中药防治皮肤瘙痒症等的研究思路与方法

中药防治皮肤瘙痒症、脱发的药效研究思路与方法,浙江中医药大学姚 立,中药防治皮肤瘙痒症药效研究思路与方法,概 述 现代医药学研究 中医药研究 研究思路 研究方法,皮肤瘙痒症(Pruritus)是以瘙痒为主要症状，而无原发性皮疹的一种神经功能障碍性皮肤病。临床上将只有皮肤瘙痒而无原发性皮肤损害者称之为瘙痒症。瘙痒短的只有几分钟，长的可达数小时，常在夜间加重，这可能与引起瘙痒的各种介质每天分泌的节律有关。起初周身原无皮疹，由于反复搔抓，皮肤可见抓痕、血痂、色素沉着，亦可见湿疹样、苔藓样等改变。中医称本病为“诸痒”、“痒风”、“风痒”等。清代外科证治全书卷四痒风谓“遍身瘙痒，并无疮疥，搔之不止。”清代外科大成记载小儿“肛门作痒”云：“肛门作痒，虫也，视其下唇内，必生小白疮，或之前后，结小核如贯珠者是也。”这些记载均符合现代医学所称的皮肤瘙痒症 。,瘙痒症临床表现多样而不确定，全身性原发瘙痒者，全身各处皆有痒感，但并不全身同时发痒，往往由一处移到另一处。发痒程度亦不同，有人对皮肤发痒可以忍受，有的觉得全身奇痒，需用铁刷子刷皮肤或热水洗烫，直至皮肤出血而感觉疼痛及灼痛时，痒觉才暂时减轻。局限性瘙痒者，发生于身体的某一部位，有肛门瘙痒症、女阴瘙痒症、阴囊瘙痒症等。往往无原发性皮炎，由于搔抓可引起皮肤上出现抓痕、丘疹、血痂、色素沉着、湿疹样变及苔藓样变。阵发性剧烈瘙痒者，瘙痒发作常有定时的特点。此外，尚有烧灼、虫爬及蚁行等感觉。感情冲动、环境温度变化及衣服摩擦等刺激，都可引起瘙痒发作或加重。往往以晚间痒重，患者因发痒而失眠或不能安眠 。,瘙痒症的临床分型根据发生部位分为局限性皮肤瘙痒症和全身性皮肤瘙痒症；根据发病年龄可分为老年性皮肤瘙痒症和青壮年皮肤瘙痒症；根据发病季节性可分为冬季瘙痒症、夏季瘙痒症；继发于全身病症如内分泌失调、糖尿病、肝胆疾病及妊娠等的称之为症状性皮肤瘙痒症。局限性瘙痒症有肛门瘙痒症、女阴瘙痒症、阴囊瘙痒及下肢瘙痒症等。此外，接触水后瘙痒突然严重而无皮疹者称为水源性瘙痒。,中医对皮肤瘙痒症的研究，以临床疗效观察为主，包括辨证论治的研究，成方、验方的疗效总结，中西医结合方法的研究等，关于本病的病因和发病机理研究，进展甚少。瘙痒症的临床表现比较单纯，诊断亦较容易，关键是查明病因，无论是中医学抑或是现代医学，一致认为本病病因是多方面的，包括全身性、局部性、内源性、外源性等等。因此，对于瘙痒症患者，首先必须寻找引起瘙痒的原因，针对原因，标本兼顾，有的放矢地进行治疗。 Back,现代医药学研究,病因、病机 药物治疗,感染病原微生物：见于儿童的肛门瘙痒以蛲虫病患者居多，雌性蛲虫蠕出肛门排卵，形成机械刺激引起肛门瘙痒。感染念珠菌、阴虱、滴虫可引外阴炎症，导致外阴瘙痒。 肛门及直肠疾病：局部炎症充血使皮肤循环增加，温度上升，臀间又是不易散热的部位，促使汗液排泄增多，湿润浸渍，引起不适和瘙痒。初发病患者常以热水烫洗或较长时间外用含有皮质类固醇激素等药涂敷，虽可一时缓解瘙痒症，日久可形成瘙痒不良刺激更瘙痒的恶性循环，使局部症状更形增剧。嗜食辛辣食品也可引起肛门瘙痒，卫生习惯不良，不及时清洗肛门会阴，隔裤搔抓摩擦，可使瘙痒加剧。着装不良，穿着窄小的衣裤，或穿质地不适的内裤如某些化纤织物或厚实而粗糙者，使臀围汗液不易散发及摩擦也可诱发肛门瘙痒。