三江2018年松材线虫病和薇甘菊疫情监测普查工作方案

三江县2018年松材线虫病和薇甘菊疫情监测普查工作方案为贯彻落实柳州市林业局 关于开展2018年松材线虫病和薇甘菊疫情监测调查的通知 （柳林通字201833）号)文件精神，根据广西松材线虫病普查技术方案，为做好我县松材线虫病疫情监测普查工作，准确了解我县松材线虫病疫情情况，确保我县森林健康持续发展。特制定本方案。一、普查时间。一年两次。春季4月10日至5月30日完成外业调查工作，6月10前完成全县内业统计并上报市森防站。秋季9月10日至10月30日完成外业调查工作，11月5前完成全县内业统计并上报。上报材料要求纸质和电子版同时上报。二、成立普查领导小组。为确保调查工作顺利进行，成立“三江县松材线虫病及薇甘菊疫情普查领导小组”，组长：韦认忠（林业局局长）副组长：刘贝宁（林业局营林站站长、党组成员）荣英俊（古宜镇副镇长）莫培恩（丹洲镇副镇长）兰应德（斗江镇副镇长）欧 智（林溪镇副镇长）石广民（八江镇副镇长）吴来付（独峒镇副镇长）韦爱兰（程村乡副乡长）覃铭昌（老堡乡副乡长）吴艳辉（和平乡副乡长）吴建能（高基乡副乡长）吴永秀（同乐乡副乡长）贾求顺（富禄乡副乡长）潘金海（洋溪乡人大副主席）粱 军（良口乡武装部部长）傅 俊（梅林乡武装部部长）杨善勋（林业局党组成员）组员：潘道锋、谭学东、向春娥、陆真汉、曹禹红、王红芳、覃毅刚、穆雄庆、赵理文、李升黎、各乡（镇）林业站站长、森防员。三、调查内容调查枯死松树地点、数量，涉及松林面积，查明松树枯死原因等。查清发现枯死松树分布地点、松树种类、分布面积、枯死株数、松褐天牛危害等情况，绘制松树枯死情况分布图，填写松树枯死情况表。四、普查范围。三江县辖区境内，包括15个乡镇和1个国营林场，普查重点是重要生态区位、松材线虫病疫点及其周边的松林、人为活动频繁的城镇以及交通沿线、港口、风景区、松木制品生产和使用单位、建筑工地、仓库、驻军营房、木材集散地、移动通讯站、电视发射台、高压线塔、电缆线路、光缆线路及高压线路等地区附近的松林。五、线路踏查及重点区域调查（一）选择合理的线路，将全县的松属林分踏查一遍，线路踏查要尽可能多地覆盖所分布的松属林分，确保松材线虫病普查覆盖率达100%。特别要对松材线虫病发生区周围、交通沿线两侧、近3年新建的通信(电力)线路(基站)两侧，风景区(寺庙)、高速公路(含铁路)及其它项目建设工地、城镇、开发区、工业园区、电视发射台和木材集散地及其包装材料经营单位等重点地带或重点部位周围的松林实施重点调查。（二）重点区域调查，松材线虫病普查要对重大工程建设地、人员活动密集的重点区域实行重点监测普查。要充分利用护林员巡山机会，有效掌握松树分布、生长、枯死动态，做好松树枯死原因的排查工作，一旦发现不明原因枯死松树萎蔫、枯死情况立即取样鉴定，初步镜检发生线虫的(松材线虫或拟松材线虫等)，应及时送样品至广西林业有害生物鉴定中心(广西林科院)进行分子生物学鉴定。薇甘菊普查要重点调查林缘、勾谷、河溪、道路(公路和铁路)沿线、果园、林中裸地、垃圾场、闲置地、菜地周边及鱼塘基周围等薇甘菊易于生长的地方，以及高速公路两旁、风景名胜区、生态公益林区等区域。发现疑似薇甘菊的要报告并请专家鉴定确认，确保在第一时间发现疫。六、调查方法（一）踏查。根据当地松林分布的特点，设计出便于观察全部林分的踏查路线；沿踏查路线用目测方法或借用望远镜查找有无枯死松树，或针叶褪色、黄化、枯萎或针叶呈红褐色等症状的松树，选择取样对象。主要踏查线路有：1.古宜高基和平丹洲；2.斗江林溪八江；3.古宜-程村老堡；4.良口洋溪富禄梅林；5.古宜独峒同乐。踏查应有GPS轨迹记录，使用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航迹，GPS踏查线路命名为：县+乡镇+踏查3位数字编码。将每条踏查路线GPS轨迹导入林业有害生物GIS信息管理系统中保存。发现松树枯死情况的记录踏查点信息，填写附表1。（二）详查。