食品中维生素C的含量检验标准操作规程(精).doc

.食品中维生素C 的含量检验标准操作规程一、目 的：建立维生素C 含量检验操作规程，保证分析结果的准确性。二、依 据：GB/T5009.159-2003三、范 围：本规程适用于本公司维生素C 含量检验操作四、职 责：质量检验员对本标准的实施负责五、正 文：1、试制和溶液1.1 乙酸溶液(2 mol/L：吸取11. 6 mL冰乙酸，加水稀释至100 mL,1.2 乙酸溶液(0.5 mol/L：吸取2. 9 ml冰乙酸，加水稀释至100 mL,1.3 乙二胺四乙酸二钠溶液(0. 25 mol/L：称取9. 3 g乙二胺四乙酸二钠C 10H 14N 2O 8Na 22H 20于水中，加热使之溶解后，放冷，并稀释至100mL1.4蛋白沉淀剂1.4.1 乙酸锌溶液(220g/L：称取22. 0 g乙酸锌Zn(CH,COO22H 20，加3 mL冰乙酸溶于水，加热使之溶解后，放冷，并稀释至100mL 。1.4.2亚铁氰化钾溶液(106 g/L:称取10. 6 g 亚铁氰化钾K 4Fe(CN63H 20，加水洛解至100 mL,1.5 显色剂:固蓝盐B(Fast Blue Salt B溶液(2 g/I：准确称取0. 2 g固蓝盐B ，加水溶解于100 mL 棕色容量瓶中，并稀释至刻度(该溶液在室温下贮存可稳定3d 以上1.6抗坏血酸标准储备溶液(2.0 g/L：精密称取0. 2000 g抗坏血酸，加20 ml,乙酸溶液(2 mot/I.溶解后移人100 -L棕色容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于2. 0 mg抗坏血酸(10下冰箱内贮存在2d 内稳定 。1.7抗坏血酸标准使用溶液（0.0g/L）：用移液管精密吸取5.0ml 抗坏血酸标准储备溶液(2.0 g/L于100 mL 棕色容量瓶内，加5 ml 乙酸溶液(2 mol/l.，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于100 ug抗坏血酸(临用时配制 。2、仪器2.1分光光度计。2.2 捣碎机.2.3 离心沉淀机2.4 10ml具塞玻璃比色管3、 测定方法3.1 样品制备固体试样混匀后精密称取5.0g10.0g，精确至0.001g ，加10ml 乙酸溶液溶液(2 mol/I、乙酸锌溶液(220 g/L和亚铁氰化钾溶液(106 g/I各7. 5 mL，加水至刻度，混匀。将全部溶液移人离心管内，以3000 r/min离心10 min ，上清液供测定。同时取与处理试样相同量的乙酸溶液、乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液，按同一方法做试剂空白试验。3.2 标准曲线的绘制精密吸取0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8,1.0,1.5,2.0ml 抗坏血酸标准使用溶液（相当于抗坏血酸0,10.0,20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,150.0,200.0ug ）分别置于10 mL比色管中，各加0. 3 ml乙二胺四乙酸二钠溶液(0. 25 mol/L、0. 5 ml乙酸溶液(0. 5 mol/L ,1. 25 mL固蓝盐B 溶液(2 g/L，加水稀释至刻度，混匀。室温(2025 下放置20 min后，移人1 cm比色皿内，以零管为参比，于波长420 nm处测最吸光度，以标准各点吸光度绘制标准曲线。3.3 样品测定蛋白性试样的测定:精密吸取样品溶液(约相当于抗坏血酸200 ug 以下 和等量试剂空自溶液(0. 5 ml-5. 0 ml，各于10 ml比色管内。各加1. 5 ml乙二胺四乙酸二钠溶液(0.25 mol/L1.0 ml、乙酸溶液(0.5 mol/1.、1.25 ml固蓝盐B 溶液(2 g/l.，加水稀释至刻度，混匀。室温(200C-250C下放登3 min 后，移人1 cm 比色皿内，以试剂空白管为参比，于波长420 nm 处测量吸光度。试样吸光度从标准曲线上查出抗坏血酸含量。4、 计算 100m 1000 V2式中：X 试样中抗坏血酸的含量，单位为毫克每百克(毫克每百毫升 mg/100g（mg/100ml）c