,环境因素：季节、气温、湿度和工作环境、生活习惯(使用碱性强的肥皂、穿着毛衣或化纤织物、常用过热的水洗澡)等往往也是引起全身瘙痒症的原因。局部湿热、内衣衬裤刺激也可导致皮肤瘙痒症，如阴囊瘙痒等。 作为全身性疾病的伴发症状：皮肤瘙痒症常伴发于许多全身性疾病，能引起本病的全身性疾病有：尿毒症、阻塞性肝胆疾病、血液病、淋巴网状系统疾病、恶性肿瘤、内分泌疾病、神经系统疾病、感染性疾病、风湿性疾病、神经精神性瘙痒 。,瘙痒症的发病机理研究较少。目前认为，瘙痒是通过细小的神经纤维，尤其是无髓鞘神经（如C神经纤维）所传递。瘙痒中枢在大脑中的部位尚不清楚。已知在体内有许多化学物质介导瘙痒，包括：1.二十烷类(eicosanoids)：前列腺素E2、前列腺素H2；2.胺类：组胺、5羟色胺；3.神经肽类：P物质；4.类阿片类：Met脑啡肽，Leu脑啡肽，内啡肽；5.细胞因子类：白介素2等。 Back,全身治疗 抗组胺及镇静药物：常用的药物有扑尔敏，苯海拉明，赛庚啶，西咪替丁，雷尼替丁，安定，氯丙嗪，阿米替林，息斯敏，特非那丁等。老年性皮肤瘙痒症的治疗：口服维生素A，或口服维生素E，男性无前列腺肥大者可用丙酸睾丸酮或甲基睾丸酮治疗。女性患者可服用乙烯雌酚或黄体酮。静脉封闭疗法：盐酸普鲁卡因加维生素C或葡萄糖酸钙注射液加维生素C。皮质类固醇激素：口服强的松片，该法当在其它疗法无法控制瘙痒的情况下使用。 对外阴瘙痒可以异丙嗪注射液加生理盐水作穴位封闭。,局部治疗 以镇静止痒防治皮肤继发改变为原则，可选用1-2石炭酸、1-2薄荷油、5-10苯唑卡因、2-3水杨酸、0.025肤轻松乳剂等。泛发性者用石炭酸和皮质激素类药物。 Back,祖国医学对皮肤瘙痒症有丰富的文字记载和治疗经验。早在在周礼中就有“痒疥疾”的记载，这是泛指瘙痒性皮肤病。关于皮肤瘙痒症的病因，唐代孙思邈在千金要方中认为：“痒症不一，血虚皮肤燥痒者宜四物汤加防风；妇人血虚，或通身痒，或头面痒，如虫行皮中，缘月水来时风所吹，不然则是产蓐中食动风物致之；有脾虚身虚，本无疥癣，素作产蓐，洁然一身，痒不可忍，此乃脾虚所困。”外科大成诸痒阐述：“诸疮痛痒，皆属于火”；“风盛则痒，盖为风者，火之标也，凡风热客于皮肤，作痒起粟者，治宜疏风，如换肌丸、苦参丸等；若风热内淫，血虚作痒者，又当凉血润燥，如逍遥散、柴胡汤之类也。”医宗金鉴外科心法肛门作痒中指出“小儿肛门作痒，由虫蚀也。”外科心法要诀指出：“痒属风，亦各有因。”这说明中国古代医家对瘙痒症已有一定见解，皮肤瘙痒症可因风热、风寒或湿热之邪蕴于肌肤，不得疏泄所引起，亦可因风邪久留体内，化火生燥，以致津血枯涩，肌肤失养所致。,病因、病机 中药治疗,中医药研究,情志所伤 喜、怒、忧、思、悲、恐、惊七情的变化，超过了人体心理活动的承受能力，就会伤及五脏，使五脏的功能失调，而诱发皮肤瘙痒症。黄帝内经记载，“诸痛痒疮，皆属于心”，把痛和痒并列，说明古人已认识到痛觉和痒觉有密切的关系，可见古代医家已意识到痒与心有关，心主血脉，心主神明，心包括了部分循环系统与神经系统的功能。事实上，神经系统功能失调与痒关系密切。因此，七情变化主要是思想情绪过激所引起的，该因素在皮肤瘙痒症的发生过程中起了一定的作用。