常用缓冲液配方及缓冲范围

常见缓冲液的缓冲范围常见缓冲液的缓冲范围 缓冲液名称及常用浓度 缓冲 pH 范围 主要物质分子量 MES (2 吗啉代乙磺酸) 5.5-6.7 195.2 Bis-Tris 5.8-7.2 209.2 HEPES 6.8-8.2 238.3 PIPES 6.1-7.5 302.4 MOPS 6.5-7.9 209.3 Tricine 7.4-8.8 179.2 TEA (三乙醇胺) 7.4-8.3 149.2 甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2.2-5.0 甘氨酸 Mr=75.07 邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2.2-3.8 邻苯二甲酸氢钾 Mr=204.23 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 2.2-8.0 磷酸氢二钠 Mr=141.98 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 2.2-6.5 柠檬酸 Mr=192.06 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L） 3.0-6.6 柠檬酸 Mr=192.06 柠檬酸钠 Mr=257.96 乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2mol/L） 3.6-5.8 乙酸钠 Mr=81.76 乙酸 Mr=60.05 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液 4.1-5.9 氢钾 Mr=204.23 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L） 5.8-8.0 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15 molL） 4.92-8.18 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L） 5.8-8.0 巴比妥钠-盐酸缓冲液 (18) 6.8-9.6 巴比妥钠 Mr=206.18 Tris-盐酸缓冲液 (0.05mol/L 25) 7.10-9.00 三 羟 甲 基 氨 基 甲 烷 （ Tris ） Mr=121.14 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液 (0.05mol/L) 8.6-10.6 甘氨酸 Mr=75.07 硼砂-氢氧化钠缓冲液 (0.05mol/L) 9.3-10.1 硼砂 Na2B4O7 10H2O Mr=381.43 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液 (0.1mol/L) 9.16-10.83 碳酸钠 Mr=286.2 碳酸氢钠 Mr=84.0 碳酸钠-氢氧化钠缓冲液 (0.025mol/L) 9.6-11.0 磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液 10.9-12.0 氯化钾-盐酸缓冲液（0.2mol/L） 1.0-2.2 氯化钾 Mr=74.55 氯化钾-氢氧化钠缓冲液（0.2mol/L） 12.0-13.0 氯化钾 Mr=74.55 参考下图：常见缓冲液的缓冲范围参考下图：常见缓冲液的缓冲范围 常用缓冲液的配制方法常用缓冲液的配制方法 1. 甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M 甘氨酸 +Y ml 0.2M 盐酸 再加水稀释至 200ml pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0 甘氨酸分子量75.07 0.2M 甘氨酸溶液含 15.01g/L 2. 邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M 邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M 盐酸 再加水稀释至 200ml pH X Y pH X Y 2.2 5 4.670 3.2 5 1.470 2.4 5 3.960 3.4 5 0.990 2.6 5 3.295 3.6 5 0.597 2.8 5 2.642 3.8 5 0.263 3.0 5 2.032 邻苯二甲酸氢钾分子量2.4.23 0.2M 邻苯二甲酸氢钾溶液含 40.85g/L 3. 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸 /ml pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M 柠 檬 酸/ml 2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40 2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91 3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37 3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15 3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45 3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55 4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27 4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85 5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4 分子量141.98 0.2M 溶液含 28.40g/L Na2HPO42H2O 分子量178.05 0.2M 溶液含 35.61g/L C6H8O7H2O 分子量210.14 0.1M 溶液含 21.01g/L 4. 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠 离 子 浓 度 /M 柠檬酸 C6H8O7H2O/g 氢 氧 化 钠 NaOH/g 浓盐酸 HCl/ml 终体积/L 2.2 0.20 210 84 160 10 3.1 0.20 210 83 116 10 3.3 0.20 210 83 106 10 4.3 0.20 210 83 45 10 5.3 0.35 245 144 68 10 5.8 0.45 285 186 105 10 6.5 0.38 266 156 126 10 使用时可以每升中加入 1g 酚，若最后 pH 有变化，再用少量 50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调 节，冰箱保存。 5. 