根据记录踏查点信息踏查结果，对疑似发病林分进一步详细调查，凡死因不明的可疑松枯死木、濒死木均要取样检验。按照本方案第三点所列取样方法，抽取一定数量的样品，进行分离镜检，确定是否带有松材线虫。每个详查样地应有GPS定位记录及发生情况照片，应用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航点，样地详查GPS定位命名为：县+乡镇+样地3位数字编码。七、样地调查对发现枯死的松树，调查人员应到现场准确排查枯死原因，并登记分布地点、树种、小班面积、枯死株数和松墨天牛危害程度等情况，（一）取样方法1.取样部位一般情况下在树干下部（胸高处）、上部（主干与主侧枝交界处）、中部（上、下部之间）3个部位取样。如仅部分枝条表现症状的，要在树干上部和死亡的枝条上取样。如外部表现症状明显的可在胸高处取样。在春季松褐天牛化蛹期，可在蛹室周围取样。2.取样时在取样部位剥净树皮，直接砍取100200克木片；或剥净树皮，用手摇钻从木质部至髓心钻取100200克木屑；或在取样部位分别截取2 厘米厚的圆盘。3.取样时应排除人畜破坏、森林火灾、其他病虫害等原因造成的枯死树。4.取样时应考虑以下因素松材线虫病发病高峰期一般在1011月，从表现出针叶变黄、树脂分泌减少甚至停止至死亡约1个月至1个半月。在松林中一般是优势木先发病。由于不同地区种源的松材线虫的致病性、松树的抗性差异等原因，一些松树仅部分枝条表现感病外部症状。这种症状在混交林中表现尤其明显。抽取样品要及时并重点抽取尚未完全枯死或刚枯死的优势木（针叶呈黄绿或黄褐色，尚未完全枯萎，树皮尚未脱落，材质尚未腐朽）。5.所取的样品要及时贴上标签（记录样品号、采集地点、树种、树龄、取样时间和取样人等）。并填写取样记录表见附表3。（二）抽样数量以林业小班为单位，表现典型症状的松树在10株以下时全部取样；10株以上时先抽取10株，再选取其余数量的1%5%。（三）样品的保存与处理取回的样品应及时分离鉴定，若需要保存可采取以下方法：将木片装入塑料袋内，扎紧袋口，在袋上扎几个小孔（也可直接保存木段、圆盘），放入4冰箱。若需长期保存，要经常在样品上喷水（一般在半个月至1个月内完成分离鉴定）。样品分离鉴定结束后应及时对样品进行销毁。松材线虫普查监测工作具体技术操作规程参见国家标准松材线虫普查监测技术规程（GB/T 234782009）。八、分离鉴定（一）线虫分离将取回的样品在室内采用贝尔曼漏斗法或浅盘法进行线虫分离，分离时间一般需12小时以上。将分离液体收集到试管或烧杯中，通过自然沉淀或离心后进行镜检。 （二）线虫培养疫木保温保湿培养：将样品锯成小段，置于烧杯中加少量清水，木段下端浸在水中，木段上端用湿纱布覆盖，在30条件下保温保湿培养3天，倒取杯中水液，可获得较多雌雄成虫；或将样品木段适当浸湿，放于塑料袋里，扎紧袋口，置于30培养箱中3天取出重新分离，可获得较多雌雄成虫。（三）玻片的制作在洁净的载玻片中央滴一水滴，水滴的量以加盖玻片后恰好充满盖玻片下的空间为好。用细针挑取，或用毛细滴管吸取线虫置于载玻片的水滴中，并使之沉底。将有线虫的载玻片在酒精灯的火焰上往返通过56秒，杀死线虫。用细针摆好水滴中的死线虫，然后用镊子夹盖玻片从一侧轻轻盖下。（四）鉴定1.常规显微镜形态鉴定（仅适用于雌雄成虫，以雌成虫为主）：将制作好的玻片置于显微镜下观察其形态，判别是否为松材线虫，并填写镜检记录表，见附表3。松材线虫分离、培养、镜检技术操作规程参见国家标准松材线虫病检疫技术规程（GB/T 234762009）2分子检测（适用于各虫态）：松材线虫的分子检测技术采用实时PCR检测技术。九、数据整理与上报（一）数据整理普查数据以县级为单位进行普查数据汇总（附表4、5），普查数据汇总到乡镇级行政区级别，并由县级汇总到市级，市级汇总上报到自治区级。自治区直属单位（林场、保护区和热林中心）普查数据汇总到所属县区，并上报至自治区防治检疫站。（二）材料上报1.每次普查完成后，形成普查工作总结（包括附表4、5）分别于6月