实验三革兰氏染色_第1页
实验三革兰氏染色_第2页
实验三革兰氏染色_第3页
实验三革兰氏染色_第4页
实验三革兰氏染色_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

付费下载

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验三细菌的单染色与革兰氏染色法,微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生的各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附，且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力，易于吸附。,1微生物染色的基本原理,细菌的等电点较低，pH值大约在25之间，故在中性、碱性或弱酸性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷；而碱性染料电离时染料离子带正电。因此，带阴电的细菌常和带阳电的碱性染料进行结合。所以，在细菌学上常用碱性染料进行染色。,2染色方法,微生物染色方法一般分为单染色法和复染色法两种。前者用一种染料使微生物染色，但不能鉴别微生物。复染色法是用两种或两种以上染料，有协助鉴别微生物的作用，故亦称鉴别染色法。常用的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法，此外还有鉴别细胞各部分结构的（如芽胞、鞭毛、细胞核等）特殊染色法。,实验三细菌的革兰氏染色法,一、目的要求1学习掌握革兰氏染色法。2了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。二、基本原理三、器材1菌种大肠杆菌约24h营养琼脂斜面培养物，金黄色葡萄球菌约24h营养琼脂斜面培养物。2溶液和试剂革兰氏染色液，草酸铵结晶紫染液，卢戈氏碘液，番红复染液,3仪器或用具显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶（内装香柏油和二甲苯）、擦镜纸、无菌生理盐水、载玻片夹子、滤纸四、操作步骤1制片涂片：固体培养物，液体培养物。注意事项：载玻片要洁净无油迹；滴加生理盐水和取菌不宜过多；涂片均匀，不宜过厚。干燥：室温自然干燥。固定：涂面朝上，通过火焰23次。热固定温度不宜过高，以玻片背面不烫手为宜。,革兰氏染色制片,2初染滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为宜）,染色12min，水洗。3媒染用碘液冲去残水，并用碘液覆盖菌膜约1min，水洗。4脱色用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，用滴管流加95的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。脱色时间一般液2030S。脱色不足与过度都会影响和改变染色的结果。5复染用番红液复染约2min，水洗。,革兰氏染色染色,6镜检干燥后，用油镜观察。蓝紫色为G+,红色为G-。7混合涂片染色将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作混合涂片、染色、镜检进行比较。,ProceduresofGramStaining,GrampositiveorGramnegative?,实验报告,1绘图说明经革兰氏染色后大肠肝菌和金黄色葡萄球菌的染色结果。,2思考题,思考题,现有一株未知杆菌，个体明显大于大肠杆菌，请你鉴定该菌株是革兰氏阳性菌
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 项目管理

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论