肺炎链球菌的实验活动生物危害评估报告

肺炎链球菌的实验活动生物危害评价报告一、细菌的传播和致病性肺炎链球菌广泛分布于自然界，常居于正常人鼻腔，多数不致病或致病力弱，少数致病力强。肺炎链球菌主要可引起大叶性肺炎、支气管炎、中耳炎、脑膜炎、胸膜炎、心内膜炎、败血症等疾病。 典型大叶性肺炎发病急剧，患者有高热、寒颤，起初有发作性干咳，不久有少量黏痰，随后痰变黄，呈黏液性，一般病程为12周。二、细菌的生物学特性肺炎链球菌(S.pneumoniae )为链球菌科、链球菌属。 革兰氏阳性球菌，呈矛尖的形状，双重排列，通过标本和液体培养呈链状连接。 有荚膜，无鞭毛，无芽胞。本菌营养要求高，需要在含有血液和血清的培养基中生长。 相容性厌氧性，c02的510%的成长最好，另外，生成的菌落周围有草绿色溶血环。 在液体培养基中培养24小时，呈现均匀混浊，后期发生自溶变得明显。该菌能分解多种糖类，产酸不产产气。 胆汁溶解试验阳性Optochin敏感性试验阳性。 其抗原结构为荚膜多糖抗原：多糖抗原，型特异性，共85型，型致大叶性肺炎； 菌种特异性抗原是多糖类抗原，存在于细胞壁，被称为c多糖类。 当钙离子存在时，c多糖与正常人血清中被称为c反应蛋白(C reactive protein，CRP )的球蛋白结合并沉淀。该菌抵抗力弱，加热至56，死于20min。 另外，对一般消毒剂敏感，干燥抵抗力强。肺炎链球菌可能发生的变异是荚膜毒性光滑(s )型菌变异导致荚膜毒性下降或消失的粗糙(r )型。三、细菌的实验室检查1 .标本采集包括痰、脓液、血液等标本。2 .涂膜染色镜检查图色染色呈阳性球菌，双排列成矛尖状，平坦面相邻，前端向外。 标本中同时存在大量炎性细胞，具有重要的参考价值。3 .荚膜染色阳性。4、分离培养常采用羊血平板，有助于溶血特征的识别和进一步鉴定，且初代分离应在5%10%CO2的环境下培养。 在血小板中，肺炎链球菌的菌落直径为0.51.5mm，灰白色、半透明、表面平滑(也有看起来为粘液状的植株)扁平，周围包围着草绿色溶血环。 培养或放置24以上的培养物在肺炎链球菌自溶作用下菌落中央凹陷，边缘隆起，呈脐窝状。5、鉴定试验胆汁溶菌试验：本试验的原理是胆盐激活肺炎链球菌的自溶酶能溶解肺炎链球菌，而草绿色链球菌不能溶解。 常用的方法是高速平板法和标准试管法。 前者将接种环的2%脱氧胆酸钠溶液加入血液平板的检定对象菌落中，在35下孵育1530min，菌落溶解消失为阳性。 后者是在检定对象菌1824h的培养液1ml中加入2滴10%脱氧胆酸钠溶液，在35下孵育5-10min后，检定菌管由混浊变透明者为阳性。Optochin试验用于与其他草绿色链球菌鉴别。 用接种环将单一待检测菌落均匀涂抹在血液平板上，将含量为5g的optochin纸片贴在接种区中央，在35下需氧培养一夜，抗菌环为18mm阳性。 本菌阳性。6 .小鼠毒性试验用有毒力菌株接种小鼠，接种后12-36h小鼠死亡。四、细菌防治肺炎链球菌感染的关键是培养良好的卫生习惯，保持环境卫生。 必要时，给身体弱的儿童和老年人预防注射疫苗，预防用细菌荚膜多糖类制成的多糖类疫苗，效果很好。患者发烧期间，请卧床休息，吃容易消化的食物，多喝水。 磺胺类药物、青霉素等可有效治疗肺炎等疾病。五、细菌的生物安全防护根据病原微生物生物实验室生物安全管理条例有关规定，人感染的微生物名单(预定发布)有肺炎链球菌3种，属于BSL-2。 相关的保护事项包括：(1)操作要求1、实验的，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。2 .不得在工作场所饮食、吸烟、清洗隐形眼镜、化妆。 食物请保管在工作场所以外的专用柜和冰箱中。3、所有操作过程应尽量小心，避免气溶胶的产生和飞散。4 .对于受污染的尖锐器皿，要经常保持针、注射器、玻璃板、样品器皿等的高度警惕。注射并吸取感染材料时，只能用注射针固定注射器和一次性注射器(注射器和注射针成为一体)。 一次性注射针在弯曲、切断、撕碎、重新安装注射针套、从一次性注射器中拔出、扔掉之前必须进行人工处理。 为了不被刺伤，必须慎重地放入收集废弃锐器的容器中。 非一次性锐器必须放入坚固的墙壁容器中，移至处理区消毒，高压杀菌。6、打碎的器皿不得直接用手处理。 必须用刷子、簸箕、夹子、镊子等其他工具处理。 在污染针、尖器、碎玻璃容器掉落之前，必须按照有关规定进行消毒。7、所有培养物、贮藏物及其他规定的废弃物在释放前，必须采取可行的消毒方法进行消毒。 例如高压灭菌。 移动到附近的实验室消毒的材料耐久性，放入防漏容器，密封后从实验室运出。 离开该系统进行消毒的材料，搬迁前应包装，其包装必须符合有关法规。因泼溅或偶然事件，明显暴露于感染源的，应立即向实验室主任报告。 进行适当的医学评价、观察、治疗，留下书面记录。9 .按日常程序，有关感染源的工作完成后，尤其是感染源溢出或溢出后，或被其他感染源污染后，实验室设备和工作台应用有效消毒剂消毒。 受污染设备在送修、维修前，必须在离开必须按有关规定消毒的设施前，按有关规定包装运输。(2)安全设备1、希望有正确使用和维护生物安全柜的二级生物安全柜或其他适当的人员保护设施或物理控制装置。2 .确定可能形成感染性气溶胶或飞散物的实验过程。 包括离心、研磨、匀浆、剧烈振动和混合、超声破裂、打开装有感染源的容器、采集感染标本等。3、对于高浓度或大体积感染源，选择密封的旋转头或带安全盖的离心机只要旋转头或安全盖在生物安全柜中打开，就可以在开放实验室内进行离心。4 .必须在生物安全库外处理标本时，必须采取面部保护措施(镜子、面罩、面罩、其他防溅装置)，以免感染源和其他有害物质洒落。5、实验室应使用专用防护外套、短外衣、衬衫和制服。 人员到达非实验室区域时，防护服应留在实验室。 防护服可以