,脏腑机能失调 心火炽盛，血热生风，复感风邪，可致瘙痒，多发于夏令时节；肝肾不足，血虚肝旺，血不养肤，导致瘙痒；脾虚生湿，蕴久化热，外受风邪，亦可致病；肺气虚弱，卫表不固，易受风邪，可致瘙痒。清许克昌等外科证治全书记载，“痒风，遍身瘙痒，并无疮疥，搔之不止，肝家血虚，燥热生风，不可妄投风药”，提到瘙痒与血虚、燥热有关。,六淫致病 皮肤瘙痒可因风、燥、湿、热等所引起。清外科大成记载，“风盛则痒。盖为风者，火之标也，凡风热客于皮肤、作痒起粟者，治宜疏风”，更提到火邪、风邪引起皮肤瘙痒。张山雷疡科纲要记载，“外疡发痒，其最普遍者，皮肤病为独多，如血风疮等。而溯其原因，则不外乎风燥与湿热二者而已”，提出了风、燥、湿、热等病因。属于风盛者常表现为走窜无定，遍身剧痒，属于湿盛者则抓后流津淋漓，糜烂结痂；属于热盛者，抓后继发丘疹、红斑。,虫毒 对于肛门瘙痒症的病因，外科大成认为，“肛门作痒，虫也”。医宗金鉴记载，“此证系小儿肛门作痒，由虫蚀也”。这些记载都指出了一部分肛门瘙痒症与寄生虫(蛲虫)有关。属于虫引起者则痒较剧烈，痒如虫行皮中。,总之，皮肤瘙痒症开始时可因风邪、湿邪、热邪所引起，日久则耗血生火而出现血燥、血虚的症状，继发性皮疹也相继产生。 Back,单味中药 中药复方,苦参 苦参能清热燥湿，祛风杀虫，现代药理研究证实，苦参碱具抑菌、抗炎、抗过敏的作用。将苦参注射液与维生素B12注射液混合肌注，对皮肤瘙痒症有较好疗效。黄芩 黄芩有清热燥湿，泻火解毒之功效，其对多种病原微生物有明显的抑制作用，抑菌成分为黄芩素及黄芩甙。此外，黄芩还能抑制花生四烯酸代谢及抗组织胺的释放，具有一定的抗炎、抗过敏作用。,麻黄 麻黄具有发汗散寒，宣肺平喘，利水消肿的功效，其水煎剂及挥发油有体外抗菌作用，其总碱有抗炎、抗过敏作用。蛇床子 蛇床子有较明确的抗滴虫作用，外用有较好的止痒效果。地锦草 又名血见愁，该药清热活血，止血养血，其水煎液内服及外搽皆有良好的止痒效果，用于治疗老年性皮肤瘙痒症较为合适。其作用机理有待进一步研究。 Back,退疹止痒胶囊 退疹止痒胶囊（黄芩、紫草、白鲜皮等）对组织胺所致豚鼠瘙痒反应、组织胺所致大鼠皮肤毛细血管通透性增高、对豚鼠正常肠管及乙酰胆碱与5-羟色胺所致肠管痉挛均有抑制作用，并对大鼠蛋清足肿胀、醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通诱性增高、酵母所致大鼠发热与SRBC所致小鼠迟发超敏反应均有抑制作用。,复方苦参洗液 复方苦参洗液（苦参、黄芩、黄连等）治疗急性湿疹、亚急性湿疹、慢性湿疹与遗传过敏性皮炎共60例，根据皮损面积和自觉瘙痒程度判定疗效确切，与派瑞松霜外搽(45例)比较无明显差异。治疗前后作金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌培养，由58例阳性转为36例。,瘙痒灵香露 瘙痒灵香露（黄柏、苦参、地肤子等）治疗瘙痒症中湿热证总有效率为90.5%，显效及临床痊愈率为92.4%，风热证有效率94.7%，显效及临床痊愈率为73.8%。体外抗菌实验表明，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有较强的抑菌、杀菌作用。