Qubit 2.0荧光计中文操作

Qubit 2.0 荧光计荧光计 P 9-28 方法 入门指南 安装 Qubit 2.0 荧光计 Qubit 2.0 荧光计是一台单独的仪器，不需要连接到计算机。 1. 拆开包装之后，将仪器放置在水平、干燥的表面。 2. 将附带的电源线的一端插入 Qubit 2.0 荧光计。根据您所在国家的电源插座配置，另一 端应连接适当的插头转接器。 3. 将电源线插入电源插座。一定要使用仪器附带的电源线。使用未经许可的电源线可能会 损坏仪器。 4. 插上后，仪器自动接通电源。 5. 如果要断开 Qubit 2.0 荧光计的电源，请拔下仪器的插头。 睡眠模式 Qubit 2.0 荧光计有一个自动待机（即睡眠）模式，闲置 30 分钟后触发。您也可以轻触触 摸屏左上角的 Power（电源）键，进入待机模式。 如果要从待机模式中恢复， 轻触触摸屏上的任何位置。 从待机模式中恢复将使您返回到睡眠 模式开始时的那个界面。闲置 7.5 小时后，触摸屏幕，您将返回到主界面（如下图） 。 主界面 仪器开机时，主界面显示。在主界面上，您可以立即开始定量分析（DNA、RNA 或蛋白） ， 利用适当的标准品来校准仪器，访问已保存的数据，设置日期和时间，或调整屏幕亮度。 日期和时间设置 当您收到仪器时， 日期和时间已经预先设定。 如果要重设日期和时间， 请按照以下步骤操作： 1. 按下 Date/Time（日期/时间） 。日期/时间属性界面包含了 6 个滚轮，它们对应了手指在 界面上的运动，就像轮子一样。 2. 选择日期和时间，将期望值拨到滚轮的中间位置。按下 Set（设置） ，对日期/时间作出更 改。更新后的日期/时间就显示在窗口顶端。 注意：如果您选择 Cancel（取消） ， 那么您的更改将不保存， 仪器返回到上一次显示的界面。 调整屏幕亮度 如果要调整屏幕亮度，请按下触摸屏右上角的 Brightness（亮度）键，将滚动条移至理想的 亮度水平。 升级固件 如果要将您的 Qubit 2.0 荧光计升级到 Invitrogen 目前最新的固件，请按照以下步骤操作： 1. 从我们的网站（ U 盘中。 2. 按下触摸屏顶部的 Version（版本）按钮。版本界面显示如下。 3. 将 U 盘插入 USB 接口，按下 Update（更新） 。 注意：Update（更新）按钮上的绿点表明仪器识别 U 盘；红点表明 U 盘未插入 USB 接口， 或仪器无法识别 U 盘。 在成功更新固件后，下列界面显示，之后仪器返回到主界面。现在您可以继续设置您的标准 品并定量您的样品。 Qubit 2.0 荧光计使用指南 如欲获得最佳结果，请遵循以下建议。关于更多信息，详见附录第 33-35 页，Qubit分析 的关键考虑因素。 请勿在阳光直射下操作仪器。 处理样品时应戴上手套。 仅在室温下使用 Qubit 2.0 荧光计（22-28C） 。 在室温下保存所有的试剂盒，仅在 Qubit 2.0 荧光计测定荧光时才插入分析管。 在测量之前请勿用手握住分析管。 确保您已经利用适当的标准品校准过 Qubit 2.0 荧光计。 将样品或标准品与工作液混合之后，让 Qubit DNA 和 RNA 分析管孵育 2 分钟。 将样品或标准品与工作液混合之后，让 Qubit 蛋白分析管孵育 15 分钟。 如果您要多次读取同一支管，请从仪器中取出分析管，让其平衡至室温 30 秒，再进行 下一次读取。 访问 级，以及经过验证的 Qubit分析列表，它们已利用 Qubit 2.0 荧光计的测试。 Qubit 2.0 荧光计的分析管 只有薄壁、透明的 0.5 mL PCR 管适用于 Qubit 2.0 荧光计。可接受的分析管包括 Qubit 分析管（货号 Q32856，500 支管）或 Axygen PCR-05-C 管（VWR，货号 10011-830） 。 最小分析体积必须是 200 L，以便准确读取。 校准 Qubit 2.0 荧光计 简介 对于每次分析，您可以选择运行新的标准品，以校准 Qubit 2.0 荧光计，或使用之前校准的 数值（关于更多信息，详见附录第 35 页，校准 Qubit 2.0 荧光计） 。本节提供了运行新标 准品进行校准和使用上一次校准的指南。 注意：在第一次使用荧光计时，没有使用上一次校准的选项。 注意 Qubit 2.0 荧光计的校准需要配制适当的标准品溶液。关于如何配制这些标准品，详见您所 用分析附带的操作指南。 