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生化反应与血清学实验,医学微生物学实验七,一、生化反应,掌握细菌生化反应的原理和临床意义。熟悉鉴别细菌常用的生化试验原理、方法和结果判断。,实验目的,生化反应基本原理,不同的细菌含有不同的分解代谢的酶具有不同的分解代谢途径对同一营养物质的分解代谢及其产物有所不同,利用生化方法检测代谢产物以判断细菌的分解代谢特征，从而达到鉴定细菌的目的。称：细菌的生化反应检测法,知识点,常见的生化反应,实验材料,1.菌种大肠埃希菌、沙门氏菌2.微量生化反应管葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、蛋白胨水（靛基质）、硫化氢。3.试剂吲哚试剂,葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖,大肠埃希菌：分解乳糖产酸产气致病性肠道细菌：大多数不分解乳糖,1.糖发酵试验,1.糖发酵试验,（1）原理,1.糖发酵试验,（2）方法,中性或碱性紫色酸性黄色,1.糖发酵试验,（3）结果判断,溴甲酚紫,有细菌生长培养基呈混浊，可能出现3种结果。,（3）结果判断,2.靛基质（吲哚）试验,（1）原理,（2）结果判断,阳性,2.靛基质（吲哚）试验,3.硫化氢试验,（1）原理,（2）结果判断,3.硫化氢试验,生化反应材料分配,二、血清学鉴定,掌握细菌的血清学鉴定法。,实验目的,实验原理,根据抗原抗体反应具有高度特异性的特点，用已知抗体来检测未知抗原（细菌）。,二、血清学鉴定,实验材料,1.菌种待检细菌2.试剂多价沙门菌O(A-F)诊断血清3.其他载玻片,沙门氏菌的主要抗原组成,O抗原：至少58种,含相同抗原组分归为一组，引起人类疾病的沙门菌大多数在AF组。H抗原：分为、相，相以a、b、c等表示，相以1、2、3等表示。Vi抗原：抗原性弱，不稳定，可阻止O抗原与其相应抗体的凝集反应。,沙门氏菌诊断血清（11种）,先用AF和Vi血清检测，根据结果再进行其他鉴定。,注意：,实验方法,结果判断,沙门氏菌属国内常见菌型诊断抗原表,注意事项,1.生理盐水端应不出现凝集颗粒。2.沙门菌Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体发生凝集，故在做玻片凝集时应加注意，需事先加热破坏Vi抗原，O抗原才得以与相应的O诊断血清发生凝集。,血清学实验进程,
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