,消风止痒颗粒剂 消风止痒颗粒剂（荆芥、防风、蝉蜕等）可明显抑制右旋糖酐、组胺所致的小鼠、豚鼠皮肤瘙痒，对大鼠同种被动皮肤过敏反应及大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒反应有抑制作用，可抑制组胺、5-羟色胺所致大鼠毛细血管通透性增加。,仙方玉容膏 仙方玉容膏（芦荟、黄芪等）对二甲苯所致耳廓肿胀有抑制作用，也可抑制组胺所致大鼠毛细血管通透性增加，并能提高组胺对豚鼠的致痒阈。,麻黄连翘赤小豆汤 麻黄连翘赤小豆汤（麻黄、连翘、赤小豆等）对组胺诱导的豚鼠局部皮肤瘙痒及右旋糖酐诱导的全身瘙痒模型有显著的抑制作用。,清燥救肺汤 清燥救肺汤（桑叶、胡麻仁、杏仁、炙枇杷叶、生石膏、党参、阿胶、麦冬、甘草）出自医门法律伤燥门，有清燥润肺的功效。原本在临床上用于治疗因燥邪伤肺，气阴两伤的肺系疾病。黄虹用该方治疗皮肤瘙痒症亦能奏效。诸药配伍，养阴宣燥，使肺主皮毛的功能得以正常发挥，肌肤得到濡养，可缓解或消除皮肤瘙痒。,桂枝汤桂枝汤（桂枝、芍药、炙甘草、生姜、大枣）出自伤寒论，主要功效是解肌发表，调和营卫。先贤认为“营行脉中，卫行脉外”，“营气通于心”，“心布于表”，“所以任物者谓之心”，营卫皆行于经脉内外，作为传递感觉信息的载体，内至脏腑，外达皮毛。营卫虚衰不和，可致皮肤感觉异常。桂枝汤可滋阴和阳，调和营卫，外邪不易侵犯，可有效地治疗皮肤瘙痒症。年老正虚患者可加入黄芪，风寒较著者可加入荆芥、防风以加强祛风散寒之力，瘙痒较顽固者可加入蝉蜕、川芎、蜈蚣等品，意在祛风通络。,桂枝麻黄各半汤 桂枝麻黄各半汤（麻黄、桂枝、白芍、杏仁、生姜、炙甘草、大枣）出自伤寒论，主治太阳病日久不解，邪郁肌表，卫失宣畅，营阴郁滞所致的瘙痒症。该方旨在发汗散邪，调和营卫。麻黄开腠发汗，通达阳气，桂枝宣畅卫气，二药相伍可增加开腠祛邪之力；生姜辛开肺气，杏仁苦降肺气，助麻黄桂枝祛邪之功；白芍滋阴和营，增加桂枝调和之功；大枣、炙甘草益气养营，发汗而不伤正。 Back,皮肤瘙痒症是以瘙痒为主要症状，而无原发性皮疹的一种神经功能障碍性皮肤病。其发病往往与感染病原微生物、全身性疾病的伴发症状及环境因素有关。药效学研究思路可以从以下几方面入手：,抗菌作用,治疗皮肤瘙痒症中药，应该观察其抗菌作用。瘙痒灵香露(黄柏、苦参、地肤子、独活、细辛、樟脑等组成)对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有较强的抑菌、杀菌作用。复方苦参洗液(苦参、蛇床子、百部、冰片、黄柏等组成)对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、乙型溶血性链球菌、淋球菌、加德纳杆菌均有较好抑菌作用。,抑制炎症反应,仙方玉容膏（芦荟、黄芪等10余种中草药）有清热、解毒、止痒等功效，可抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀。具消炎止痒作用的玉清安液（以蛇床子为主药）对大鼠足跖肿胀性炎症有抑制作用。复方苦参洗液亦能抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀，用于治疗外阴瘙痒的龙凤洁身纯洗液（苦参、蛇床子、大青叶等）对巴豆油致小鼠耳廓炎症及大鼠角叉菜胶性足跖肿胀有明显抑制作用。