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狂犬病毒ELISA抗体检测试验一、试验材料：1预包被狂犬病毒抗原的微孔板2酶标记物 3狂犬病毒IgG阳性对照4狂犬病毒IgG临界对照5狂犬病毒IgG阴性对照6显色液A7显色液B8终止液9浓缩洗涤液（10倍）10样品稀释液11封板膜二、操作方法：1试剂盒放置室温平衡2030分钟。取出浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水作10倍稀释备用。2稀释样品：将已分离好的血清用样品稀释液做1:100稀释（即取10l血清或血浆加入到1ml样品稀释液中），并充分混匀。3加样：取所需量的预包被微孔板条固定于板架上，加入稀释好的样品，100l/孔，然后将阳性、阴性对照各加1孔，临界对照加3孔，100l/孔，另留一孔不加样品作空白对照孔，在记录纸上记录各样品和对照品的次序或位置。剩余的板条放入密封袋中保存。4孵育：加样完成后，置37恒温箱或水浴箱（用封板膜覆盖板条，以避免水珠滴入微孔）中孵育30分钟。5洗板：甩净孔中液体，拍干，用稀释好的洗涤液加满每孔，停留1分钟后甩净、拍干，反复洗板3次。6加酶：除空白对照外，其余各孔垂直滴加酶标记物50l（1滴），置37孵育30分钟。7显色：按第5步洗板3次，拍干后每孔（含空白孔）垂直滴加显色液A、B各50l（1滴），置37避光显色15分钟。8终止：每孔（含空白孔）立即加入终止液50l（1滴），混匀后用酶标仪450nm波长测定A值。3、 结果判定：1 单波长检测：以空白孔调零，用酶标仪读取450nm处的A值。2 双波长检测：用酶标仪读取450nm和630nm处的A值，以A450nmA630nm计算A值。3 阴性对照A值0.15,0.20临界对照A值平均值0.80，临界对照A值平均值/阴性对照A值平均值2.0，阳性对照A值临界对照A值平均值，证明实验成立，否则试验结果无效，需重新试验。4 如样品孔A值临界对照A值的平均值判为阳性；反之为阴性。56 （学习的目的是增长知识，提
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