所需的材料 开展分析的适当标准品 注意：将标准品与工作液混合之后，须孵育适当的时间（Qubit DNA 和 RNA 分析为 2 分 钟，Qubit蛋白分析为 15 分钟） 。 Qubit分析管或其他适当的 0.5 mL 分析管 可选：Qubit 2.0 U 盘用于数据转移，仪器附带或单独购买 运行新标准品进行校准 1. 在主界面上，选择您想要运行标准品的分析类型。标准品界面自动显示。 2. 对于选定的分析，如果您已经开展过校准，Qubit 2.0 荧光计会提示您选择读取新的标 准品或使用上一次校准。 注意：您可以在其他任何界面上按下 Standards（标准品） ，进入标准品界面。 3. 按下 Yes（是） ，读取新的标准品。插入 Standard #1 的提示出现在界面上。 4. 在样品槽中插入 Standard #1， 并按下 Read （读取） 。 确保您使用了适合分析的 Standard #1。读取过程大约需要 3 秒钟。 5. 插入 Standard #2，并按下 Read（读取） 。确保您使用了适合分析的 Standard #2。 6. 如果您正在开展 Qubit蛋白分析， 它需要三点校准， 那么请按照提示插入 Standard #3， 并按下 Read（读取） 。 在读取 Standard #2 之后（对于 Qubit蛋白分析，在读取 Standard #3 之后） ，校准完成。 新的标准品曲线及直线连接的标准品的数据点出现在屏幕上。 注意 在荧光 vs.浓度曲线中， 空心圆圈代表正确的标准品， 黑色圆圈代表落在分析范围内的样品， 而红色圆圈代表不在分析范围内的样品或标准品。最近的样品以大的黑色圆圈表示。 “Standards Incorrect（标准品不正确）”信息表示有错误。检查校准值可能有助于您确定错 误来源。详见下一页，检查标准品。 使用上一次的校准 当 Qubit 2.0 荧光计会提示您选择读取新的标准品或使用上一次校准时，您可以按下 No （否） ，选择在样品读取时使用上一次的校准。随后您会被要求插入含有样品的分析管。 检查标准品 检查标准品界面显示了 Standard #1、Standard #2、Standard #2（如果适用）和特定分析 中最后一次测定的原始荧光值。 这些数值可以协助您判断 Qubit 2.0 荧光计的性能， 以及您 使用的样品是否在分析范围内。 对于 Qubit dsDNA BR、Qubit dsDNA HS、Qubit ssDNA、Qubit RNA 和 Qubit RNA BR 分析，Standard #2 的读取应当比 Standard #1 高很多，且样品的读取应落在 两个标准品之间。 对于 Qubit蛋白分析，Standard #3 的读取应当比 Standard #2 高很多，且样品的读取 应不超过 Standard #3 的 50%。 如果要访问检查标准品界面，请在标准品界面按下 Check Stds（检查标准品） 。标准品 和最后一个样品的原始荧光值将显示在界面上。 读取样品 简介 在您通过运行适当标准品来完成 Qubit 2.0 荧光计的校准或接受上一次校准的数值之后， 您 随时可读取您的样品。本节提供了利用 Qubit 2.0 荧光计通过适当的 Qubit分析来定量您 的 DNA、RNA 或蛋白样品的操作指南。 注意 在读取之前，必须正确地制备样品。关于制备样品的操作指南，详见您正在使用的分析所附 带的操作指南。 所需的材料 您想要用来定量样品的 Qubit分析试剂盒（关于现有的 Qubit分析试剂盒及订购信 息，详见第 33 页） 您的 DNA、RNA 或蛋白样品 注意： 将样品与工作液混合之后， 须孵育适当的时间 （Qubit DNA 和 RNA 分析为 2 分钟， Qubit蛋白分析为 15 分钟） 。 Qubit 分析管或其他适当的 0.5 mL 分析管 可选：Qubit 2.0 U 盘用于数据转移，仪器附带或单独购买 读取样品 1. 选择 Sample（样品） ，进入样品界面。 2. 在样品槽中插入样品，并按下 Read（读取） 。读取过程大约需要 3 秒钟。 一旦测定完成，结果会显示在界面上。显示的数字即为分析管中核酸或蛋白的浓度。如果要 计算原始样品的浓度，详见第 22 页，计算原始样品的浓度。 3. 如果要读取下一个样品，从样品槽中取出样品，插入下一个样品，并按下 Read Next Sample（读取下一个样品） 。 