消风止痒颗粒剂(荆芥、防风、蝉蜕、牛蒡子等组成)治疗瘙痒性皮肤病疗效显著。实验证实该制剂对二甲亚砜和桂皮酸所致的豚鼠耳廓肿胀及二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀均有明显的抑制作用。,降低毛细血管通透性,仙方玉容膏(芦荟、黄芪等10余味组成)对大鼠皮内注射磷酸组胺所致的毛细血管通透性增加有抑制作用。消风止痒颗粒剂(荆芥、防风、蝉蜕、牛蒡子等10余味组成)对大鼠由组织胺、5-羟色胺引起的血管通透性增加有抑制作用。治疗外阴瘙痒的龙凤洁身纯洗液对小鼠皮肤毛细血管通透性增加也有抑制作用。,止痒（抗组织胺）作用,麻黄连翘赤小豆汤(伤寒论)具有解热散邪止痒的功效，近来用于治疗皮肤瘙痒症,实验显示，原方、加减方及主要药物麻黄的有效成分麻黄碱均对用组织胺诱导的豚鼠皮肤局部瘙痒有显著的抑制作用，对用右旋糖酐诱导的小鼠全身性瘙痒也有明显的止痒效果。消风止痒颗粒剂（荆芥、防风、蝉蜕、牛蒡子等10余味药组成）对右旋糖酐所致小鼠皮肤瘙痒和组织胺所致豚鼠皮肤瘙痒均有明显抑制作用。仙方玉容膏能有效提高豚鼠对组织胺致痒阈。,镇静作用,西医治疗皮肤瘙痒症常用镇静药。中药治疗皮肤瘙痒症是否也与镇静作用有关，这方面的研究较少，今后可以增加研究，以更全面地阐述中药治疗皮肤瘙痒症的机理。,免疫调节作用,治疗外阴炎、阴道炎瘙痒的复方苦参洗液（苦参、蛇床子、百部、冰片、黄柏等药组成），可增强小鼠对植物血凝素刺激淋巴细胞的转化反应，提示有提高细胞免疫作用。迷尔永康膏（黄连、蛇床子、生百部、紫花地丁、川椒等药组成）临床上治疗阴道炎瘙痒疗效显著，实验证实该药可促进小鼠血清溶血素生成。,抗过敏,消风止痒颗粒剂对大鼠同种被动皮肤过敏反应有明显抑制作用。 Back,实验动物的选择,用于皮肤瘙痒症研究的动物以豚鼠、大鼠、小鼠为常见，主要用于研究抗炎、抗过敏、止痒及对毛细血管通透性的影响等作用，其他动物如家兔，用于研究药物对阴道粘膜的影响。,抗炎实验 止痒实验 抗过敏实验 抗菌实验 免疫调节实验 镇静实验,小鼠耳廓肿胀实验 大鼠足肿胀实验 毛细血管通透性实验 豚鼠耳肿胀实验,原理：用二甲苯致炎，通过比较小鼠耳廓肿胀度来评价药物对炎症的抑制作用。方法：一般在末次给药1h后，给小鼠右耳涂二甲苯0.05ml/只，左耳作对照。15分钟后处死小鼠并用直径9mm的打孔器将双耳相同部位相同面积切下称重。以左右耳重量之差作为肿胀度，比较组间差异。也可在末次给药后1h，由小鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰生理盐水0.1ml/10g，然后向右耳廓滴二甲苯0.03ml，40分钟后将小鼠处死，用打孔器切下双耳相同部位相同面积组织称重，计算肿胀抑制率。将耳片剪碎，在7：3丙酮生理盐水中浸泡48h，以300rpm离心15分钟，用分光光度计在600nm处测上清液光密度。 Back,原理：用蛋白致炎，通过比较大鼠足跖的肿胀度对药物的抗炎作用进行评价。方法：实验前用毛细管放大测量法测定各组大鼠右后足的体积作为标准，实验当日于用药后1h，各组大鼠右后足跖皮下注射25%新鲜蛋清0.05ml/只，同时再给药1次，然后测定致炎后不同时间段的右后足体积，以致炎前后体积的差值作为肿胀度。 