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文档简介
基因工程原理,第2节第一课时,眉山:周卢娟,关注社会,资料1:糖尿病一种综合病症。其中有部分患者需要胰岛素进行治疗。,胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。,提高胰岛素产量,刻不容缓,大肠杆菌:繁殖快,代谢异常旺盛,短时间内可产生大量的代谢产物。,怎样才能让大肠杆菌生产人的胰岛素?,资料2,大胆猜想:,培育转基因大肠杆菌的简要过程:,普通大肠杆菌(不能合成胰岛素),人体组织细胞,提取,胰岛素基因,与运载体DNA拼接导入,大肠杆菌(含胰岛素基因),转基因大肠杆菌(能合成胰岛素),实例展示,(供体细胞),(工程菌),(目的基因),(受体细胞),原理:操作水平:结果:,基因工程的概念:,基因重组,DNA分子水平,定向改变生物性状,别名:,基因拼接技术或DNA重组技术,培育转基因大肠杆菌的简要过程:,你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些?,普通大肠杆菌(不能合成胰岛素),人体组织细胞,提取,胰岛素基因,与运载体DNA拼接导入,大肠杆菌(含胰岛素基因),转基因大肠杆菌(能合成胰岛素),实例展示,(供体细胞),(工程菌),(目的基因),(受体细胞),培育转基因大肠杆菌的关键步骤:,如:EcoRI,讨论:,1.基因的剪刀限制性核酸内切酶,基因操作的工具,3、作用特点,1、作用部位,2、作用结果,模型构建1,练习使用Hind剪切目的基因,Hind能够专一识别AAGCTT序列,并在A和A之间将这段序列切开,粘性末端,含有目的基因的片段,基因的剪刀限制性内切酶(简称限制酶)。,知识归纳,主要在微生物中。,特异性和专一性,脱氧核苷酸之间的化学键,产生黏性未端(碱基互补配对)。,如果用同种限制性内切酶EcoRI切割来源不同的DNA分子,会怎么样呢?,2.基因的针线DNA连接酶,基因操作的工具,2作用位置,1作用结果,积极思考,3.基因的运输工具运载体(carrying),常用的运载体(carrying)有两类:1)质粒(plasmid)2)噬菌体(bacteriophages)或某些动植物病毒(virus),基因操作的工具,作用:将目的基因导入受体细胞。,大肠杆菌的质粒:,最常用的运载体质粒,基因工程的操作步骤,提取目的基因,1,目的基因与运载体结合,2,3,将目的基因导入受体细胞,4,目的基因的检测和鉴定,小结,基因工程的概念,基因工程的工具,基因工程的基本步骤,基因的运载工具运载体,基因的针线DNA连接酶,基因的剪刀限制性内切酶,第一步:提取目的基因,第二步:目的基因与运载体结合,第三步:将目的基因导入受体细胞,第四步:目的基因的检测和鉴定,基因工程的原理,1、下列是由限制酶切割形成的DNA片段,能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是,CTGCAG,G,CTTAA,G,ACGTC,AATTC,G,A.;B.;C.;D.以上都不对,A,反馈评价,exercise,2、要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是()限制酶DNA连接酶解旋酶DNA聚合酶,A,A.常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达.,3、用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列说法不正确的是,B,能发光的水母,不能发光的热带斑马鱼,4、生活在水里的一种水母能发光,这是因为水母的DNA分子上有_使不能发光的热带斑马鱼也能像水母一样发光的基本操作步骤是_需要哪些操作工具:,荧光蛋白基因,(1)提取水母的荧光蛋白基因,(2)目的基因和运载体结合,(3)将目的基因导入受体细胞,(4)目
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