4. 重复样品读取，直至所有样品读完。 使用图表的注意事项 按下 Hide Graph（隐藏图表） ，可隐藏荧光 vs.浓度图，界面上只显示最近的测定。注 意在标准品界面没有隐藏图表功能。 按下 Show Graph（显示图表） ，让图表重新回到界面上。 按下 Clear Graph（清除图表） ，清除荧光 vs.浓度图中的所有样品数据，但保留标准品 数据。 Qubit 2.0 荧光计自动保存所有读取的数值，但不保存图形数据或计算。如果要将所有 的数据和计算保存到 Qubit 2.0 U 盘中，详见第 27 页，将数据保存到 Qubit 2.0 U 盘 中。 计算原始样品的浓度 简介 Qubit 2.0 荧光计的 Dilution Calculator（稀释计算器）特征可根据您添加到分析管的样品 体积，计算原始样品的浓度。 稀释计算器 1. 如果要计算原始样品的浓度，按下 Calculate Stock Conc（计算储液浓度） 。 包含体积滚轮的稀释计算器界面显示。 2. 利用体积滚轮，选择您添加到分析管中的原始样品体积。当您停止滚动时，Qubit 2.0 荧光计根据测得的分析浓度计算原始样品浓度。 3. 如果要更改原始样品浓度的显示单位，按下 ng/mL。一个显示目前单位（以相邻的红色 虚线表示）的弹出窗口打开。 4. 在单位选择弹出窗口上触摸适当的单位，选择适合于原始样品浓度的单位。如果要关闭 单位选择弹出窗口，触摸界面上弹出窗口以外的任何位置。 当单位选择弹出窗口关闭时，Qubit 2.0 荧光计自动转换到您选择的单位。 注意：样品浓度旁边的单位按钮反映了单位的变化（例如，如果您将单位更改为 pg/L，则 按钮显示 pg/L） 。 5. 如果要保存计算的数据，详见下一页，将计算保存到 Qubit 2.0 荧光计。 6. 如果要退出稀释计算器界面，按下界面下方的任一导航按钮或 Read Next Sample（读取 下一个样品） 。 注意：当您离开稀释计算器界面时，Qubit 2.0 荧光计只保存稀释计算器中样品体积和单位 的最后值。返回到稀释计算器界面显示这些最后选择的值。 将计算保存到 Qubit 2.0 荧光计 1. 如果要将计算的数据保存到 Qubit 2.0 荧光计，在稀释计算器界面按下 Save（保存） 。 最后计算出的测量值将以.CSV 文件保存，并标上时间和日期戳。 2. 如果要查看、重命名并将数据保存在 Qubit 2.0 U 盘中，详见下一页，数据处理。 数据处理 简介 Qubit 2.0 荧光计呈现了全面的数据及图形报告，且数据可保存为.CSV（逗号分隔值）文 件，便于样品比较。.CSV 文件中的每个测量数据点都附有编号，并显示时间和日期戳。 查看数据 1. 如果要查看保存在 Qubit 2.0 荧光计中的数据，可在任一界面按下 Data（数据） 。数据 界面以电子表格形式显示了数据， 而更多的数据列隐藏在右侧。 最近的数据点显示在电子表 格的第一行。 2. 用手指拖动滚动条，可在电子表格中连续移动，以访问隐藏在右侧的数据列。 重命名数据文件 1. 在数据界面触摸电子表格中的相应行，选择待重命名的数据文件。选定的行将高亮显示。 如果未选择任何行，系统会提示您选择一行或多行进行重命名。 注意：如果要选择多个文件，一一选择每一行，或按下列标题选择所有文件。如果要取消选 择所有行，只需再次按下列标题。 2. 按下 Rename（重命名） ，输入选定行的名称。字母键盘界面显示。如果要切换成数字键 界面，按下 123。 3. 利用保存菜单上显示的键盘按钮输入文件名称。您最多可输入 20 个字符。 注意：如果您已经选择了一次重命名多行，文件将会通过名称最后的数字加以区分。数字将 以升序显示，最近的样品从 1 开始（如，SAMPLE_1、SAMPLE_2 等） 。 4. 按下 OK，将您输入的名称保存为文件名，并返回到数据界面。 将数据保存到 Qubit 2.0 U 盘中 Qubit 2.0 荧光计是为独立使用而设计的；它不需要使用外部计算机。然而，为存档数据和 生成报告，您可以利用 U 盘将保存在.CSV 文件中的数字数据转移到计算机中，并将文件导 入任一电子表格程序。如果要存档数据： 1. 将 Qubit 2.0 U 盘插入 USB 接口。 2. 按下 Data（数据） ，访问数据界面。 注意：USB 图标上的绿点表明仪器识别