丹参三七不同配比对急性心肌缺血犬冠脉循环指标的影响.doc

丹参三七不同配比对急性心肌缺血犬冠脉循环指标的影响商洪才1 高秀梅1 史红1 张伯礼1 王永炎2摘要：目的：观察丹参三七的7种配比对冠脉血流量和心肌耗氧量的影响。方法：采用经典模型冠脉左前降支结扎法，同时结合血流动力学模型，动态观察。结果：10/6、10/3、10/0、1/10、0/10及消心痛组与模型组比较，均使冠脉血流量增加，有统计学意义（p0.01,p0.05）；除10/10组外，各给药组大部分时间内有抑制心肌耗氧量增加的趋势。结论：1、丹参和三七均使冠脉血流量增加，同时抑制心肌耗氧量的增加；2、丹参、三七有不同的效应时相；3、10/3、10/6两组为适宜组合。关键词：丹参 三七 配比 冠脉循环指标 优选冠心病心绞痛是由于心脏的供氧和需氧之间的平衡失调，供不应求所致，因此增加冠脉血流量、降低心肌耗氧量或提高心肌组织对缺氧的耐受力是治疗的有效途径之一【1】。丹参、三七是治疗冠心病的中成药的主要组成药物，为此以冠脉血流量及心肌耗氧量为观测指标进行了丹参三七不同配比的优选研究。现报告如下：材料与方法1 实验材料：1.1 实验动物及来源：健康成年杂种犬，雌雄不限，体重（11.171.83）kg，由天津市中医学院实验动物中心提供。1.2 实验药品工艺及来源：实验药物提取由北京中医药大学药学院完成。工艺如下：选丹参道地药材（陕西商洛）3500g，用10倍量90%乙醇回流提取2次，再用60%乙醇回流提取一次，挥干乙醇，得丹参总醇提物干燥品计787.4g；同时选三七道地药材（云南文山）3500g，用10倍量95%乙醇回流提取3次，挥干乙醇，得浓缩物，加水溶解，用乙醚脱脂后加正丁醇萃取，减压回收正丁醇的总皂苷粗提物403.6g。将以上两种粗提物分别研钵研细，过200目筛，按照7种比例（10/0、10/1、10/3、10/6、10/10、1/10、0/10）将二者混匀充分，经换算配制成生药浓度为1.53g/ml的药液。1.3 实验仪器与试剂：BIOPAC SYSTEM16道生理系统（美国），电切刀（波兰），SC-电动呼吸机（上海）。消心痛（天津海光制药厂，批号：010901）市售，TTC（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride）Sigma产品。CBI8000多普勒超声流量计及不同型号探头（美国），AVL-995BECKMAN血气分析仪（德国）。2 动物分组及给药方法：选健康成年犬50只，计算机随机数字法分为10个组，每组5只。如下：假手术组（开胸后仅穿线，不做结扎；生理盐水2ml/kg）；模型组（既穿线又结扎；生理盐水2ml/kg）；丹参/三七10/0：简称10/0组（模型+给药；1.31g/kg，丹参1.31，三七0 g/kg）；丹参/三七10/1：简称10/1组（模型+给药；1.31g/kg，丹参1.19，三七0.12 g/kg）；丹参/三七10/3：简称10/3组（模型+给药；1.31g/kg，丹参1.01，三七0.30 g/kg）；丹参/三七10/6：简称10/6组（模型+给药；1.31g/kg，丹参0.82三七0.49 g/kg）；丹参/三七10/10：简称10/10组（模型+给药；1.31g/kg，丹参0.655，三七0.655 g/kg）；丹参/三七1/10：简称1/10组（模型+给药；1.31g/kg，丹参0.12，三七1.19 g/kg）；丹参/三七0/10：简称0/10组（模型+给药；1.31g/kg，丹参0，三七1.31 g/kg）；阳性对照组：简称消心痛组（模型+给药；0.34mg/kg）3 模型制作【2，3】：以3%戊巴比妥钠1ml/kg于犬左前肢静脉注射麻醉；右侧卧位固定于手术台上，剪去颈部、胸部、腹部和后肢内侧的毛；分离气管并插入气管插管，连接并开通呼吸机行正压人工呼吸（频率1828次/分）。在腹部正中线右侧开口，分离出十二指肠以备给药。自右颈静脉将充满肝素的插管插入冠状静脉窦，以同步抽取冠状窦及动脉血标本，用血气分析仪测定PO2，以计算心肌耗氧量；以电切刀在左侧第45肋间横向切开皮肤，分离肌肉，打开胸腔，用开胸器撑开胸腔切口，完全暴露心脏，纵向切开心包膜，向外牵拉缝合到胸壁，做心包摇床；钝性分离冠状动脉左旋支，放置适宜内径的超声多普勒流量计探头（通常犬冠状动脉左旋支放置内径为1.52.5mm探头），测量冠脉流量（CBF）；小心分离冠状动脉左前降支中段，于第一、二分支间穿线以备结扎，待稳定后，描记正常状态的冠脉血流量，同时取血（2ml）送检血气；结扎冠状动脉左前降支，造成实验性急性心肌缺血模型。