番茄红素质量标准及检验规程.doc

宁波海逸生物科技有限公司 页码：第 5 页 共 5 页宁波海逸生物科技有限公司技术标准-原辅料质量标准及检验规程文件编号：STP-YL-017番茄红素质量标准及检验规程版本/修改状态：A/0复印份数：3份编 制 人：毛雪雯审 核 人：李杰批 准 人：施建耀编制日期：2011年 1月20日审核日期：2011年 1月20日批准日期：2011年 1月20日制定部门： 技术管理部颁发部门： 技术管理部执行日期：2011年 1月20日执行部门： 技术管理部、质量管理部范 围：本标准规定了番茄红素质量标准的检验方法和操作要求；本标准适用于番茄红素的质量检测。引用标准： GB/T 22249-2008 保健食品中番茄红素的测定质量标准：检 测 项 目标 准 要 求性状 针状深红色晶体，熔点174，可燃。易溶于二硫化碳（1g/50ml)、沸腾乙醚（1g/3L)、正已烷（1g/14L,0）。溶于氯仿和苯。微溶于乙醇和甲醇。不溶于水。气味番茄红素特有气味含量， mg/kg 10水分，mg/kg 6灰分，mg/kg 1.0铅，ppm 1.5砷，ppm 1.0咖啡碱，% 细菌总数，cfu/g 1000霉菌及酵母菌，cfu/g 100大肠杆菌不得检出沙门氏菌不得检出宁波海逸生物科技有限公司技术标准-原辅料质量标准及检验规程文件编号：STP-YL-017番茄红素质量标准及检验规程版本/修改状态：A/0复印份数：3份编 制 人：毛雪雯审 核 人：李杰批 准 人：施建耀编制日期：2011年 1月20日审核日期：2011年 1月20日批准日期：2011年 1月20日制定部门： 技术管理部颁发部门： 技术管理部执行日期：2011年 1月20日执行部门： 技术管理部、质量管理部检验规程1 番茄红素含量1.1 原理 根据番茄红素易溶于二氯甲烷等溶剂的理化性质，试样经焦性没食子酸-二氯甲烷溶液提取，定容，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，由紫外检测器检测，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。2.2 试剂与材料 2.1 乙腈：色谱纯。2.2 甲醇：色谱纯。 2.3 二氯甲烷呢：分析纯。2.4 焦性没食子酸：分析纯。2.5 N,N-二甲基甲酰胺：分析纯。2.6 番茄红素对照品：纯度95%，避光保存于-70冰箱。2.7 焦性没食子酸-二氯甲烷溶液：称取6.0g焦性没食子酸，用二氯甲烷溶解并定容至100mL。2.8 番茄红素对照品溶液：准确称量番茄红素0.001g（精确到0.0001g），置于10mL棕色容量瓶中，加焦性没食子酸-二氯甲烷溶液溶解并定容至刻度，混匀，此溶液临用现配。由于番茄红素不稳定，使用前可先用液相色谱归一化法确定其纯度。3. 仪器3.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器。3.2 超声波清洗器。4. 分析步骤4.1 试样的制备4.1.1 一般试样的制备根据试样中番茄红素的含量，称取0.5g2.0g均匀试样（精确称量至0.001g）置于25mL棕色容量瓶中，加焦性没食子酸-二氯甲烷溶液20mL，超声提取30min后，加焦性没食子酸-二氯甲烷溶液定容至刻度，摇匀，过0.45m滤膜。滤液备用。4.1.2 微胶囊化试样的制备 根据试样中番茄红素的含量，称取0.5g2.0g均匀试样置于25mL棕宁波海逸生物科技有限公司技术标准-原辅料质量标准及检验规程文件编号：STP-YL-017番茄红素质量标准及检验规程版本/修改状态：A/0复印份数：3份编 制 人：毛雪雯审 核 人：李杰批 准 人：施建耀编制日期：2011年 1月20日审核日期：2011年 1月20日批准日期：2011年 1月20日制定部门： 技术管理部颁发部门： 技术管理部执行日期：2011年 1月20日执行部门： 技术管理部、质量管理部色容量瓶中（精确称量至0.001g），加0.2g焦性没食子酸和5mL N,N-二甲基甲酰胺后超声提取30min后，再用焦性没食子酸-二氯甲烷溶液定容至刻度，摇匀，过0.45m滤膜。滤液备用。4.2 标准曲线的制备分别吸取番茄红素对照品溶液（2.8），用焦性没食子酸-二氯甲烷溶液稀释并在棕色容量瓶中定容的浓度分别为0.2、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0g/mL标准系列。4.3 液相色谱参考条件4.3.1 色谱柱：ODS C18柱或ODS C30柱（适用于番茄红素几何异构体的分离或含多种胡萝卜素试样的分析），150mm4.6mm，5m。4.3.2 柱温：30。4.3.3 紫外检测器：检测波长472nm。4.3.4 流动相：甲醇+乙腈=50+50。4.3.5 流速：1.0Ml/min。4.3.6 进样量：10L。4.3.7 色谱分析：取标准溶液及试样溶液注入色谱中，以保留时间定性，以试样峰面积或峰高与标准比较定量。5 计算试样中番茄红素的含量按式（1）进行计算： cV1000X= （1） m10001000式中：X试样中的含量，单位为克每千克（g/kg）；c根据标准曲线查得的番茄红素的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；V试样定容体积，单位为毫升（mL）；m试样质量，单位为克（g）。计算结果保留三位有效数字。6 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。宁波海逸生物科技有限公司技术标准-原辅料质量标准及检验规程文件编号：STP-YL-017番茄红素质量标准及检验规程版本/修改状态：A/0复印份数：3份编 制 人：毛雪雯审 核 人：李杰批 准 人：施建耀编制日期：201