互区别 4 与金属离子发生沉淀反应 利多卡因和布比卡因分子结构中酰氨基上氮可与Cu2 或Co2 络合 生成有色配位化合物沉淀 5 吸收光谱特性 含有苯环及取代基 具有特征的紫外光谱与红外光谱行为 6 其它特性 因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链 其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体 难溶于水 可溶于有机溶剂 其盐酸盐则易溶于水 第二节鉴别试验 一 重氮化 偶合反应分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 均可发生此反应 直接反应 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺 丁卡因虽无芳伯氨基 但可与NaNO2反应生成N 亚硝基化合物的乳白色沉淀 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因鉴别方法 本品显芳香第一胺类的鉴别反应 附录III 取供试品约50mg 加稀盐酸1ml 必要时缓缓煮沸使溶解 放冷 加0 1mol L亚硝酸钠溶液数滴 滴加碱性 萘酚试液数滴 视供试品不同 生成由橙黄到猩红色沉淀 二 与金属离子反应1 盐酸利多卡因的鉴别方法 与铜离子反应 蓝紫色转入氯仿中显黄色 方法 ChP2010 鉴别 取本品0 2g 加水20ml溶解取溶液2ml 加硫酸铜试液0 2ml与碳酸钠试液1ml 即显蓝紫色 加三氯甲烷2ml 振摇后放置 三氯甲烷层显黄色 亮绿色细小钴盐沉淀 与钴离子反应 盐酸利多可因加硝酸酸化 加硝酸汞 加热 显黄色 对氨基苯甲酸酯类显红色或橙黄色 2 盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法 基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构 紫红色暗棕色棕黑色 三 水解产物反应 1 盐酸普鲁卡因的鉴别 盐酸普鲁卡因 NaOH 白色 普鲁卡因 普鲁卡因 油状物 蒸气 湿润红色石蕊试纸变蓝 对氨基苯甲酸钠 HCl 白色 过量HCl 溶解 方法 ChP2010 取本品约0 1g 加水2ml溶解后 加10 氢氧化钠溶液1ml 即生成白色沉淀 加热 变为油状物 继续加热 产生的蒸气 能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色 热至油状物消失后 放冷 加盐酸酸化 即析出白色沉淀 2 苯佐卡因的鉴别方法 ChP2010 取本品约0 1g 加氢氧化钠试液5m1 煮沸 即有乙醇生成 加碘试液 加热 即生成黄色沉淀 并发生碘仿的臭气 四 制备衍生物测熔点 盐酸丁卡因 取本品0 1g 加5 醋酸钠溶液10ml溶解后 加25 硫氰酸铵溶液1ml 析出白色结晶 滤过 结晶用水洗涤后 在80 干燥 熔点为131 五 吸收光谱特征 1 紫外吸收光谱 分子结构中含有苯环2 红外吸收光谱 利用化合物结构中特殊基团的振动和转动等红外活性振动产生的红外吸收峰对药物进行鉴别的方法 第三节特殊杂质与检查 一 盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查杂质来源 分子结构中含有酯键 可发生水解 注射液制备过程中受灭菌温度 时间 溶液pH 贮藏时间以及光线和金属离子影响 易水解 为什么要检查 ChP2010规定盐酸普鲁卡因及其注射液以及注射用盐酸普鲁卡因均需要检查对氨基苯甲酸 检查方法 ChP2010 HPLC限量 盐酸普鲁卡因原料药以及注射用灭菌粉末中对氨基苯甲酸不得超过0 5 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸不得超过1 2 Agillent安捷伦Waters沃特斯Bruker布鲁克Varian瓦里安AB美国应用生物系统Shimadzu岛津Finnigan菲尼根 二 盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查 杂质来源 在生产和贮藏过程中 其注射液在一定的灭菌时间 温度和pH条件下 更易发生水解反应 生成4 氨基 2 氯苯甲酸降解产物 检查方法 USP34 NF29 HPLC限量 4 氨基 2 氯苯甲酸 0 625 4 氨基 2 氯苯甲酸注射液 3 0 三 盐酸利多卡因注射液中2 6 二甲基苯胺及其他杂质的检查 杂质来源 生产和贮藏过程中水解 检查方法 ChP2010 HPLC限量 2 6 二甲基苯胺 0 04 其他各杂质 1 0 第四节含量测定 亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法紫外分光光度法高效液相色谱法 一 亚硝酸钠滴定法 本类药物分子结构中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基 在酸性溶液中可与亚硝酸钠反应 可用亚硝酸钠滴定法测定含量 ChP2010中的苯佐卡因 