Back,原理：本实验对大鼠和小鼠均适用。通过观察染色面积和染色组织的光密度来比较药物对毛细血管通透性的影响。方法：末次给药后0.51h，将伊文思兰生理盐水（大鼠：0.1% 0.5ml/100g，小鼠：0.5% 0.2ml/10g）尾静脉注射至动物体内，1530分钟将动物处死，放血，剥开皮肤用尺子测量染色面积，然后将染色皮肤剪碎，放入7：3丙酮生理盐水浸泡48h，离心后取上清夜用分光光度计在600nm处测光密度。比较各组动物染色皮肤面积的大小和染色组织的光密度。也可先皮下注射磷酸组织胺或5-羟色胺导致毛细血管通透性增高，然后再进行上述实验。 Back,原理：通过观察耳廓厚度来比较肿胀度。方法：实验前先用游标卡尺测量豚鼠耳廓4个点的厚度，取平均值作为标准，然后在末次给药后30分钟，用50l无水乙醇配制的80%二甲亚砜（DMSO）涂抹豚鼠耳廓两面，之后，于不同时间段重复测量耳廓4个点的厚度，求出平均值，与实验前所得平均值的差值即为耳廓肿胀值。也可用无水乙醇配制的5%桂皮酸（CA）作为致炎剂。 Back,组织胺致痒反应 右旋糖酐致痒实验 4-氨基吡啶致痒实验 耳廓瘙痒实验,原理：本实验用豚鼠较为适宜，为局部瘙痒实验。组织胺参与了瘙痒的发展过程，用外源性组织胺可致痒，以致痒阈来反映药物的止痒作用。 方法：实验时先将豚鼠右后足背剃毛，然后给药。实验当日，用粗砂纸擦伤右后足背剃毛处，使之发红，但以不出血为度，面积1cm2，再给药1次，然后开始在创面滴0.01%磷酸组织胺液0.05ml/只，以后每隔3分钟依0.02%、0.03%、0.04%递增浓度，每次均为0.05ml/只，直至出现豚鼠回头舔右后足，以最后出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组织胺总量为致痒阈，比较各组的致痒阈。 Back,原理：本实验适用于小鼠。利用右旋糖酐诱导释放内源性组织胺，制成瘙痒动物模型，进行全身瘙痒实验。方法：末次给药后30分钟，向小鼠尾静脉注射0.025%右旋糖酐0.05ml/10g（1.25mg/kg），以小鼠前爪搔抓头部，后爪搔躯干，嘴咬全身各部位作为瘙痒指征，记录单位时间内小鼠瘙痒次数及每次瘙痒持续时间。以此评价药物的止痒作用。 Back,原理：本实验选用动物为小鼠。4-氨基吡啶可诱导皮肤肥大细胞释放组织胺，引起瘙痒。方法：用药前一天背部脱毛，于末次给药3040分钟后在脱毛处皮下注射4-氨基吡啶1mg/kg，记录各组动物在单位时间内出现的舔体反应次数。 Back,原理：本实验可选用大鼠进行。用2.4-二异氰酸甲苯酯局部致敏，引起瘙痒。方法：在动物末次给药30分钟后，给耳廓涂抹致敏物1%2.4-二异氰酸甲苯酯（石蜡油作溶媒）50l，从涂抹完致敏物开始计时，至大鼠开始出现抓蹭耳廓为致痒潜伏期，以从出现抓蹭耳廓至抓蹭耳廓停止为瘙痒持续时间，记录各组时间进行统计处理。 Back,同种被动皮肤过敏实验,原理：将含有致敏动物IgE类抗体的血清注射到正常动物皮内，使肥大细胞致敏，然后用抗原进行攻击，引起肥大细胞脱颗粒，释放组织胺等介质，引起瘙痒反应。方法：实验选用大鼠，先取数只大鼠，肌肉注射卵蛋白25mg/kg，同时腹腔注射免疫佐剂百白破疫苗21010个/只，12天后眶内采血，制备大鼠抗卵蛋白血清，置于-20保存备用。