抗氧化金属硫蛋白的足细胞特异性过度表达可以减轻糖尿病肾病

Podocyte-SpecificOverexpressionoftheAntioxidantMetallothioneinReducesDiabeticNephropathy,足细胞内特异性过度表达的抗氧化金属硫蛋白可以减轻糖尿病肾病05七A朱晓丹,糖尿病肾病DN,糖尿病肾病肾衰（DN）损伤足细胞（肾小球过滤屏障）,足细胞,1.上皮细胞2.足突-裂孔-渗透性裂孔横膜3.裂孔膜蛋白：NephrinPodocalyxin,足细胞损伤途径,高血糖糖基化终末产物血管紧张素氧化应激仅对足细胞进行抗氧化保护，可否减少足细胞损伤，进而减轻糖尿病肾病。,足细胞损伤,金属硫蛋白MT,1.抗强氧化剂：防止羟自由基、过氧化亚硝酸盐、超氧化物、过氧化氢氧化的作用独一无二。,2.仅在足细胞内特异性过度表达,效力是谷胱甘肽的50倍,足细胞特异性抗强氧化性,MT,足细胞,保护,ONLY,减少足细胞损伤,减轻糖尿病肾病,高效,Nmt模型,FVB胚胎系Nmt基因（受小鼠nephrin启动的人类MTII基因）启动足细胞中MT高效表达Nmt3Nmt7,足细胞中MT的高效表达,A：PCRMT在两个系株中均可表达，但在Nmt7系株中更高B：蛋白电泳MT在Nmt3和Nmt7组中分别增高18和6倍。C：免疫组化MT表达仅在转基因小鼠足细胞中,为什么要选用两个系株？,OVE26Nmt双转基因的模型,糖尿病肾病模型Nmt模型OVE26鼠Nmt3/7鼠杂交OVE26Nmt双转基因,MT对DN影响的评估参数,糖尿病基本参数蛋白尿足细胞肾小球形态,糖尿病基本参数,MT高效表达可减少蛋白尿产生,AB：Nmt3系株2月龄和4月龄的结果CD：Nmt7系株2月龄和4月龄的结果,MT高效表达,蛋白尿减轻程度,Nmt7,Nmt3,Nmt7,Nmt3,基因位点的插入是随机的，极有可能N7的插入位点破坏了小鼠参与肾小球正常功能的基因，从而减低其保护作用。,MT在足够剂量时对足细胞不利。,只有待N7插入的位点确定，我们才可能区分是插入突变还是MT过度表达的影响,足细胞的足突形态。,A：FVBB：OVE26C：Nmt7D：OVE26Nmt7E：OVE26鼠足突密度比FVB鼠低33%，而OVE26Nmt7鼠组却高于OVE26鼠。,裂孔膜蛋白的表达,A：肾小球中nephrin,podocalyxin,GAPDH(磷酸甘油醛脱氢酶)蛋白：FVB、OVE、OVE26Nmt7BC：Bnephrin蛋白表达Cpodocalyxin表达，以GAPDH表达进行标准化。O和ON总低于F组，但podocalyxinON要高于O组。,足细胞数目,A-C：肾小球WT1基因染色的经典图像A：FB:OC:ON3D：O组与F组相比减少了大约44%。在ON3组中，足细胞数目比O组增加39%，且明显恢复到对照组的75%左右。,足细胞数目,A-D：TUNEL对O(A)、ON7(B)、F(C)、N7(D)肾小球染色E：O组比F组增加了20倍以上，MT高效表达，细胞死亡诱导明显下降。,肾小球形态,A：肾小球体积B：系膜基质容量足细胞中MT高效表达可减少糖尿病肾小球形态的影响。,实验局限,仅20%的肾小球细胞是足细胞,最新计数足细胞的方法未被采用,总结：第一次证明仅以抗氧化来保护足细胞，可以从结构和功能方面避免DN的损害。也证实了氧化应激对肾小球损害的重要性，足细胞特异性过度表达抗氧化金属硫蛋白，的确可以减轻糖尿病肾病。,文章出处：,JAmSocNephrol.2008November;19(11):2077-2085.doi:10.1681/ASN