知识点+练习 微生物的实验室培养

微生物的实验室培养(5年15次测试)(2013年新课程标准国家卷，四川李综合，江苏卷，北京卷，浙江，山东，天津)一、徽章1概念：根据微生物对营养物质的不同要求，生长和繁殖的营养矩阵2.营养成分徽章的类型和用途宗地标准徽章的种类特征用途物理特性液体徽章不添加混凝剂工业生产半固态徽章添加琼脂等凝固剂观察微生物的运动，识别固体徽章微生物分离鉴定，活菌数，菌种保存化学成分天然徽章成分不明确的天然物质工业生产合成徽章徽章成分明显分类，评价用途选择徽章培养基中添加了一种化学物质，抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长培养、分离某些微生物(例如培养酵母和霉菌时，可以在培养基中添加青霉素；培养金黄色葡萄球菌时，可以在培养基上添加高浓度盐等)鉴别徽章根据微生物的代谢特性，在培养基中添加某种指示剂或化学药品使用李红-美蓝培养基可以确定饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(如果有，群体为单摆酒色，有金属光泽)特别提醒我们，滋养微生物与从属营养微生物所需的营养成分不同：自身营养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮无机质，从属营养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮有机物，因此微生物的代谢类型可以根据培养基中的营养素来判断。氮无机物不仅向独立营养微生物提供氮源，还向NH3等能源物质提供能量。二、无菌技术1.消毒2.灭菌消毒灭菌比较比较理化因素的作用强度消灭微生物数量能根除孢子和孢子吗消毒比较温和某些生活状态的微生物不，不灭菌强烈所有微生物你能做到的三、微生物的纯化培养和菌种保存1原则：将细菌稀释或分散为单个细胞，使其长成单个群体，这种群体就是精制的细菌群。2.制造固体培养基的过程纯化大肠杆菌的方法常用的微生物接种方法有板划线法和稀释涂层板法。(1)板划线：在琼脂固体培养基表面接种环，逐渐稀释聚集的菌株，将其分散在培养基表面。(下方图示)(2)稀释图版法：将菌液制成一系列梯度稀释法，然后分别将不同稀释度的菌液涂在琼脂固体培养基表面进行培养。(如下图所示)系列稀释工作(见下图)涂层平板工作(见下图)(3)两种纯化细菌方法的比较项目优点缺点服务范围平面虚线法可以观察菌落特性，分离混合细菌数不清适合有氧细菌稀释涂层板法可以计数，可以观察殖民地的特性吸收量小，麻烦，盘子不干燥，效果不好，容易扩散适用于厌氧细菌和同时厌氧细菌4.培养：接种后，将培养皿放到孵化器中培养菌种保藏(1)临时保藏(2)长期保存法：甘油保存法，保存法-20 _ c特别是(1)牛肉奶油蛋白胨固体培养基的制备注意事项背板的适当温度在50 左右，温度太高的话，是热手，太低的话，培养基就会变硬。如果将板倒放，培养基表面的水分会更好地挥发，碟子盖上的水滴会落到培养基上，受到污染。(2)平板划线作业注意事项第一次划线和每次划线前需要燃烧接种环。为了防止热量杀死太多菌株，应该燃烧接种环，冷却。最后一个区域与第一个区域不连接。要用力过猛，防止徽章刮伤。微生物培养和分离试验1.(江苏)一个研究小组从有机废水中分离出微生物，用于废水处理。以下说明是正确的()。A.把培养液分在培养皿里灭菌B.转换划线角度后，必须燃烧和刮削划线环。C.接种的培养皿必须在光照培养基中培养。D.在培养过程中每周观察一次这个问题旨在分析微生物分离培养过程中的操作要求和培养条件等相关知识，探讨考生的知识利用能力和实验处理能力。培养微生物的过程必须先灭菌，然后倒入板，a错误；接种环燃烧灭菌，b准确，在每次划线前；接种后，培养皿必须在温度调节培养基中培养，光会影响温度等条件。培养中观察间隔一般不超过24小时。回应b微生物实验室文化的扩展与应用2.(新课程标准全国 Richard)在临床使用抗生素之前，有时需要进行细菌耐药性实验。实验时，首先要从患者身上提取少量样本，然后按照特定的实验阶段确定特定的细菌对其他抗生素有多敏感。请回答以下问题：(1)将样品接种到固体培养基表面，以从样品中获得病原菌单一菌落_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(2)用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _方法在固体培养基表面接种，在37培养基中培养24 h(3)为了检测病原菌对抗生素的敏感度，将分别包含a、b、c、d四种抗生素的滤纸均匀地放置在板上的不同位置，培养一段时间后，包含a的滤纸周围出现透明圈； 这是抗生素a _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的过滤用C _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 除了细菌污染，抗生素d的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(4)根据上述实验结果，以抗菌为目的的抗生素_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _分析(1)在微生物培养过程中分离微生物的方法是稀释涂层平板或平板标记法。(2)为了使微生物在培养基中均匀分布，一般用稀释涂层板法将微生物接种到培养基中。(3)在内省检查过程中，如果群体周围出现透明源，说明这种抗生素能抑制这种细菌；透明圈的大小表示这种抗生素抗菌效果的强弱。因此，抗菌效果的强度依次确定为a，c，b。d透明纸上出现了群体，表明该群体对这种抗生素有耐药性。答案(1)平板标记稀释涂层(或涂层)平板(2)稀释涂层平板(涂层)(3)不敏感与A的耐药性细菌(4)A相比，c对该病原体的敏感度归纳比较1.徽章的制备原理(1)目的：在制造时，根据微生物的种类或培养目的等，明确要制造的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养素的浓度和比例。(3)pH值要适当：细菌为6.5 7.5，放线菌为7.5 8.5，真菌为5.0 6.0，培养其他微生物所需的pH值不同。