甲型流感病毒抗原检测方法PPT课件

甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,2013-04-29,甲型流感病毒抗原检测方法,预期用途,流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，潜伏期为1-3天，患者发病突然，主要症状有畏寒、头痛、浑身肌肉疼痛、无力、干咳等。,甲型流感病毒抗原检测方法,万泰生物甲流感病毒抗原诊断试剂盒,采用免疫渗滤技术，定性检测人鼻咽拭子或咽拭子样本中的甲流感病毒抗原。原理：采用双抗体夹心法原理检测甲流感病毒核蛋白抗原。硝酸纤维膜上预包被抗-FluANP的单克隆抗体，若待测样品中存在FluANP抗原，经裂解液处理后，抗原可与包被抗体结合，形成抗原-抗体复合物（Ag-Ab），随后加入抗-FluANP酶标试剂（Ab-HRP）,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物（Ab-Ag-Ab-HRP),最后通过酶催化底物显色，生成蓝色产物，若样品中无FluANP抗原，不显色。,甲型流感病毒抗原检测方法,注意事项,样本采集不当、样本储存不当、标本不新鲜或样本反复冻融均会影响检测结果。采集的样本若存在个别高浓度药物（如鼻腔喷雾药剂）会影响检测结果。检测试剂仅对样本中的A型流感病毒抗原提供定性检测。阳性结果仅表示样本中A型流感病毒抗原的存在，而不等作为机体感染A型流感病毒的唯一标准。阴性结果并不能完全排除感染A型流感病毒的可能性。结果阴性但有临床症状存在，建议使用其他临床方法进行测试。,甲型流感病毒抗原检测方法,实验室生物安全,根据国家卫生和计划生育委员会印发的人感染H7N9禽流感医院感染预防与控制技术指南的要求：医务人员接触患者的血液、体液、分泌物、排泄物、呕吐物及污染物品时应戴清洁手套，脱手套后洗手。,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测盒,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,样本采集及送检注意事项,采集拭子应使用检验科提供的专用微生物拭子（切勿使用普通棉签）。标本采集及检测应严格按照相关防护要求进行防护，避免感染。本试验使用鼻咽拭子标本进行检测。采集样本用品共两种，分别是：鼻咽拭子和样品保存液，临床需要时到检验科领取。,甲型流感病毒抗原检测方法,鼻咽拭子样本检测结果与核酸检测结果比较，灵敏度达到91.3%，特异性达到99.65%。咽拭子样本检测结果与核酸检测结果比较，灵敏度达到71.13%，特异性达到100%。样本采集不当可能导致阴性结果。对于进行了抗病毒药物治疗的患者，其体内病毒含量大为下降，会造成阴性结果。建议在使用抗病毒药物前检测。,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测,鼻腔分泌物采集：收集鼻腔分泌物时，将拭子插入鼻腔中分泌物最多处，轻轻转动并向鼻腔内部推动拭子，直至鼻甲（离鼻孔2.0cm-2.5cm）受阻处，贴鼻腔壁转动拭子三次，取出拭子。,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测,咽喉分泌物采集：将拭子从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，适度用力擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，应避免触及舌部，取出拭子。,甲型流感病毒抗原检测方法,样品处理,采集完毕的微生物拭子插入检验科提供的专用样品保存液中，紧靠管子内壁旋转多次使样品尽可能溶解在溶液中，最后把拭子头留于瓶中，旋紧盖子（避免液体漏出）后送检。见下图：,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,处理后的样品应及时送检，也可暂存与2-8（不超过12小时），中午、夜间采集的标本送到急诊化验室2-8密封保存，正常上班后检测。检测方法如下图：,甲型流感病毒抗原检测方法,1.将样品充分混匀后，取样200ul，加入样品处理瓶中,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,滴加14滴裂解液（约400ul）到样品处理瓶中。充分混匀。,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,滴加5滴（约200ul）酶标试剂到反应膜上,甲型流感病毒抗原检测方法,等待酶标试剂完全渗入后，再等待2-3分钟，让其完全反应,甲型流感病毒抗原检测方法,每次滴加12滴洗涤液洗涤2次,甲型流感病毒抗原检测方法,加2滴显色液显色，待显色液完全渗入，再等待2-3分钟,甲型流感病毒抗原检测方法,加1滴终止液，3分钟内判断结果。终止5分钟后的结果无临床意义,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,甲型流感病毒抗原检测方法,由于阳性样品的强度不同，检测点的显色可能出现颜色深浅的现象。在规定的观察时间内，不论颜色深浅，即使非常弱的显色也应判定为阳性结果。,甲型流感病毒抗原检测方法,渗滤装置从包装中取出后请在20分钟内使用。样品处理瓶盖必须拧紧防止样品漏出，滴加时应使瓶中液体全部滴到加样孔中。滴加试剂时瓶口应垂直对准加样孔，保证液滴体积的准确性。,甲型流感病毒抗原检测方法,标本的保存用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测。24小时内能检测的标本，置于4保存；不能于24小时内检测的标本，置于-70或以下保存。（如无70保存条件，则于20冰箱暂存