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文档简介
如何解读TORCH血清学检测报告和常见问题解答,1,PPT学习交流,TToxoplasmagondii(弓形体)OOthers(ParvovirusB19,Eppstein-BarrVirusetc.)RRubellaVirus(风疹病毒)CCytomegalovirus(巨细胞病毒)HHerpesVirus(单纯疱疹病毒),TORCH?,TORCH:指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体,它是一组病原微生物的英文名称缩写。,2,PPT学习交流,2007年深圳地区育龄妇女TOX、CMV、RV、HSV-IgG血清阳性率为5.2%、98.3%、89.52%、21.3%(HSV-)、29.5%(HSV-);2009年深圳地区7650例孕妇检测TOX、CMV、RV、HSV-IgM的阳性率分别为3.1%、4.29%、1.07%和1.19%。国外报道宫内感染占活产新生儿比例为:CMV(100200)/10万、HSV100/10万、弓形虫(1030)/10万、风疹0.1/10万在有宠物接触史、感冒、感染症状孕妇中,4项TORCH-IgM呈不同程度的阳性,HSV阳性率最高(77.42%),其次为TOX(42.86%),CMV(6.58%),RV阳性率最低(1.37%)。张杰,林小兰,梁晓萍,等深圳市育龄妇女TORCH感染调查分析J中国妇幼保健,2007,22(34):4868-4869丁华,刘和录,韩杰辉,等.7650例孕妇血清TORCH检测结果分析J.中国实验诊断学,2009,13(10):1447-1448GerberS,HohlfeldPScreeningforinfectiousdiseasesJChildsNervSyst,2003,19(78):429432章锦曼,朱宝生,王瑞红,等.围孕期选择性TORCH筛查的临床意义J.中国妇幼保健,2008,23(11):1531-1533,TORCH感染的现状,3,PPT学习交流,母婴传播,T1期胎儿危险,T3期新生儿危险,4,TORCH感染的共同特征,4,PPT学习交流,临床上TORCH筛查需要解决的问题,5,PPT学习交流,先天性感染(congenitalinfections):病毒经胎盘传播造成胎儿先天感染,初次感染(primaryinfection):妊娠妇女血清头一次出现病毒特异性抗体IgG阳性,既往感染(Pastinfection):曾经感染过该病毒,身体产生了抗体或病毒以潜伏状态存在。,复发感染(recurrentinfections/secondaryinfection):是潜伏内源性病毒再激活,再感染(reinfections):已经被免疫的个体接触到一个外源性新病毒,发生再感染。,妊娠期感染的概念,6,PPT学习交流,TORCH筛查诊断流程,7,PPT学习交流,目前国内普遍采用ELISA检测血清IgM和IgG抗体作为筛查指标,IgM阳性提示为近期感染,IgG阳性提示既往感染筛查实验IgG、IgM应同时做,单做IgM往往给出错误的结果ELISA试剂盒简单易得,但敏感性和可靠性有限,缺乏统一质量控制标准,同时检测结果还受机体免疫状态、检测时间窗等多种因素影响,容易产生假阳性或假阴性结果,血清筛查实验,8,PPT学习交流,抗体亲和力是指抗原与抗体结合的牢固程度亲和力指数(AI)是反映抗体亲和力的相对值初始感染时,抗原与抗体的结合不够牢固为低亲和力。低AI提示母体原发感染既往感染、再激活或重复感染时,抗体特异性高,与抗原结合牢固为高AI,IgG抗体亲和力指数(avidityindex,AI),YinonY,YagelS,Tepperberg-DikawaM,FeldmanB,SchiffE,LipitzS.Prenataldiagnosisandoutcomeofcongenitalcytomegalovirusinfectionintwinpregnancies.BJOG2006;113:295300.,9,PPT学习交流,CMV感染时:母体IgG抗体AI21weeksgestation,CollO,BenoistG,VilleY,etalGuidelinesonCMVcongenitalinfectionJJPerinatMed,2009,37(5):433-445.Cytomegalovirusinfectioninpregnancy,SOGC,2010,April.,产前诊断先天性CMV感染,37,PPT学习交流,所有原发性CMV感染孕妇需要产前诊断,38,PPT学习交流,CMV原发(初次感染)筛查流程,此图只能在IgM+IgG+同时阳性时通过亲和实验识别3个月内是否有原发感染,39,PPT学习交流,2009年CMV宫内感染指南认为,如果发现孕妇血清转化或胎儿超声可疑畸形,应行羊膜腔穿刺术来确诊有无母胎垂直传播。与预后有关的主要是胎儿脑部异常。2010年SOGC指南提出对于已经诊断为CMV宫内感染的孕妇,建议每24周行超声检查,了解胎儿影像学异常及胎儿预后,超声结果正常也不能排除新生儿严重的神经系统损害的可能(-2B)。