盐酸普鲁卡因和注射用盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺及其片剂与注射剂 可直接采用本法测定含量 1 基本原理 芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基 在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应 生成重氮盐 可用永停滴定法指示反应终点 2 滴定法 ChP2010 取供试品适量 精密称定 置烧杯中 除另有规定外 可加水40ml与盐酸溶液 1 2 15ml 置电磁搅拌器上 搅拌使溶液 再加溴化钾2g 插入铂 铂电极后 将滴定管的尖端插入液面下约2 3处 用亚硝酸钠滴定液 0 1mol L或0 05mol L 迅速滴定 随滴随搅拌 至近终点时 将滴定管的尖端提出液面 用少量水淋洗尖端 洗液并入溶液中 继续缓缓滴定 至电流计指针突然偏转 并不再回复 即为滴定终点 3 测定的主要条件 1 加入适量的溴化钾加快反应速度 重氮化反应机制 反应速度取决于 溶液中芳伯氨基的浓度和NO 的浓度 第一步 KBr HCl HBr KCl HNO2 HBr NOBr H2O KHBr KHBr比KHCl大300倍 生成NOBr量大得多 加快重氮化反应速度 加入溴化钾 ChP2010规定加入2g HNO2 HCl NOCl H2O KHCl 2 加过量盐酸加速反应 因胺类药物盐酸盐溶解度 硫酸盐 重氮化反应速度加快 重氮盐在酸性溶液中稳定 防止生成偶氮氨基化合物芳胺与盐酸摩尔比1 2 5 6 偶氮氨基化合物 3 反应温度 温度过高 可使亚硝酸逸失 并可使重氮盐分解 Ar N2 Cl H2O Ar OH N2 HCl滴定应在室温 10 30 条件下滴定 其中15 以下结果准确 4 滴定速度 滴定速度不宜太快 为了避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解 滴定时宜将滴定管尖端插入液面下约2 3处滴定 一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入 后将滴定管尖端提出液面 用少量水淋洗 再缓缓滴定 先快后慢 4 指示终点的方法 1 永停滴定法 ChP2010全部采用该法 永停滴定仪 外指示剂法用KI 淀粉指示剂指示终点的原理 2NaNO2 2KI 4HCl2NO I2 2KCl 2NaCl 2H2O 3 电位法 Pt 饱和甘汞电极 4 内指示剂法 中性红 蓝紫色 纯蓝色 例 盐酸普鲁卡因含量测定方法 ChP2010 取本品约0 6g 精密称定 照永停滴定法 在15 25 用亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 滴定 每1ml亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 相当于27 28mg的C13H20N2O2 HCl 计算 精密称取盐酸普鲁卡因0 5207g 按永停滴定法 在15 25 用亚硝酸钠滴定液 0 1022mol L 滴定到终点 用去亚硝酸钠滴定液18 52ml 已知 每1ml亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 相当于27 28mg的盐酸普鲁卡因 求盐酸普鲁卡因的百分含量 二 非水溶液滴定法 ChP2010采用本法测定盐酸布比卡因含量 原理 盐酸布比卡因侧链哌啶环上的叔氮原子具有弱碱性 可采用非水溶液滴定法测定含量 溶剂 冰醋酸 醋酐溶液因其在冰醋酸中碱性弱 加醋酐可增加其碱性 醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性强 利于碱性增强 滴定突跃敏锐 滴定液 高氯酸 0 1mol L 三 紫外分光光度法 ChP2010采用紫外分光光度法测定注射用盐酸丁卡因的含量 四 高效液相色谱法 ChP2010采用该法测定盐酸利多卡因注射液的含量 练习 1 亚硝酸钠滴定法指示终点的方法有若干 ChP2010采用的方法为A 电位法B 外指示剂法C 内指示剂法D 永停法E 碱量法2 盐酸利多卡因在酸性溶液中 与氯化钴试液反应 生成细小钴盐沉淀的颜色是A 蓝紫色B 紫堇色C 绿色D 猩红色E 亮绿色 3 下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量的是A 乙酰水杨酸B 对氨基水杨酸钠C 注射用盐酸普鲁卡因D 盐酸普鲁卡因E 苯佐卡因4 亚硝酸钠滴定法中 加KBr的作用是A 使终点变色明显B 使氨基游离C 增加NO 的浓度D 增强药物碱性E 增加离子强度 5 ChP2010收载盐酸利多卡因注射液的含量测定方法是 A 亚硝酸钠滴定法B 紫外分光光度法C 高效液相色谱法D 非水溶液滴定法E 溴量法6 以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸A 盐酸普鲁卡因B 盐酸氯普鲁卡因C 盐酸普鲁卡因胺D 盐酸丁卡因E 盐酸利多卡因 7 盐酸丁卡因与亚硝酸钠作用形成A 重氮盐B N 亚硝基化合物C 亚硝基苯化合物D 偶氮氨基化合物E 偶氮染料8 亚硝酸钠滴