湖北省实验动物专业技术培训班操作考试

1、小鼠抓取固定辨认性别；2、大鼠抓取固定辨认性别；3、豚鼠抓取固定辨认性别；4、家兔抓取固定辨认性别；5、小鼠皮下注射；6、大鼠皮下注射；7、小鼠灌胃给药；8、大鼠灌胃给药；9、小鼠腹腔注射；10、大鼠腹腔注射。考试操作时每个考生随机在10题中抽取2题进行操作考试，要求2项操作在2分钟内完成。一、抓取与保定方法1、小鼠：小鼠一般不会咬人，但取用时动物要轻、缓。先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向前爬行时，用左手的拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤(图71)，然后将鼠置于左手手心中，把后肢拉直，用左手的无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢可用中指固定，完全固定好后松开右手。对操作熟练者可采用左手一手抓取法。根据实验需要可将小鼠固定在手中，也可将小鼠固定在玻璃，木和竹制的圆筒内或小鼠固定板上。 2、大鼠：大鼠的牙齿很尖锐，初次抓取大鼠者可戴厚帆布手套，不要突然袭击式地去抓大鼠，抓取时右手慢慢伸向大鼠尾巴，尽量向尾根部靠近，抓住其尾巴后提起，置于实验台上，右手轻轻抓住尾巴向后拉，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将鼠固定在左手中(图72)。也可将大鼠固定在大鼠固定器或大鼠固定板上。3、豚鼠和兔：豚鼠和兔不会咬人，抓取时应注意采用正确的方法，防止对动物的损伤或被兔抓伤。图73是豚鼠抓取和保定方法，图74是兔的抓取和保定方法。4、犬、猫，因饲养方式不同犬、猫抓取方法也不一样。圈养时，犬和猫易与饲养人员亲近，可由饲养人员直接抓取。右手抓住狗的右前肢，左手抓住左前肢，并搂住狗的颈和肩部，将狗抱到固定台上进行固定。猫体重较轻，可用右手边抚摸头部边移到颈背部，紧紧抓住颈背侧的皮肤，把猫半提起来，左手从侧面伸到猫的腹部下面，把猫托住，搂紧(图75)。也可将猫抓到保定台上固定，方法与兔相同。笼养时狗猫比较紧张，对较温驯的狗猫可抚摸、驯服后，抓取固定之。对有露齿、咆哮、鬃发竖立表现的狗，可待其安静下来，再抓取或用钳式捕狗夹，先将其确实固定抓出笼后，将狗嘴捆绑好，抓到保定台上保定。捆扎狗嘴的方法是，用粗棉带从下颌绕到上颌打一个结，再绕向下颌再打一个结，最后，将棉带牵引到头后，在颈背打活结扎好。也可将棉带横放到狗嘴里，从两嘴角处（将嘴扒开）拉出，绕到下颌打一个结，再绕到上颌打一个活结扎好既可(图76)。 5、猴：猴反应灵敏，行动敏捷，抓取猴时应注意人员的安全防护，防止被猴抓伤或感染人畜共患传染病。实验用的猴最好饲养在带有可移动的后隔拦的猴笼中。便于抓取和保定，在大笼或室内抓取时，须二人合作，用长柄网罩，由上而下罩捕。在猴被罩住后，立即将网罩翻转取出笼外，罩猴于地上，由罩外抓住猴的颈部，掀网罩，把猴的两肢胳臂向后背用右手抓紧(图77)，用左手抓住两腿的踝关节部位，把腿拉直。也可放到保定台上固定。3、给药步骤：固定动物：大、小鼠、豚鼠用手固定，用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，其他三指抓住背部皮肤，将鼠抓在手掌内。兔、猫用固定器固定或由助手用手固定，狗用固定台固定并将头固定好，嘴用铜芯电线绑住。插入灌胃针或胃管：大、小鼠、豚鼠直接插入(图91)，兔、猫需用开口器使动物口张开，如图92所示。狗则将右侧嘴角轻轻翻开，摸到最后一对大臼齿，齿后有一空隙，中指固定在空隙下，不要移动，然后同左手拇指和食指将胃管插入，插入灌胃针或胃管时，其轻轻顺着上腭到达咽部，靠动物的吞咽进入食管，灌胃针或胃管插入食管时进针或插管很流畅，动物通常不反抗，若误入气管因阻碍呼吸，动物会有挣扎。