在实验时，先在大鼠背中线两侧分别皮下注射1：10，1：20生理盐水稀释的抗卵蛋白血清0.1ml，48小时后开始给药，48小时后静脉注射1%卵蛋白和0.5%伊文思兰溶液各0.5ml进行抗原攻击。30分钟后将大鼠处死，剪下背部皮肤蓝斑并剪碎放入3ml3：7生理盐水丙酮液中浸泡24小时，取上清液，用分光光度计在610nm处测吸光度。,2，4-二硝基氯苯（DNCB）致迟发型超敏反应实验,原理：DNCB 是一种半抗原，可刺激T淋巴细胞增殖成致敏淋巴细胞，数天后进行抗原攻击，造成迟发型超敏反应。方法：本实验选用小鼠。实验前先用5%2，4-二硝基氯苯（DNCB）丙酮液0.1ml背部皮下注射致敏，次日再致敏1次，第3天开始给药，在末次给药后，用1%DNCB丙酮液0.02ml涂右耳，20小时后处死小鼠，用打孔器取下相同直径的左右耳片，称重，以两耳片重量差为肿胀度作为迟发型超敏反应指标。 Back,原理：通过观察细菌的生长情况来判断药物的抗菌作用。方法：可选用与瘙痒有关的菌株进行体外抗菌试验。实验时每个菌种采用10株，每株取灭菌小试管7支，用相应液体培养基稀释受试药物，使其最终浓度分别为每ml含药量呈一定比例递减，每管1ml，再加入0.1ml经稀释的新鲜菌液，置37培养箱内培养18小时后观察菌株生长情况，以细菌不生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度（MIC）。根据每个菌种10个菌株的MIC，用回归方程求得MIC50、MIC90。 Back,细胞免疫功能实验,原理：通过测定淋巴细胞的转化能力评价细胞免疫功能。方法：实验选用小鼠，每鼠每天肌肉注射植物血凝素10mg/kg，连续3天，所试药物用适当剂量每日皮下注射，末次给药后取血，推片，瑞氏染色，油镜下计数200个淋巴细胞、淋巴母细胞、过渡型细胞，分别计算它们所占百分比。此实验可用来反映淋巴细胞的转化能力。 Back,镇静实验,睡眠时间的测定：包括延长戊巴比妥钠睡眠时间的试验和对戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响。活动次数的测定：以镇静试验方法观察药物对动物自发活动的影响。,客观指标,二十烷类：前列腺素E2、前列腺素H2；胺类：组胺、5羟色胺；神经肽类：P物质；类阿片类：Met脑啡肽，Leu脑啡肽，内啡肽；细胞因子类：白介素2等。,中药防治脱发药效研究思路与方法,概 述 现代医药学研究 中医药研究 研究思路 研究方法,脱发（Alopecia）是一种常见疾患，属于中医“油风”、“蛀发癣”的范畴，主要有斑秃，早秃，脂溢性脱发等类型。,斑秃（AlopeciaAreata），亦称圆形脱发，系局限性斑状脱发，发生突然，过程徐缓。按病期可分为进展期、静止期及恢复期。进展期：首先在头部出现圆形或椭圆形的脱发斑，然后逐渐增大，边缘处头发松动，易于拔下。由于无任何自觉症状，因此常在无意中发觉或由他人发现。脱发区头皮正常，无炎性症状，无鳞屑，无瘢痕。脱发斑边界清楚，多数发展至钱币状或稍大些就不再扩大。静止期：脱发边缘的头发不再松动，大多数患者在脱发静止3-4个月后，进入恢复期。恢复期：新毛发长出，最初出现柔软色浅的绒毛，继之长出黑色的终毛，并逐渐恢复正常，疾病自然痊愈。