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电泳技术摘要:1,说出电泳的基本原理2,物品备齐,放置有序55答错全扣缺一项扣1分操作质量标准80分1,电泳仪与电泳槽的连接,确定正负板2,将缓冲液倒入电泳槽中,各槽液面高度一致.关键词:电泳类别:工业来源:牛档搜索(Niudown.COM)六、电泳技术目标:能正确地使用电泳仪和熟练地进行醋酸纤维薄膜电泳准备:电泳仪,电泳槽、醋纤膜、点样器、滤纸、试剂操作方法及评分标准项目总分考核内容应得分评分细则实得分准备质量标准10分1、说出电泳的基本原理2、物品备齐,放置有序55答错全扣缺一项扣1分操作质量标准80分1、电泳仪与电泳槽的连接,确定正负板2、将缓冲液倒入电泳槽中,各槽液面高度一致3、用四层纱布或滤纸做好盐桥4、取28cm的醋酸纤膜在毛面1.5cm处用铅笔画一横线、编号5、浸入缓冲液中约20分钟,浸透6、用摄子夹出薄膜置洁净滤纸中吸去多余缓冲液7、在毛面划线端内侧用点样器蘸血清点样器与桌面垂直与横线平行8、点好样的薄膜毛面朝下,点样端置电泳槽负极铺平,平衡5分钟9、调节电压100150V通电4050分钟10、关闭电源用摄子夹出薄膜置染色液中23分钟11、转入漂洗液中漂去多余染料直至背景无色为止12、将漂净的膜用滤纸吸干蛋白质按区带分段剪下浸于0.4mol/L NaOH溶液中振摇数次13、用600620nm波长比色,读取各管吸光度14、计算出各组分的含量15、填写结果报告5555551055555555接错全扣液面高度不一致扣2分视完成情况给分漏此项全扣时间不够未浸透扣3分漏此项全扣视完成情况给分放置错误全扣通电时间不够扣2分时间掌握不准扣3分漂洗不干净扣2分视完成情况给分波长选择错误全扣计算错误全扣报告不规范扣3分全程质量标准10分1、操作熟练、规范、有条不紊2、实验台整齐,干净3、在规定时间内完成523按完成情况给分台面乱试剂溅出全扣超过5分钟扣1分电泳的基本原理:在溶液中,若能吸附带电质点或本身带有可解离基因的物质颗粒(如蛋白质,氨基酸等),在一定的pH条件下,于直流电场中必然会受到电性相反的电极吸引而发生移动。不同物质的颗粒在电场中的移动速度除与其带电状态和电场强度有关外,还与颗粒的大小、形状和介质粘度有关。操作1、一般电泳装置:示教2、电泳操作:酸纤维薄膜的准备:在距一端1.5cm处用铅笔画一条细线,然后浸泡于I0.06pH8.6的巴比妥缓冲液或I0.03pH8.6的巴比妥缓冲液中约20min。取出,用滤纸吸走多余的缓冲液。用点样器蘸取血样点于薄膜上。将点好样的薄膜置于电泳槽上,点样面朝下,点样端置电场中的负极。电泳:电压1
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