病原微生物第19章支原体

1食入未经消毒的羊奶，最有可能引起的病是A结核B波浪热C破伤风D肉毒中毒E伤寒2菌体呈卵圆形，两端浓染的细菌是A炭疽杆菌B白喉棒状杆菌C结核分枝杆菌D鼠疫杆菌E伤寒沙门菌,3鼠疫杆菌在肉汤培养液中生长不能形成A混浊生长B絮状沉淀C形成菌膜D钟乳石状下沉E颗粒状沉淀4.5岁患儿，发烧、咽痛、咳嗽5天急诊入院。免疫接种史不祥。查体：咽后壁、鄂弓和悬雍垂等处发现灰白色膜状物，用灭菌棉拭子不易擦掉。初步诊断为A白喉B急性喉炎C病毒性咽炎D扁桃腺炎E支气管炎,微生物的种类,性 状,非细胞型,原核细胞型,真核细胞型,细 胞 型,测量单位,nm（最小）,核 酸,DNA or RNA,DNA & RNA,DNA & RNA,细胞结构,仅有原始核质， 无核膜或核仁； 细胞器很不完善，只有核蛋白体,种 类,病 毒类病毒朊 粒,细菌、放线菌、 支原体、衣原体、立克次体、螺旋体（二菌四体）,真菌,m,没有典型的细胞结构，无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖,m,细胞核分化程度高，有核膜和核仁；细胞质内细胞器完整,支原体 Mycoplasma,第19章,第一节 概述,定义缺乏细胞壁形态上呈高度多形性能通过除菌滤器在无生命培养基中能生长繁殖最小的原核细胞型微生物能形成有分支的长丝，故称支原体,柔膜体纲,支原体目,肺炎支原体，人型支原体，生殖支原体，穿透支原体，发酵支原体，梨支原体,脲脲原体,支原体分类,支原体科,无胆甾原体科,螺原体科,支原体属,脲原体属,一、生物学性状,（一）形态 0.30.5 m 无细胞壁 高度多形性：球、杆、丝状和分枝状等 一般Giemsa染色较好，染为淡紫色,（二）结构 内外两层为蛋白质及糖类，中层为脂类（磷脂为主），凡作用于胆固醇的物质，如皂素、毛地黄甙、二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。 特殊的顶端结构： 粘附宿主上皮 细胞表面，与支原 体的致病有关。,（三）培养特性 营养丰富的培养基： 10%20%人或动物血清以提供胆固醇与其 它长链脂肪酸，多数还需添加酵母浸液、组 织浸液、核酸提取物和辅酶。 pH：适宜7.68.0（7.0易死亡），但解脲脲 原体最适pH5.56.5 兼性厌氧： 大多寄生性支原体在37时在微氧环境（含 5%CO2和90%N2）中生长最佳。 繁殖方式多样：二分裂繁殖外，还有分节、断裂、 出芽或分枝等方式,固体培养基： 27天长出直径约10600 m的典型的“荷包蛋样”菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，外周由颗粒包绕。液体培养基： 清亮，用颜色变化单位（CCU）表示。,需用放大镜/低倍显微镜观察,支原体典型菌落,支原体与细菌L型的异同点,不同点,缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。固体培养菌落呈荷包蛋样或颗粒状。临床表现相似间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等,相同点,支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性,肺炎支原体 + 红细胞 肺炎、支气管炎人型支原体 + 泌尿生殖道感染生殖器支原体 + 泌尿生殖道感染穿透支原体 + + 红细胞 条件感染 CD4+T细胞 多见于艾滋病 巨噬细胞 溶脲脲原体 + 泌尿生殖道感染 流产及不孕不育,生化反应,（四）抗原结构 补体结合试验可检测糖脂类抗原 ELISA试验可检测蛋白质类抗原 血清抗体可用生长抑制试验（growth inhibition test, GIT）和代谢抑制试验 （metabolic inhibition test, MIT）以 鉴定,抗原构造其主要Ag性来自细胞膜。胞膜外层蛋白质是主要型特异性Ag。其抗原性常用生长抑制试验（GIT）和代谢抑制试验（MIT）鉴定。,GIT：将吸有型特异性抗血清的滤纸片贴在接种过支原体的平板上，孵育后，如有抑制生长现象出现，则说明该支原体与血清同型。,MIT：是将支原体接种在含有抗血清的葡萄糖（酚红）培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸，酚红不变色。用GIT和MIT可将支原体分成若干血清型。,若相应，则支原体生长、代谢受抑制，酚红不变色,代谢抑制试验（MIT）,生长抑制试验（GIT）,（五）抵抗力 对化学消毒剂敏感，对结晶紫、 醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力； 对影响细胞壁合成的抗生素如青 霉素类天然耐受，但对干扰蛋白 质合成的抗生素如强力霉素、交 沙霉素等敏感。,二、致病性与免疫性,（一）致病机制 荚膜或微荚膜：抗吞噬作用 毒性代谢产物：神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤 超抗原：免疫调节 其它：如穿透支原体粘附侵入CD4 T细胞引起损伤 粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞,二、致病性与免疫性,致病性 支原体 致病性 肺炎支原体 原发性非典型肺炎、支气管炎 表面感染人型支原体 泌尿生殖道感染 表面感染生殖支原体 泌尿生殖道感染 表面感染穿透支原体 多见于艾滋病 入血溶脲脲原体 泌尿生殖道感染 表面感染,（二）所致疾病 存在广泛，多不致病 肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎 溶脲脲原体、人型支原体和生殖支原 体可引起泌尿生殖系统感染和不育症 穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的 辅助致病因素,二、致病性与免疫性,（三）免疫性 体液免疫：抗膜蛋白的抗体包括 IgM、IgG和SIgA 细胞免疫：主要是特异性CD4Th1 细胞分泌细胞因子,二、致病性与免疫性,0.20.3m，高度多形性，如球形、球杆状、棒状、分枝状和丝状；初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中，一般10天左右长出菌落；多次传代后生长加快，菌落呈“油煎蛋”状；能发酵葡萄糖，不能利用精氨酸与尿素；对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感。