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1M） pH 0.1M柠檬酸/ml 0.1M 柠檬酸 钠/ml pH 0.1M 柠檬酸 /ml 0.1M 柠檬酸 钠/ml 3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8 3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7 3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6 3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5 3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3 4.0 13.1 6.9 6.0 3.8 16.2 4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2 4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0 4.6 10.3 9.7 6.6 104 18.6 4.8 9.2 10.8 C6H8O7H2O 分子量210.14 0.1M 溶液含 21.01g/L Na3C6H5O72H2O 分子量294.12 0.1M 溶液含 29.41g/L 6. 乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2M） pH 0.2M NaAc/ml 0.2M HAC/ml pH 0.2M NaAc/ml 0.2M HAC/ml 3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10 3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00 4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10 4.2 2.65 7.35 5.4 8.60 1.40 4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90 4.6 4.90 5.10 5.8 9.40 0.60 NaAc 分子量136.09 0.2M 溶液为 27.22g/L 7. 磷酸盐缓冲液 (1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M） pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.2M NaH2PO4/ml pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.2M NaH2PO4/ml 5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0 5.9 10.0 90.0 7.1 67.0 33.0 6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0 6.1 15.0 85.0 7.3 77.0 23.0 6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0 6.3 22.5 77.5 7.5 84.0 16.0 6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0 6.5 31.5 68.5 7.7 89.5 10.5 6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5 6.7 43.5 56.5 7.9 93.0 7.0 6.8 49.5 51.0 8.0 94.7 5.3 6.9 55.0 45.0 Na2HPO42H2O 分子量178.05 0.2M 溶液含 35.61g/L Na2HPO412H2O 分子量358.22 0.2M 溶液含 71.64g/L NaH2PO4H2O 分子量138.01 0.2M 溶液含 27.6g/L NaH2PO42H2O 分子量156.03 0.2M 溶液含 31.21g/L (2) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15M） pH 1/15M Na2HPO4/ml 1/15M KH2PO4/ml pH 1/15M Na2HPO4/ml 1/15M KH2PO4/ml 4.92 0.10 9.90 7.17 7.00 3.00 5.29 0.50 9.50 7.38 8.00 2.00 5.91 1.00 9.00 7.73 9.00 1.00 6.24 2.00 8.00 8.04 9.50 0.50 6.47 3.00 7.00 8.34 9.75 0.25 6.64 4.00 6.00 8.67 9.90 0.10 6.81 5.00 5.00 9.18 10.00 0 6.98 6.00 4.00 Na2HPO42H2O 分子量178.05 1/15M 溶液含 35.61g/L KH2PO4 分子量136.09 1/15M 溶液含 9.078g/L 8. 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M） X ml 0.2M KH2PO4 +Y ml 0.2M NaOH 再加水稀释至 20ml pH(20) X/ml Y/ml pH(20) X/ml Y/ml 5.8 5 0.372 7.0 5 2.963 6.0 5 0.570 7.2 5 3.500 6.2 5 0.860 7.4 5 3.950 6.4 5 1.260 7.6 5 4.280 6.6 5 1.780 7.8 5 4.520 6.8 5 2.365 8.0 5 4.680 9. 巴比妥钠-盐酸缓冲液（18） pH 0.04M 巴 比 妥钠/ml 0.2M 盐酸/ml pH 0.04M 巴 比 妥钠/ml 0.2M 盐酸/ml 6.8 100 18.4 8.4 100 5.21 7.0 100 17.8 8.6 100 3.82 7.2 100 16.7 8.8 100 2.52 7.4 100 15.3 9.0 100 1.65 7.6 100 13.4 9.2 100 1.13 7.8 100 11.47 9.4 100 0.70 8.0 100 9.39 9.6 100 0.35 8.2 100 7.21 巴比妥钠分子量206.18 0.04M 溶液为 8.25g/L 10. Tris-盐酸缓冲液 50ml 0.1M 三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液于 X ml 0.1M 盐酸混匀后，加水稀释至 100ml pH X/ml pH X/ml 7.1 45.7 8.1 26.2 7.2 44.7 8.2 22.9 7.3 43.4 8.3 19.9 7.4 42.0 8.4 17.2 7.5 40.3 8.5 14.7 7.6 38.5 8.6 12.4 7.7 36.6 8.7 10.3 7.8 34.5 8.8 8.5 7.9 32.0 8.9 7.0 8.0 29.2 三羟甲基氨基甲烷(Tris)分子量121.14 0.1M 溶液为 12.114g/L Tris 溶液可以从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严 11. 硼酸-硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根） pH 0.05M 硼 砂 /ml 0.2M 硼酸/ml pH 0.05M 硼 砂 /ml 0.2M 硼酸/ml 7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5 7.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5 7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0 8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0 硼砂 Na2B4O710H2O 分子量381.43 0.05M(=0.2M 硼酸根)溶液为 19.07g/L 硼酸 H3BO3 分子量61.84 0.2M 溶液为 12.37g/L 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存 12. 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M） X ml 0.2M 甘氨酸 +Y ml 0.2M 氢氧化钠 再加水稀释至 200ml pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 8.6 50 4.0 9.6 50 22.4 8.8 50 6.0 9.8 50 27.2