干预和治疗:尚无公认的治疗手段(中药)。超免疫球蛋白研究中。向患者交代胎儿感染概率和预后,知情选择,巨细胞病毒感染的处理,AdlerSP,FinneyJW,ManganelloAM,etalPreventionofchild-to-mothertransmissionofcytomegalovirusamongpregnantwomenJJPediatr,2004,145:485-491.VincenzoBerghellaMaternal-fetalEvidenceBasedGuildelinesMNewYork:InformaHealthcare,2007:297.CollO,BenoistG,VilleY,etalGuidelinesonCMVcongenitalinfectionJJPerinatMed,2009,37(5):433445BenoistG,SalomonLJ,JacquemardF,etalTheprognosticvalueofultrasoundabnormalitiesandbiologicalparametersinbloodoffetusesinfectedwithcytomegalovirusJBJOG,2008,115(7):823-829GuerraB,SimonazziG,PuccettiC,etalUltrasoundpredictionofsymptomaticcongenitalcytomegalovirusinfectionJAmJObstetGynecol,2008,198(4):380.e1-7.NigroG,AnceschiMM,CosmiEVClinicalmanifestationsandabnormallaboratoryfindingsinpregnantwomenwithprimarycytomegalovirusinfectionJBJOG,2003,110:572-277.,40,PPT学习交流,风疹病毒感染的筛查与诊断,41,PPT学习交流,筛查目标:确定孕早期初次感染,风疹感染产前筛查,42,PPT学习交流,听力异常(60-75%):感音神经性耳聋心脏异常(10-20%):肺动脉狭窄动脉导管未闭先天性室间隔缺损:眼缺陷(10-25%):视网膜病卡他症状小眼畸形先天性色素性青光眼中枢神经系统(10-25%):智力迟缓小头畸形脑膜炎其他:血小板减少肝脾肿大射线照射性骨病特有的紫色面容,出生时症状,迟发症状,糖尿病甲状腺炎生长激素缺乏行为紊乱,风疹病毒感染的先天性缺陷和迟发临床表现,43,PPT学习交流,孕期风疹病毒感染与胎儿感染和出生缺陷的关系,晚期感染率高达100%(36W)出生缺陷率几乎为零(16W后),早期胎儿感染率和出生缺陷率都大于80-90%,中期下降,风疹病毒感染的产前诊断主要针对在孕1216周内发生风疹病毒感染的孕妇,明确孕周至关重要(-3A)。,Rubellainpregnancy,SOGC,2008,44,PPT学习交流,孕前或孕初风疹病毒筛查结果判定,45,PPT学习交流,1、孕8周内感染,先天性风疹综合症(CRS)发生率为85%,912周52%,而20周以后就很罕见。2、超声及MRI检查可帮助排除胎儿先天畸形。但是超声诊断的CRS是非常困难的。干预和治疗:目前对宫内感染没有治疗方法,如果16周之前发生原发感染,应向患者交代胎儿感染概率和预后,知情选择人工流产。,胎儿感染后畸形的诊断,46,PPT学习交流,风疹感染的预防,先天性风疹的预防依赖于适当的早期免疫,在妊娠前进行积极的风疹抗体筛查和免疫接种非常重要。(-A)风疹疫苗有通过胎盘传染胎儿的风险,故孕期不能使用风疹疫苗,建议至少在接种疫苗后28天再怀孕。但资料表明早孕期意外接种风疹疫苗或者接种疫苗后立即怀孕的妇女中尚未发现分娩先天性风疹综合症的新生儿的病例。产后接种疫苗是安全的(-B)。,TangJW,AaronsE,HeskethLM,etalPrenataldiagnosisofcongenitalrubellainfectioninthesecondtrimesterofpregnancyJPrenatDiagn,2003,23(6):509-512.MaceM,CointeD,SixC,etalDiagnosticvalueofreversetranscription-PCRofamnioticfluidforprenataldiagnosisofcongenitalrubellainfectioninpregnantwomenwithconfirmedprimaryrubellainfectionJJClinMicribiol,2004,42(10):4818-4820.Rubellainpregnancy,SOGC,2008,47,PPT学习交流,单纯疱疹病毒感染的筛查与诊断,48,PPT学习交流,4,母方感染特点,49,PPT学习交流,筛查要点,一经感染终身携带,病毒潜伏在神经节。宫内传播机会极低,早期筛查意义不大。孕晚期(30W以后)检测HSV1+2抗体,只要IgG和IgM同时阳性,RT-PCR阳性应给予阿昔洛韦治疗。产前检测以确定生产方式。