生化室作业指导书

精选文档 生化室作业指导书生化室作业指导书 文件编号：ZTGRY-1-SH-0161 第第 1 1 版版 编制：编制： 审核：审核： 批准：批准： 生效日期：生效日期：20142014 年年 1 1 月月 1 1 日日 精选文档 梓潼县工人医院检验科梓潼县工人医院检验科 精选文档 目目 录录 序号序号主主 题题 内内 容容 代代 号号页页 号号 1 血清总胆红素测定 ZTGY-1-SH-015 2 血清直接胆红素测定 ZTGY-1-SH-0210 3 血清总蛋白液体双缩脲法测定 ZTGY-1-SH-03 3 13 4 血清白蛋白溴甲酚绿法测定 ZTGY-1-SH-0416 5 血清丙氨酸氨基测定 ZTGY-1-SH-0519 6 血清天门冬氨酸氨基测定 ZTGY-1-SH-0623 7 血清碱性磷酸酶测定 ZTGY-1-SH-0727 8 血清 -淀粉酶测定 ZTGY-1-SH-0831 9 血清葡萄糖氧化酶法测定 ZTGY-1-SH-0935 10 血清尿素氮 Urease-GLDH 紫外法 ZTGY-1-SH-01039 11 血清肌酐苦味酸法测定 ZTGY-1-SH-1143 12 血清尿酸 Uricase 法测定 ZTGY-1-SH-1246 13 血清总胆固醇酶试剂法测定 ZTGY-1-SH-1350 14 血清甘油三酯酶试剂法测定 ZTGY-1-SH-1454 15 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 ZTGY-1-SH-1576 16 血清低密度脂蛋白胆固醇测定 ZTGY-1-SH-1680 17 血清肌酸激酶(CK) 法测定 ZTGY-1-SH-1784 18 血清肌酸激酶 MB 同工酶测定 ZTGY-1-SH-1888 19 血清乳酸脱氢酶 DGKC 法测定 ZTGY-1-SH-1992 20 血清 a-羟丁酸脱氢酶测定 ZTGY-1-SH-2099 21 血清 -谷氨酰转移酶 ZTGY-1-SH-21106 22 复合校准品 ZTGY-1-SH-22192 23 美菱冰箱操作维护规程 ZTGY-1-SH-23203 25 纯水机操作维护规程 ZTGY-1-SH-24205 26 DS-301 生化分析仪操作维护规程 ZTGR -3-SH-25209 精选文档 27 离心机操作维护规程 ZTGR -3-SH-26222 精选文档 修修 订订 页页 序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 精选文档 血血清清总总胆胆红红素素 ( (T T- -B BI IL L) )测测定定 1 1. . 实实验验原原理理 血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883 年 Ehrlich 提出的重氮法胆红素测量法 1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方 法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一 种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。 英诺华总胆红素试剂是钒酸氧化法，PH 接近于 3 时，在钒酸盐及表面活性剂的作用下， 总胆红素被氧化成胆绿素。此时，胆红素特有的黄色减少，通过测定钒酸作用前后的吸光度的差 可求得样品中总胆红素的浓度。 胆红素 钒酸胆绿素 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA 血浆，应避光保存。 3 3. . 标标本本存存放放： 1525保存可稳定 2 天；28保存可稳定 7 天；-20保存可稳定 3 个月，如冰冻保 存，不可反复冻融！。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下避光保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂：英诺华总胆红素试剂盒（ 试剂 1: 432ml； 试剂 2：8ml） 6.1.1 试剂组成 试剂 1： 柠檬酸缓冲液 88mmol/L 试剂 2： 磷酸盐缓冲液 50mmol/L 偏钒酸钠 3mmol/L SID 见瓶签 精选文档 6.1.2 试剂准备：液体试剂，直接使用，无需配制。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12 个月。试剂 2 必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口； 避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15 分钟， 接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 7 7. . 仪仪器器 ：英诺华生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件。 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP 文件。 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以朗道校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报 告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L 报告。手工测定计算方法为： A 标本 总胆红素 (mol/L) = 校准液浓度 A 标准 1 12 2. . 参参考考值值范范围围： 5.1-19mol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在 血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生 成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。 精选文档 溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红 素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert 综合症。 由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总 胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测 水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 0-300mol/L 14.2 精密度：批内精密度CV3%，批间精密度R10%。 14.3 灵敏度：本试剂的检测限为0mol/L。 14.4 病人结果可报告范围：0300mol/L 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为684mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品 用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/L 时，在经过复查 等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为300mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶 液作 1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度0.3g /L，血红蛋白浓度 3.00g/L，甘油三酯浓度 2.5g/L 时无明显干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.李影林 . 中华医学检验全书M. 北京 : 人民卫生出版社 , 1996. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999. 3.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S. 4.叶应妩 , 王毓三 , 申子瑜 . 全国临床检验操作规程M. 南京 : 东南大学出版社 , 2006. 5.CLSI/NCCLS C28- A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Gu idelineS. 8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号 精选文档 9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，版号V2.0 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 精选文档 血清直接胆红素（血清直接胆红素（D-BILD-BIL）测定）测定 1. 1. 实验原理实验原理 PH接近于3时，在钒酸及表面活性剂的作用下，直接胆红素被氧化成胆绿素，此时，胆红素特有的黄 色减少，通过检测钒酸作用前后吸光度的差，可求得样品中直接胆红素的浓度。 2. 2. 标本：标本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。 3. 3. 标本存放：标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不 可反复冻融！。 