于结扎后30分钟给药，给药前记录冠脉流量，并取血送检血气。此后动态观察3小时，并于给药后30分、60分、90分、120分、180分记录冠脉血流量，其中于30分、90分取血送检血气，计算心肌耗氧量。4 指标观测：冠脉血流量（单位：ml/min）由流量计直接读出；心肌耗氧量由下列公式计算得到：心肌耗氧量=（动脉血氧含量-静脉血氧含量）*冠脉血流量/100。动、静脉血氧含量由天津中医学院第一附属医院生化室协助完成。5 统计学方法：实验数据以均数标准差表示。对实测值进行自身前后t检验；以各组药后各时点值与药前值的比值百分率分别与模型组进行随机区组t检验。所有数据分析采用Stata4.0软件包进行。结 果1 对犬冠脉血流量的影响：从表1中我们可以发现，模型组各时点相对值与假手术组比较，均有统计学意义（p0.01），说明模型成功。10/6、10/3、10/0、1/10、0/10及消心痛组与模型组比较，均有统计学意义（p0.01,p0.05）。从图1可以看到，10/0组在给药90min前作用强于0/10组，但90min后，0/10组效应明显增加；10/6、10/3组大部分时点效应均强于10/0、0/10组，10/10、10/1组反而不及；消心痛组给药30min时达高峰，但很快滑落；中药组各时间段内，表现平稳，稳中有升。表1：各给药组对急性心肌缺血犬冠脉血流量的影响（%） s 单位：ml/min组别n剂量（/kg）药前值（100%）30min60min药后值90min120min180min假手术548.910.434810.07(98.231.93)*47.210.08(96.532.77)*47.49.24(97.242.61)*45.89.42(93.781.28)*45.569.42(93.312.19)*模型组544.55.1539.984.04(89.992.59)37.522.87(84.654.01)34.682.00(78.486.66)32.42.30(73.225.36)30.41.67(68.7955.68)10/051.31g54.4820.0260.4621.9(111.616.00)*60.8724.62(111.217.51)*55.3819.66(103.3012.53)*49.3317.90(91.479.12)*48.5116.37(90.6910.02)*10/151.31g46.614.8138.9212.13(84.4116.44)3811.73(82.0915.17)39.412.03(84.9112.93)36.2510.37(78.5712.60)33.888.48(75.8417.66)10/351.31g38.8810.3438.9813.11(99.2412.28)39.9213.78(101.329.66)*42.3212.32(108.597.29)*45.2411.67(116.767.24)*44.8211.8(115.757.08)*10/651.31g41.924.2338.548.31(91.5314.15)43.448.49(103.4915.11)*46.197.69(109.8710.21)*46.626.74(111.119.97)*46.47.67(110.5512.83)*10/1051.31g48.314.8243.410.83(92.2913.59)45.08.86(100.0832.45)50.210.28(110.8334.18)47.569.36(108.5749.62)45.89.76(105.9154.36)1/1051.31g49.38.1248.365.52(99.039.87)44.848.71(93.442.47)*45.6610.52(94.7725.53)43.1510.86(90.5929.82)50.7414.88(104.8130.15)*0/1051.31g42.699.6138.8410.93(90.9111.66)39.8812.59(92.9714.72)41.8416.26(96.5921.83)46.4018.86(107.2626.53)*44.889.27(106.2310.81)*消心痛50.34mg30.468.6938.68.41(128.7817.40)*35.512.56(115.917.42)*31.412.66(100.7215.13)*28.49.50(92.369.02)*27.799.56(90.228.29)*注：与药前自身比较： p0.05 p0.01与模型组比较：* p0.05 * p0.012 对心肌耗氧量的影响：由表2可知，模型组与假手术组比较，有统计学意义（p0.05）。