,50,PPT学习交流,HSVIgM检测,在成人临床实际用处不大,HSV感染,感染后时间,理论:,IgG产生时间的延迟,HSV感染,感染后时间,实际:,IgM检测无法正确分辨原发感染与持续感染,IgG和IgM约在同一时间开始产生,(adaptedfrom:)asT.Warren.Herpes:everythingyouneedtoknow,2009),滴定量,滴定量,IgM,IgG,IgM,IgG,51,PPT学习交流,HSVIgM检测,在成人临床实际用处不大,IgM筛查检测不能准确分辨疱疹病毒的种类,也不能准确分辨新发感染和长期感染。不幸的是,很多临床医生仍然要求使用这些检测。事实上,这可能是临床医生进行疱疹检测时所犯的最大错误。IgM检测单纯疱疹也可能错误地检出其他疱疹病毒,如水痘。应该完全避免将IgM检测用于成人疱疹的诊断。(From:T.Warren;Herpes:evrythingyouneedtoknow;p.54;2009),要点:有时成人体内的新发HSV感染确实会在IgG之前出现IgM阳性。但这很不常见,且存在以下更重要的问题:较高的假阳性结果风险;即使确为阳性,也没有针对HSV-1和HSV-2的分辨,而这对于大多病人和提供者来说相当重要。(From:T.H.HunterHandsfield,M.D.;)as;2006),专家意见:,52,PPT学习交流,妊娠期HSV感染的母婴传播主要发生在分娩期生殖道有原发HSV感染及病灶者,血清学筛查不能判断生殖道有无病灶,所以不提倡血清学筛查(GradeB),而只能靠临床表现即生殖道有无病灶来判断、处理。诊断方法:(1)生殖器疱疹病灶分泌物的病毒RNA-PCR检测,同时分型。PCR检测较血清学特异性抗体检测更为敏感,但阴性结果并不能排除HSV感染的存在,因为病毒的脱落是间歇性的。(2)在组织培养中分离出HSV是诊断HSV感染的金标准。但应在病灶出现4872h内进行。,HSV感染诊断,53,PPT学习交流,约有20%30%的孕妇HSV-特异性IgG抗体阳性。在IgG抗体阴性的孕妇中有2%4%的孕妇会在妊娠期感染HSV,而这其中有90%的孕妇会被漏诊。配偶有HSV,本人无HSV病史的妇女应在孕前行HSV筛查,并于孕32-34周复查(-B)对于原发HSV感染者,应在孕36周起给予阿昔洛韦或万乃洛韦治疗直至分娩。对于生殖道存在病灶者建议剖宫产终止妊娠,尽可能地避免人工破膜、头皮电极及胎吸术(-2A,GradeC)。对于继发HSV感染,且生殖道没有病灶或临床无症状者,不是剖宫产的绝对指征,但可建议孕36周予以抗病毒治疗,以降低剖宫产率(-A)。,HSV感染处理,InfectionandPregnancy-studygroupstatement,RCOG,2001GuidelinesfortheManagementofHerpesSimplexVirusinPregnancy.SOGC,2008,June,54,PPT学习交流,1、现阶段临床普遍采用的Torch筛查手段限于检测母体血清学特异性抗体IgG和IgM,宫内感染胎儿受影响的程度存在差异,出生后仅部分患儿会出现临床表现。受目前水平所限,产前诊断只能确定哪些胎儿发生宫内感染,还不能明确辨别出哪些胎儿会发生病理改变。2、CMV、HSV、TOX还没有有效的疫苗,只能采取一些卫生防护措施。CMV预防主要是尽量减少可能接触到CMV感染儿童尿液和唾液的各种行为。预防HSV感染主要是避免不洁性生活、注意个人卫生。TOX预防措施包括改善卫生、饮食习惯,如不食用生肉、不接触猫狗宠物等。风疹疫苗可有效预防RV感染,对于RV抗体阴性的育龄妇女应在孕前接种疫苗,接种疫苗后至少1个月再受孕。3、妊娠期病毒感染的诊疗方面仍面临很多困难和问题。有效预测宫内感染的发生风险及胎儿预后仍是临床诊断中的难点,总结,55,PPT学习交流,罗氏目前上市的TORCH检测项目9项,弓形体:ToxoIgG/ToxoIgM风疹病毒:RubellaIgG/RubellaIgM巨细胞病毒:CMVIgG/CMVIgM单纯疱疹病毒:HSV-1IgG/HSV-2IgGCMVIgGAvidity,ToxoIgGAvidity预计Q2/2013上市,56,PPT学习交流,ElecsysTORCH全自动检测使用分子重组抗原避免干扰,分子重组抗原是将特异性基因转入原核以及真核细胞系,然后由转基因原核以及真核细胞系进行抗原表达,这些细胞的表达是理想的天然的抗原。分子重组抗原与传统的使用细胞裂解产物生产抗原的TORCH检测相比,特异性重组抗原的检测不存在干扰问题。,分子重组技术的主要特征:选择性生产最重要免疫原性抗原使特异性抗原组合成为可能可重复生产理想蛋白质,57,PPT学习交流,ElecsysCMVIgM捕获检测原理,-captureassay;totalassaytime:18min;automaticpre-dilution1:20,Recombinantmultimericantigens:pp150,p52,58,PPT学习交流,特异性IgM抗体阳性通常用来预示急性感染,但IgM抗体会在感染后持续数月至数年,所以会造成阳性IgM结果的干扰。因此,当一份样本IgM/IgG同时阳性时,需要重测或进一步检测如IgG亲和力,IgA或跟
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