4. 4. 标本运输：标本运输：常温条件下避光保存运输。 5. 5. 标本拒收标准：标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6. 6. 实验材料实验材料 6.1 试剂：英诺华直胆红素试剂盒： 试剂 1:( 432ml； 试剂 2：8ml) 6.1.1 试剂组成 试剂1： .1.1 试剂组成 试剂 1： 柠檬酸缓冲液 88mmol/L 试剂 2： 磷酸盐缓冲液 50mmol/L 偏钒酸钠 3mmol/L SID 见瓶签 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式液体试剂，直接使用，无需配制。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。 试剂 2必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果 精选文档 接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7. 7. 仪器仪器：英诺华DS-301生化分析仪 8. 8. 操作步骤操作步骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华DS-301生化分析仪操作规程.SOP文件 检验结果的判断与分析检验结果的判断与分析 10.10. 质量控制：质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告 限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。 11.11. 计算方法计算方法 以贝克曼复合校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接 报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告 。手工测定计算方法为： Au 直接胆红素(mol/L) =-校准液浓度 As 12.12. 参考值范围：参考值范围：1.7-6.8mol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自 己的参考值。 13.13. 临床意义：临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白 蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯 由胆管排入肠道。 溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高， 形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能 滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检 测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直 接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 14.14. 操作性能操作性能 14.1 线性范围：0320mol/L 14.2 精密度：批内精密度CV3%，批间精密度R10。 14.3 灵敏度：0mol/L。 精选文档 14.5 病人结果可报告范围：0320mol/L 1515 超出范围结果处理超出范围结果处理 本法线性上限为320mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液 作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。 16.16. 病危报警值的处理病危报警值的处理 无。 17.17. 方法局限性方法局限性 17.1 本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新 测定，结果乘以2。 ， 17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度0.3g /L，甘油三酯浓度 2.5g/L 时无明显干扰。 。 18.18. 补救措施：补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 19.19. 参考文献参考文献： 1.李影林 . 中华医学检验全书M. 北京 : 人民卫生出版社 , 1996. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999. 3.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S. 4.叶应妩 , 王毓三 , 申子瑜 . 全国临床检验操作规程M. 南京 : 东南大学出版社 , 2006. 5.CLSI/NCCLS C28- A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Gu idelineS. 8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号 9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，版号V2.0 20.20. 其他：其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。 精选文档 血血清清总总蛋蛋白白 ( (T TP P) )双双缩缩脲脲法法测测定定 1 1. .实实验验原原理理 双缩脲比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度 成正比。 OH 蛋白质 + Cu2+ -紫红色复合物 2 2. . 标标本本采采集集 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清或血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 2025保存可稳定6 天； 48保存可稳定4 周； -20保存至少可稳定 1 年。 4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 : : 6.1 江苏英诺华总蛋白测定试剂盒 试剂 1:470ml 6.1.1 试剂组成 试剂 1（R1）： 氢氧化钠 200 mmol/L 酒石酸钾钠 64 mmol/L 氢氧化钠 200 mmol/L 碘化钾 30 mmol/L 硫酸铜 12 mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效 期为 12 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 精选文档 6.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。 使用试剂时应采取必要的防护。 6.2 校准品：牛血清白蛋白，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器 ：英诺华 DS-301 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华 DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华 DS-301 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L 报告。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 60-83g/L （注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。 根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引 起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时 总蛋白浓度升高。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 0150g/L 14.2 精密度： 批内精密度 CV3%，批间精密度 R5。 14.3 灵敏度：本试剂的检测限为0g/L。 14.4 病人结果可报告范围 0150g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯 化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 无。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 精选文档 17.1 本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质：静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显 增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度300mol/L，胆红素 浓度 400mol/L，血红蛋白浓度 5.00g/L，甘油三酯浓度 10g/L 时没有观察到干扰 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 19.19. 参考文献参考文献： 1.李影林 . 中华医学检验全书M. 