机能学实验--氨在肝性脑病发生中的作用

氨在肝性脑病发生中的作用,肝性脑病（hepaticencephalopathyHE）,继发于严重肝病的神经精神综合症,欣快、反应迟缓、睡眠节律的变化，有轻度的扑翼样震颤,前驱期,扑翼样震颤Flappingtremor,行为异常、嗜睡、定向理解力减退及精神错乱，经常出现扑翼样震颤,昏迷前期,明显的精神错乱、昏睡等症状,昏睡期,肝性昏迷(hepaticcoma),神志丧失、不能唤醒，没有扑翼样震颤,昏迷期,肝性脑病的发生机制,肝性脑病,氨中毒学说,假性神经递质学说,-氨基丁酸学说,血浆氨基酸失衡学说,氨中毒学说,在严重肝病时，机体内氨生成过多而肝脏对氨的清除能力下降，致使血氨水平显著升高，高浓度的氨通过血脑屏障进入脑组织，引起脑功能障碍。,如何复制肝性脑病的动物模型？,氨的来源增多氨的清除减少,实验目的,学习复制肝功能障碍时氨代谢异常的动物模型的方法观察肝性脑病时机体的典型表现及血氨水平的变化掌握肝性脑病的概念及发病机制,实验动物家兔，体重甲兔：雌/雄乙兔：实验器材家兔急性手术器械一套，兔固定台，粗棉线，细丝线，1ml、2ml、5ml、10ml注射器各1具，婴儿秤、扩散瓶2个药品1利多卡因，1肝素，2.5%复方氯化铵溶液，0.5mol/L硫酸，纳氏试剂，饱和碳酸钾,实验方法,甲兔：结扎大部肝叶注射复方NH4Cl乙兔：不结扎肝叶注射复方NH4Cl,剑突下做一6-8cm长切口-避免气胸,胶布剪口游离长度,甲兔出现大抽搐时再次放血1ml测血氨。记录所用复方NH4Cl总量和时间。,乙兔与甲兔出现大抽搐时注射的复方NH4Cl量和时间相同时，从颈总动脉再次放血1ml测血氨。继续推注复方NH4Cl直至乙兔出现大抽搐，记录所用复方NH4Cl总量和时间。,小结第一次取血时间第二次取血时间、弃掉肝素停止注射复方NH4CL注射器的使用,大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬,迅速,血氨测定方法(纳氏试剂显色法),饱和碳酸钾溶液1ml血液1ml,立即以玻璃棒蘸硫酸1滴迅速盖上扩散瓶,倾斜扩散瓶将血液及碳酸钾充分混匀（45度角旋转10分钟，放置0分钟）,取出玻棒,取纳氏试剂3ml将玻棒上含氨硫酸洗入试管中肉眼观察液体颜色,颜色深浅反映血液氨的浓度高低(可用、+、+、+、+表示颜色深浅),玻棒用前调整好高度蘸液约1cm勿使玻棒与血液及瓶内壁接触,提前,观察项目,氨在肝性脑病发生中的作用观察组出现大抽搐所需出现大抽搐血氨浓度别NH4Cl用量(ml)所需时间(min)第1次第2次呼吸肌张力,甲兔,乙兔,注意事项,原则上选择体重相差不超过250g的家兔进行对照专人测定血氨肝叶结扎线置于肝叶根部，避免勒破肝脏复方NH4Cl切勿漏入腹腔乙兔与甲兔同时推注复方NH4Cl或晚于甲兔？发生大抽搐时迅速放血,05min10min15min20min25min30min5ml10ml15ml20ml25ml30ml35ml,大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬,讨论要点,1.肝性脑病的概念2.模型是如何复制的（氨中毒学说）3.实验数据横纵向对比分析4.实验现象的分析（氨对脑的毒性作用）,观察项目,呼吸运动、肌张力、抽搐。氨在肝性脑病发生中的作用观察组出现大抽搐所需出现大抽搐血氨浓度别NH4Cl用量(ml)所需时间(min)第1次第2次,甲兔,乙兔,氨对脑代谢功能的影响,1、干扰脑细胞能量代谢2、使脑内神经递质改变3、氨对神