,第二节 肺炎支原体,一、生物学性状,（一）致病性 1.主要经飞沫传播，但大多数发生于夏 末秋初，515岁青少年发病率最高。 2.含特殊的顶端结构：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）为主要的粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起组织损伤。,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 原发性非典型性肺炎（primary atypical pneumonia），临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主，有时并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。,二、致病性与免疫性,（三）免疫性 血清特异性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴细胞； 呼吸道局部黏膜产生的SIgA对防止再感染有较强保护作用； 出现IgE介导的I型超敏反应，促使哮喘病急性发作,（一）分离培养 痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。,三、微生物学检查法,三、微生物学检查法,（二）血清学检查 冷凝集试验： 即用病人血清与人O型血红细胞或自身红细胞混合，4过夜时可发生凝集，而在37时这种凝集又分散解离开，但仅50左右的患者才出现 阳性。此反应为非特异性。 快速诊断 ELISA：检测P1和P30蛋白mAbs PCR：从痰标本中检测16S rRNA或 P1蛋白基因,防治原则 大环内酯类药物 喹诺酮类药物,四、防治原则,第三节 解脲脲原体,形态：0.50.3 m，单个或成双排列固体培养：48 h后长出直径1530 m “油煎蛋”状菌落。 最适pH为5.56.5。生化反应：分解尿素，不分解糖类和精氨酸抵抗力：对1:2000醋酸铊不敏感抗原：MB抗原是其主要膜抗原，将解脲脲原 体分为A、B两大群，14个血清型,一、生物学性状,（一）致病机制 -粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤； -产生毒性代谢产物如NH3，对宿主细胞有 急性毒性作用； -磷脂酶损伤宿主的细胞膜。,二、致病性与免疫性,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睾炎等泌尿生殖道疾病，还与自然流产、早产、死胎和男性不孕有关。,病原体检测 接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为红色；再取0.2 ml培养物转种于固体培养基，在5%CO2和90%N2的环境中经37培养2448h，用低倍镜观察菌落，进一步鉴定需用特异抗血清做GIT与MIT。,三、微生物学检查法,核酸检测 PCR检测： 检测尿素酶基因、多带抗原（MB-Ag）基因和16S rRNA基因。此法快速、特异，适宜于大批量标本检测。,三、微生物学检查法,加强宣传教育，注意性卫生，切断传播途径。四环素类、喹诺酮类药物治疗，但有耐药株产生。,四、防治原则,第四节 人型支原体,-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最适pH7.27.4。固体培养基上形成200300 m的较大菌落，呈典型的“油煎蛋”状。-寄居于泌尿生殖道，通过性接触传播，可引起附睾炎、盆腔炎、产褥热等。-微生物学检测和防治原则同解脲脲原体。人型支原体对大环内酯类抗生素不敏感，对1:2000醋酸铊与红霉素（100 mg/L）不敏感。,第五节 生殖支原体,-生殖支原体基本形态为烧瓶状，能发酵葡萄糖使培养基变酸，不分解尿素和精氨酸。-培养基上不生长，须在无醋酸铊SP-4培养基生长但缓慢，菌落呈典型的“油煎蛋”状。-顶端结构有粘附素MgPa，140 kDa，与肺炎支原，能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。-较难培养，生长慢，不适宜于常规实验室分离培养。实验室最好的诊断方法是核酸检测。,第六节 穿透支原体,1991年Lo首次从1例艾滋病患者尿中分离出一种新支原体，其形态为杆状或长烧瓶状，一端为顶端结构，具有粘附与穿入的作用。,穿透支原体发酵葡萄糖，分解精氨酸，不分解尿素，在SP-4培养基上生长较慢，形成典型的“油煎蛋”状菌落。顶端结构能粘附于人红细胞、单核细胞、CD4T淋巴细胞及人尿道上皮细胞，导致宿主细胞受损或死亡。目前认为穿透支原体可能是AIDS发病的一个辅助因素。,思考题,1、细菌L型与支原体在生物学性状方面有何相似之处？其主要区别是什么？2、简述支原体形态结构的主要特征。3、简述致病性支原体的种类及其致病性。4、名词解释：支原体(mycoplasma)、冷凝集试验,1. 有关细菌L型与支原体的共同点，错误的