北京 : 人民卫生出版社 , 1996. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999. 3.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S. 4.叶应妩 , 王毓三 , 申子瑜 . 全国临床检验操作规程M. 南京 : 东南大学出版社 , 2006. 5.CLSI/NCCLS C28- A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Gu idelineS. 8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号 9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 精选文档 血血清清白白蛋蛋白白（ A AL LB B）溴溴甲甲酚酚绿绿（ B BC CG G）法法测测定定 1 1. .实实验验原原理理 在 pH 值 4.1 时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处有吸收峰， 颜色的深度与白蛋白浓度成正比。 pH4.2 白蛋白 +溴甲酚绿 -绿色化合物 2 2. . 标标本本采采集集 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525）可以稳定一周， 在冰箱保存的条件下（28）稳定一个月， -20保存至少可以稳定3 个月。 4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 : : 6.1 江苏英诺华白蛋白测定试剂盒（440ml） 6.1.1 试剂组成 琥珀酸缓冲液 50mmol/L 溴甲酚绿 (BCG) 0.3mmol/L 聚氧乙烯月桂醚 1mmol/L STD 40g/L 6.1.2 试剂准备：液体单一试剂，开瓶即用。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效 期为 12 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 精选文档 7 7. . 仪仪器器 ：英诺华 DS-301 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 朗道复合校准品复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人 结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为： Au 白蛋白 (g/L)= 校准液浓度 As 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 成人 3448g/L 儿童（ 4-14 岁） 3854g/L 1 13 3. . 临临床床意意义义： 白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要 组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多 见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助 于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用 于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 060g/L 14.2 批内精密度 CV3%，批间精密度 R10。 14.4 灵敏度： 0.2%。 14.5 病人结果可报告范围：269g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化 钠溶液作 1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 精选文档 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 17 7. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 18 8. . 参参考考文文献献 1.李影林 . 中华医学检验全书M. 北京 : 人民卫生出版社 , 1996. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999. 3.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S. 4.叶应妩 , 王毓三 , 申子瑜 . 全国临床检验操作规程M. 南京 : 东南大学出版社 , 2006. 5.CLSI/NCCLS C28- A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Gu idelineS. 8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号 9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 精选文档 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 I IF FC CC C 推推荐荐方方法法 测测定定 1 1. .实实验验原原理理 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 ALT L-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸 丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O 上述偶联反应中，还原性辅酶（NADH）的氧化速率与标本的ALT 活性成正比。 NADH 在 340nm 有特异吸收，因而可检测NADH 吸光度的下降来计算ALT 活力。 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失：28保存： 10%；1525保存： 17%；标本稳定 性： -20保存至少可稳定4 周。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 标本溶血、细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂英诺华ALT 测定试剂盒（ 试剂 1: 360ml； 试剂 2：45ml ） 6.1.1 试剂组成 试剂 1（R1）： Tris 缓冲液 100mmol/L L-丙氨酸 500mmol/L 乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L 试剂 2（R2）： Tris 缓冲液 100mmol/L LDH（乳酸脱氢酶） 300U/L 还原型辅酶I 二钠盐 10mmol/L a-酮戊二酸 100mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 LDH（乳酸脱氢酶） 精选文档 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试 剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使 用试剂。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器 ：英诺华 DS-301 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以校准品 ALT 校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可 靠的检测结果，以U/L 报告。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 4 女性 5-35U/L 男性 5-40U/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1, ,2 2 ： ：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT） ，天门冬氨酸氨基转 移酶（ AST）旧称谷草转氨酶（GOT） 。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨 基从氨基酸转移给-酮酸的反应。 ALT 是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而 AST 水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT 和 AST 的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT 比率用于肝病的鉴别诊断。 比率 1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。 1 14 4. . 操操作作性性能能 精选文档 14.1 线性范围 0500U/L 14.2 精密度： 批内精密度 CV3%，批间精密度 R10。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为2104 14.5 病人结果可报告范围 0U/L-500U/L 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结果乘以10。