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文档简介
血涂片的制备,1,血涂片的制备和细胞大小的测量,血涂片的制备,2,目的要求,1.掌握血涂片的制备方法;2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态;3.掌握显微测微尺的使用方法。,血涂片的制备,3,实验原理,涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本,染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。,血涂片的制备,4,实验用品,1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、双凹片(推片)。2.试剂:Wrights染液:Wrights色素粉末0.1g,溶于60ml甲醇。,血涂片的制备,5,方法与步骤,一.血涂片的制备与血细胞的观察二.显微测微尺的使用,血涂片的制备,6,采血前用70酒精棉球消毒人的指腹,血涂片的制备,7,采血,血涂片的制备,8,由于第一滴血中含单核白细胞较多,因此弃去第一滴血。,推片:挤出第二滴血置于载玻片的右侧,再取另一张边缘光滑的双凹片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状。,3045,两玻片的角度以3045为宜,轻轻将双凹片向前匀速推进,即涂成血液薄膜。,血涂片的制备,12,染色,待涂片在空气中完全干燥后,滴加数滴Wrights染液盖满血膜为止,染色13min。然后滴加等量蒸馏水,使其与染液均匀混合,静置1015min。用蒸馏水冲去染液,吸水纸吸干,镜检。,血涂片的制备,13,结果显示,血涂片的制备,14,淋巴细胞,血涂片的制备,15,单核细胞,血涂片的制备,16,嗜中性粒细胞,血涂片的制备,17,嗜酸性粒细胞,血涂片的制备,18,嗜碱性粒细胞,血涂片的制备,19,显微测微尺的使用,显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的物体的长度、面积的工具,包括镜台测微尺、目镜测微尺两部分。在使用的过程中,镜台测微尺起标定作用,利用它可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的实际长度。目镜测微尺标定完成后,即可用于细胞样品的测量。,血涂片的制备,20,每个大格又可分为10个小格,每小格的实际长度为0.01mm,总长0.1mm,镜台测微尺,总长1mm,共分为10格,血涂片的制备,21,目镜测微尺,可以通过旋转旋钮移动目镜测微尺中交叉线的位置,血涂片的制备,22,使用方法,1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜;2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜台测微尺的刻度;3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。,血涂片的制备,23,目镜测微尺的标定,naX=M,X:目镜测微尺每格的实际长度a:镜台测微尺每格的实际长度n:镜台测微尺的刻度数。M:目镜测微尺的刻度数。,血涂片的制备,24,4.移去镜台测微尺,换血涂片,目镜测微尺测量细胞所占小格数X目镜测微尺每小格代表的实际长度=被测细胞的实际
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