糖类脂肪蛋白质的鉴定课件

糖类脂肪蛋白质的鉴定 1 实验 生物组织中可溶性还原糖 脂肪 蛋白质的鉴定 糖类脂肪蛋白质的鉴定 2 一 生物组织中可溶性还原糖的鉴定 1 实验原理当质量浓度为0 1g mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0 05g mL的硫酸铜溶液混合后 立即生成淡蓝色的Cu OH 2悬浊液 Cu OH 2与葡萄糖 果糖 麦芽糖等可溶性还原糖共热 能够生成砖红色的Cu2O沉淀 因此 利用该反应 可证明样液中含可溶性还原糖 R CHO 2Cu OH 2 R COOH Cu2O 2H2O 糖类脂肪蛋白质的鉴定 3 2 实验材料做可溶性还原糖的鉴定实验 还原糖的含量 生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素 因此要选用可溶性还原糖含量高 白色或近于白色的植物组织 其中以苹果 梨最好 也可用白萝卜替代 糖类脂肪蛋白质的鉴定 4 3 试剂配制甲液 0 1g mL的氢氧化钠溶液 斐林试剂乙液 0 05g mL的硫酸铜溶液 甲液乙液等量混合 现用现配 切不可分开滴加 或者久置后才用 糖类脂肪蛋白质的鉴定 5 4 实验步骤 1 制备组织样液 教师制备 2 鉴定样液 先在试管中加入2mL组织样液 糖类脂肪蛋白质的鉴定 6 再加入2mL刚配制的斐林试剂 水浴煮沸2分钟 注意观察整个实验过程中 溶液颜色的变化 糖类脂肪蛋白质的鉴定 7 还原糖检测实验的实验结果 糖类脂肪蛋白质的鉴定 8 二 生物组织中脂肪的鉴定 1 实验原理苏丹 是可以对脂肪染色的试剂 因此 当含有大量油滴的植物细胞用苏丹 染色后 在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒 糖类脂肪蛋白质的鉴定 9 2 实验材料做脂肪的鉴定实验时 所用材料一要脂肪含量高 二要有一定大小才能做徒手切片 花生种子符合该实验的要求 将花生种子经过3 4小时的浸泡使其变软 有利于切成薄片 但浸泡时间也不宜过长 否则切片时易碎裂 切不成薄片 3 试剂配制苏丹 溶液 将0 1g苏丹 干粉溶于100mL体积分数为95 的酒精溶液中 待全部溶解后即成 糖类脂肪蛋白质的鉴定 10 4 实验步骤 1 切片制作 去掉花生种皮 用左手的三个手指夹住花生的一片子叶 使花生子叶高于手指之上 为什么 右手持刀片 将子叶削去一层 形成平面 刀口向内 与花生断面平行 以均匀的动作 自左前方向右后方快速拉刀 滑行切片 注意要整个臂部用力 而不要腕部用力 如此连续动作 切下一些薄片 糖类脂肪蛋白质的鉴定 11 2 染色 用毛笔将最薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央 滴苏丹 溶液2 3滴于花生子叶薄片上 2 1min后 吸去染液 滴50 的酒精洗去浮色 吸去多余酒精 再滴1 2滴蒸馏水 盖上盖玻片 制成临时装片 3 镜检鉴定 在低倍镜下观察 找到花生子叶切片的最薄处 最好只有1 2层细胞 移至视野的中心 换用高倍镜观察 调焦至最清晰 可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒 这就是脂肪滴 油滴 若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒 则是脂肪跑了出来 糖类脂肪蛋白质的鉴定 12 脂肪检测实验的实验结果 糖类脂肪蛋白质的鉴定 13 若用物理方法如何鉴定脂肪的存在 烘烤种子后 把子叶放在白纸上用手指挤压 白纸上会出现透明的油迹 说明子叶含有脂肪 糖类脂肪蛋白质的鉴定 14 三 生物组织中蛋白质的鉴定 1实验原理在碱性溶液 NaOH 中 双缩脲 H2NOC NH CONH2 能与Cu2 作用 形成紫色的络合物 这个反应叫做双缩脲反应 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键 因此 蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应 糖类脂肪蛋白质的鉴定 15 3 试剂配制A液 0 1g mL的氢氧化钠溶液 双缩脲试剂B液 0 01g mL的硫酸铜溶液 2 实验材料做蛋白质的鉴定实验 一般选用蛋白质含量较高的大豆 可用豆浆替代 或鸡蛋清 糖类脂肪蛋白质的鉴定 16 4 实验步骤 1 制备生物组织样液 教师制备 2 鉴定 先加2mL组织样液 再加2mL双缩脲试剂A液 加3 4滴双缩脲试剂B液 糖类脂肪蛋白质的鉴定 17 蛋白质检测实验的实验结果 糖类脂肪蛋白质的鉴定 18 注意 在鉴定蛋白质时要分别滴加两种试剂 并且硫酸铜只能加3 4滴 不能过量如过量 CuSO4在碱性溶液中生成大量蓝色Cu OH 2沉淀 遮盖了紫色 鉴定蛋清组织中存在蛋白质时 要充分稀释 如稀释不够 与双缩脲试剂发生反应后 会粘固在试管内壁上 使反应不易彻底 并且试管中也不易冲洗干净 糖类脂肪蛋白质的鉴定 19 5 如稀释不够 与双缩脲