培养基的营养组成(1)不同培养基的特定公式不同，但一般包含水、碳源、氮源和无机盐。(2)还必须满足pH、特殊营养素、氧的微生物要求。微生物与动植物营养元素的比较项目碳源氮源能量无机盐，水动物碳水化合物、脂肪等蛋白质或其分解物和碳源一起都需要。种类和功能基本相同微生物从属营养类型碳水化合物、脂肪、酒精、有机酸等蛋白质或其分解物、铵盐、硝酸盐、N2等和碳源一起滋养型CO2、碳酸盐等NH3、铵盐、硝酸盐等通过氧化无机物或利用光能铵盐，硝酸盐光能绿色植物32.(8分钟)广泛用于农业生产的除草剂在土壤中不容易分解，长期使用会污染土壤。为了修复污染的土壤，可以按照图画程序繁殖能分解其除草剂的细菌。据悉，这种除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低，含有一定量除草剂的培养基不透明。A B光盘(1)微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心必须在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _旁边完成。图b，c中所示的任务的目的是逐步_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _32(2)在繁殖过程中，土壤浸出液要接种以_ _ _ _ _ _ _ _ _为唯一氮源的固体培养基。为了筛选高效的目的菌，可以比较单个群体周围透明源的大小。实验结果是右侧所示的5个a e菌株中最理想的菌株。(3)要纯化初步审查中获得的目的菌并计数，可用的接种方法是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。在统计分离的细菌数量时，聚集的种群数量往往多于活细菌的实际数量_ _ _ _ _ _(4)开车时有三种材料或器械需要消毒或灭菌。培养菌用培养基和培养皿；操作员的手；玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。其中需要杀菌的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(序列号)32.(8点)(1)稀释酒精灯无菌操作火焰以获得单个殖民地(2)除草剂E (3)稀释涂层平板法较少(4) 微生物培养35.(15分钟)一.下表显示了微生物培养基的公式。(1)根据物理特性，其徽章属于_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _徽章。按用途分类属于_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _徽章。(2)根据培养培养基的组成培养的微生物同化作用类型为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)要确定首都是否超过了大长峰，请至少_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _I. (1)液体选择(2)从属营养(2分)(3)琼脂二红和三聚氰胺(2分)微生物培养33.(8分钟)土壤中含有大量不溶性磷酸盐，从土壤中筛选出能把不溶性磷酸盐转化为植物可吸收的可溶性磷的优秀磷溶解菌株，添加到有机肥中，改善植物磷元素的供应。研究人员进行以下实验：实验原理：在固体培养基中，不溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，在集落周围形成透明源(右)，透明源直径(D)和菌落直径(D/d)的比率(D/D)表示微生物溶解磷的能力大小。实验阶段：菌株透明圆直径(d)殖民地直径(d)D/dM-3-0118.812.31.5B3-5-620.78.02.6T1-4-019.16.51.4第一阶段用某地区的土壤样品5g稀释土壤溶液，然后将稀释液1mL接种到基础培养基a中，在适当的温度下培养72h。第二阶段基本培养基a中接种环选择具有代表性的菌落，培养3 4d，观察群体特征和透明圈的大小，初步审查3种优良的解磷菌株，如右图。分析回答：(1)从物理形式来看，徽章a属于徽章。徽章的磷的来源是。(2)阶段1的接种方法是阶段2的接种环的灭菌方法。(3)实验结果表明，溶磷能力最强的菌株是。(4)为了进一步测定最初筛选的三个菌株的实际溶磷能力，研究人员将它们接种到基础培养基b，在37，200 rmin-1舍克培养，定期取上清液，测定溶液的溶磷含量，得到了右图所示的曲线。用切片机培养的好处是，即可从workspace页面中移除物件。结果表明，最优秀的溶磷菌株。33.(8点，除特殊标记外，每个空的1点)(1)固体不溶性磷酸盐(2)稀释涂层平板燃烧(3)B3-5-6(4)增加培养液中的溶解氧。使菌种充分接触培养液，有利于物质交换(两点)M-3-01微生物培养高考和模拟题31.(8分钟)人工瘤胃可以模仿反刍动物(如牛羊)的胃，使稻草发酵处理，提高稻草的营养价值。(。研究人员为了提高发酵效果，在牛的胃中筛选出纤维素酶生产菌株，投入了分解纤维素的能力进行了研究。回答以下问题：(1)在“样品稀释”和“涂层平板”阶段，以下选项不需要的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(填充序列号)。培养皿显微镜无菌水的酒精灯(2)涂复平板时，培养基表面添加水滴的细菌悬浮液数量过多的情况是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)将含有琼脂的培养基放入试管时，试管口粘连的培养；基础，需要用酒精棉签擦拭的原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不会与纤维素一起脱落这种反应发生在分解物纤维二糖和葡萄糖上。研究人员刚刚水果红色徽章板上有透明分解源的多个殖民地已被筛去(见右侧)。图中分解源的大小与纤维素酶的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _相关。绘画降解纤维素的能力最强的菌株是_ _ _ _