灌药：灌胃针或胃管插入需要到达的位置后，缓慢注入药物。拔去灌胃针或胃管：灌药完毕后，轻轻拔出灌胃针。为了防止胃管内残留药液，在拔出胃管前需注入少量生理盐水，然后拔出胃管。 二、皮下、皮内、肌肉、和腹腔注射1器材：注射器、针头、镊子、消毒棉球，皮下注射大、小鼠选用5号针头，豚鼠、兔、猫用5 号针头，狗选用6号针头。皮内注射一般选用4-4 号细针头，肌肉注射，腹腔注射选用针头号与皮下注射相近。2、注射注意事项：（1）注射器，针头必须洗净，尖锐，通畅、大小合适，注射器与针头连接处无漏气现象，注射器、针头应经严格灭菌处理。（2）先计算需用药量，再吸取药液，用镊子将针头套在注射器上，并经90度旋转紧紧套上。手拿注射器时应针头朝上，并防针芯滑脱。（3）注射前需排除气泡，调整药液至准确用量。（4）注射部位需消毒处理，针头插入固定后方可注射，适当掌握注射速度，退针时要注意用消毒棉球压迫止血。3、注射部位和方法皮下注射：大、小鼠、豚鼠一般取背部及后肢皮下，兔、猫、狗取后大腿外侧皮下，兔还可在耳根部注射。注射时用左手拇指和食指轻轻提起皮肤，右手持注射器将针头刺入皮下注射。位于皮下的针头，有游离感。皮内注射：将动物注射部位的毛剪去（不要剪破皮肤），消毒后用4-4 号细针头，将针头先刺入皮肤，然后使针头向上挑起，至可见到透过真皮时为止，或用针尖压迫皮肤，针孔向上平刺入皮内，随之慢慢注入一定量的药液。当药液注入皮内时，可见到皮肤表面马上鼓起小泡，（白色桔皮样），皮肤上的毛孔极为明显。小泡如不很快消失，则证明药液确实注射在皮内，皮内注射，拨针不要很快，注射后稍等几秒钟再拨针，也不要用消毒棉球压迫它。肌肉注射：选择肌肉丰满，无大血管通过的部位，一般采用臀部。大、小鼠等小动物常用大腿外侧肌肉，注射时，由皮肤表面垂直或稍斜刺入肌肉，回抽一下、如无血，即可注射。腹腔注射，在腹部下的1/3处，略靠外侧，朝头方向平行刺入皮肤约5mm左右，再把针竖起45穿过腹膜进入腹腔内，再慢慢注入药物，大、小鼠、豚鼠一般一人即可注射(93)，狗、猫兔等动物可由助手固定好，配合进行。=三、静脉注射1、器材酒精棉球、止血用脱脂棉球或纱布，大鼠、小鼠，兔固定器，狗、猫固定台。针头：小鼠用4号针头，大鼠、豚鼠用4 号针头，兔、狗、猫用6号针头。2、注射注意事项除与皮下注射等注意事项相同以外，还须注意针头在刺入血管后，要将针头固定好 ，不能晃动，以免刺破血管。另外，静脉注射要慢慢注入药液，连日多次静脉注射时，应变换使用不同位置的血管。3、注射部位与方法(1)大、小鼠的尾静脉注射：尾静脉注射常用左右两侧的两根尾静脉，背侧的尾静脉也可用，但由于其位置容易移动，不如两侧的静脉好注射。腹侧一根是尾动脉。动物在筒式固定器固定好后，反复用酒精棉球擦尾部，以达到消毒和使血管扩张的目的。选择靠尾尖扩张的部位，将尾折一适宜的角度（小于30），对准血管中央，针尖轻轻抬起与血管平行刺入，针头在血管内推进则无阻力，否则有阻力。如注射部位皮下出血、肿胀，说明针头不在血管内。确认针头在血管内后，慢慢注入药液。注射完毕后马上拔出针头，压迫止血。（2）大鼠、沙鼠、豚鼠的后肢浅背侧足中静脉注射：进行后肢静脉注射时，助手在固定动物的同时要固定好注射一侧的后肢及尾。用酒精棉球洗擦后肢背面，对准扩张血管进针，先针刺入皮下再沿血管方向平行刺入血管，确认后注入药液。（3）豚鼠和兔的耳缘静豚注射：将动物用固定器固定好后，轻拉耳尖，用酒精棉球消毒后，沿血管向耳根部方向进针，准确刺入血管后可看见有回血，然后缓慢注入药液，注射完毕后注意压迫止血。（4）狗前、后肢静脉注射：前肢内侧皮下头静脉靠前肢内侧外缘行走。后肢外侧小隐静脉在后肢胫部下1/3的外侧浅表的皮下，由前侧方向后行走。狗前(后)肢静脉注射时，将狗侧卧固定，剪去注射部位的毛，用乳胶带（管）。绑在狗股部（后肢