然而，除10/10组外，各给药组大部分时间内可见抑制心肌耗氧量增加的趋势。表2：各给药组对急性心肌缺血犬心肌耗氧量的影响 （%） s组别n剂量（/kg）药前值（100%） 药30min后90min假手术51.860.821.910.92(101.0110.80)1.910.94(101.1112.35) *模型组51.390.422.650.31(217.69119.97)2.620.25(210.8999.16)10/051.31g2.151.222.791.74(135.1747.48)2.701.13(142.1349.04)10/151.31g1.770.421.950.87(109.6344.32)2.181.01(120.7648.58)10/351.31g1.440.831.530.66(123.1566.16)2.040.73(169.2496.09)10/651.31g1.290.361.180.35(94.6229.57)1.660.38(135.2638.04)10/1051.31g1.080.691.630.69(204.08182.73)2.170.86(262.86167.07)1/1051.31g1.610.622.180.77(153.6980.67)2.210.96(157.4793.7)0/1051.31g1.210.571.210.58(99.188.57)1.351.09(107.1147.22)消心痛50.34mg0.870.531.180.77(132.4626.03)1.060.55(127.0534.33)注：与药前自身比较： p0.05 p0.01 与模型组比较：* p0.05 * p0.01 小 结缺血性心脏病是严重威胁人类生命的常见疾病，冠心病病人心肌灌注不足，冠脉血流量下降引起心肌细胞缺血、缺氧而导致心功能障碍【4】，因此冠脉血流量和心肌耗氧量是进行冠心病临床药物疗效评价的一对金指标。实验表明，丹参和三七均可使冠脉血流量增加，同时还可抑制心肌耗氧量的增加，从而改善心肌的供血供氧，恢复供氧和耗氧之间的平衡，与文献报道基本一致【5】。并且丹参、三七有不同的效应时相，丹参在实验的前半程（给药90min前）作用显著，三七在后半程效应明显（给药90min后），这也为二者配伍应用提供了可能。同时发现，在对冠脉血流量有效增加的各组中，以丹参为主的药组（10/0、10/3、10/6）作用较强；当配比适宜时（10/3、10/6），配伍组效应强于单味药组；配比不当（10/10、10/1）作用反而不及单味药组。因此10/3、10/6两组为最佳组合，与前期报道一致【6】。另外消心痛组在给药后30min即发挥作用，但很快减弱；而中药组则作用平稳而持久、稳中有升，远后效应明显。为我们今后的中药研发提供一种新的思路。参考文献1韩玲，任建平，杨素娟，等.益心康胶囊和复方丹参片对心肌代谢及其耗氧量的影响.中药药理与临床，2000，16（2）：32陈奇主编. 中药药理研究方法学，人民卫生出版社，1993：5343徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学，人民卫生出版社，1982：7144吴守华，薛传德，徐燕琴.果糖二磷酸钠辅助治疗冠心病.新药与临床，1997，16：2015李仪奎，姜名瑛.中药药理学.中国中医药出版社，1992，1356商洪才，张伯礼，高秀梅，等.丹参三七不同配比药效学比较研究.辽宁中医杂志，2002，29（5）：297Effect on Coronary Cycle Indexes of Dog with Experimental Acute Myocardial Ischemia of Different Matching of Danshen and SanqiShang Hongcai, Gao Xiumei, Shi Hong, et al(Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,Tianjin 300193)Abstract:Objective:To observe the effect of 7 different proportions of Danshen with Sanqi on Coronary Bl