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结 果乘以 10。 17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度300mg /L，胆红素浓度 400mg/L，血红蛋白浓 度4.00g/L，甘油三酯浓度20g/L 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.李影林 . 中华医学检验全书M. 北京 : 人民卫生出版社 , 1996. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999. 3.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S. 4.叶应妩 , 王毓三 , 申子瑜 . 全国临床检验操作规程M. 南京 : 东南大学出版社 , 2006. 5.CLSI/NCCLS C28- A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Gu idelineS. 8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号 9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 精选文档 血清天门冬氨酸氨基转移酶血清天门冬氨酸氨基转移酶 IFCCIFCC 推荐方法测定推荐方法测定 1 1. . 实实验验原原理理： 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 L-天门冬氨酸 + -酮戊二酸 AST 草酰乙酸 +L-谷氨酸 草酰乙酸 + NADH +H+ MDH 苹果酸脱氢酶 L-苹果酸 +NAD+ 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失：28保存： 700U/L NADH 0.18mmol/L L-天门冬氨酸 250mmol/L 试剂 2(R2)： Tris 缓冲液 pH7.8 100mmol/L a-酮戊二酸 12mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。有效期为12 个月，试剂不可冰冻。 精选文档 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试 剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中有防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使 用试剂。 6.2 校准品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器 ：英诺华 DS-301 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以校准品 AST 校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可 靠的检测结果。不使用校准品进行AST 活力检测，可以直接使用A/min 均值乘以计算因 子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALT 活力的计算因子见下 表： A A/ /m mi in n因因子子 = = A AS ST T 活活力力 U U/ /L L 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 4 8-40U/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1, ,2 2 丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT） ，天门冬氨酸氨基转移酶（AST） 旧称谷草转氨酶（GOT） 。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转 移给 -酮酸的反应。 ALT 是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST 水平的升高和心肌或骨骼 肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT 和 AST 的检测用于鉴别肝损伤和心 精选文档 肌或骨骼肌损伤。AST/ALT 比率可用于肝病的鉴别诊断。比率1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 0-500U/L。 14.2 精密度： 批内精密度 CV5%，批间精密度 R10。 14.3 灵敏度：本试剂的检测限为0U/L。 14.4 病人结果可报告范围 0-500U/L。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1+9 稀释，重新测定，结果乘以10。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 无。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1+9 稀释，重新测定，结 果乘以 10。 17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度300mg /L，胆红素浓度 400mg/L，甘油三酯浓 度20g/L 时没有观察到干扰。红细胞内富含AST，因此溶血血清检测结果明显偏高。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献： 1.李影林 . 中华医学检验全书M. 北京 : 人民卫生出版社 , 1996. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd edM. Philadelphia: W.B Saunders Company, 1999. 3.WS/T 225-2002, 临床化学检验血液标本的收集与处理S. 4.叶应妩 , 王毓三 , 申子瑜 . 全国临床检验操作规程M. 南京 : 东南大学出版社 , 2006. 5.CLSI/NCCLS C28- A2, How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory, Approved Gu idelineS. 8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号 9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 精选文档 血清碱性磷酸酶（血清碱性磷酸酶（ALPALP）磷酸对硝基苯酚法测定）磷酸对硝基苯酚法测定 1 1. .实实验验原原理理 磷磷酸酸对对硝硝基基苯苯酚酚（4 4- -N NP PP P）在在碱碱性性磷磷酸酸酶酶的的作作用用下下，将将其其磷磷酸酸基基转转移移到到2-氨基 -2 甲 基-1-丙醇（ AMP）受体分子上，释放出的对硝基苯酚（4-NP）在碱性溶液中分子重排形成 黄色醌，可在405nm 下检测。黄色醌形成速率与ALP 活力成正比。 ALP+Mg2+ 4-NPP + H2O -4-NP+无机酸 4 2 2. . 标标本本采采集集与与处处理理： 2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 标本类型：标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。 2.3 血清分离：应在收集后两小时内分离出来。避免使用含EDTA 或草酸盐的血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 ：23 天内的活性损失：1525保存： 10%；标本稳定性： 48保存稳 定 7 天； -20保存至少可稳定2 个月 标本。如果分析延迟8 小时以上，最好把血清冷藏。 冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 ： 6.1 英诺华 ALP 测定试剂盒（试剂1 432 ml 试剂 2 8 ml） 6.1.1 试剂组成 试剂 1： AMP 缓冲液 200 mmol/L 氯化镁 5 mmol/L 氯仿 0.1%V/V 试剂 2： 磷酸对硝基酚 20mmol/L 氯仿 0.1%V/V 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 精选文档 6.1.3 试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不 可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：碱性磷酸酶试剂中含叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜。反应过程中产生的对硝基 苯酚有毒性，切勿吸入、吞食、接触皮肤或粘膜。若反应液与皮肤或粘膜接触，请速用水冲洗。 6.2 校准品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器 ：英诺华 DS-301 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见英诺华DS-301 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规