多数斑秃患者病程数月，少数患者脱发持续进行，病程可持续数年。斑秃中约有510%的病例成为全秃（AlopeciaTotalis）。若头发、眉毛、睫毛、胡须、腋毛、阴毛、毳毛等所有毛发均脱落，则称为普秃（AlopeciaUniversalis）。斑秃绝大多数可以自愈，少数病程可持续，尤其是全秃及普秃患者。发生全秃及普秃的年龄越小，恢复的可能性也随之减少。,早秃（AlopeciaPremature），又名男性型秃发（MalePattern Alopecia），好发于男性青壮年，多见于脑力劳动者。脱发往往先从前额两侧的鬓角部开始，发展缓慢，脱发区有微痒感，头发逐渐细软、稀疏、脱落，秃发渐向内延伸，数年至数十年后，额上部和顶部的头发可完全脱光。皮肤光滑、毛孔缩小或遗留少量毳毛，而枕部及两侧颞部仍保留正常的头发。也有从头顶部开始脱发。男性型秃发偶见于成年女性，表现为头顶部头发稀疏，但前额部的发际线并不后移。本症属于常染色体显性遗传病，其遗传特性需在雄激素作用下才表现出来。,脂溢性脱发（AlopeciaSeborrhoeica）多见于青壮年男性，头皮往往油腻发亮或有大量头屑，呈灰白色糠秕状，头发干燥缺乏光泽，自觉瘙痒，经过一段时间，前额两侧及头顶部头发开始对称脱落，疏稀变细，患部由于毛囊萎缩，常致永久性脱发。,脱发的确切发病原因和发病机理至今尚无定论，应是多因素综合作用的结果。既有遗传、免疫调节的因素，也包括体内激素、细胞因子等因素及精神心理因素的影响。针对多因素致病的脱发，中医药可有效发挥整体观的优势，利用作用的多靶点、多途径，已经取得了较好的临床效果。但实验研究开展得较少，今后应当从激素、细胞因子、免疫学等多方面对中医药的作用机理进行研究。 Back,病因、病机药物治疗,斑秃,遗传学因素 免疫学因素 情绪精神因素,约10%20%的病例有家族史。美国统计儿童斑秃患者中18%有湿疹或哮喘；成人斑秃患者约占9%；儿童全秃患者占23%。日本统计斑秃患者有遗传过敏体质者占10%。荷兰则高达52.4%。国内文献报道，1210例原发性斑秃患者中有家族史者75例，占6.2%，其家族中共有患者163例,患病率为14.91%。家族患者之间亲缘关系分属于:级亲属142例(87.12%),级17例,级4例。患者发病在同一个世代者33户,70例;发于两世代40户,87例。表明遗传因素在斑秃的发病中起了一定的作用，且血缘关系近者患病机会增多。国外学者对143个核心家系中进行传递不平衡检验（TDT），结果显示等位基因HLA-DQB和等位基因HLA-DR之间有关联。认为斑秃受HLA-类基因限制，是针对毛囊的器官特异性的免疫应答。斑秃患者HLA-DR4或DR5出现的频率显著升高3。应用分子生物学方法对患者HLA-类抗原基因进行扫描，发现DR4和DQ7两个抗原出现的频率只在全秃或普秃患者群体中显著性升高。这表明可以通过遗传学的疾病易感性来区分斑秃的类型 Back,斑秃是T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。研究表明，毛发的脱落需要CD8+和CD4+T细胞的参与。斑秃可由T淋巴细胞的转移诱导产生，而这些T淋巴细胞能识别毛囊自身抗原。浸润T淋巴细胞的表型和定位不仅参与了斑秃的脱发过程，而且参与了毛发的再生过程。CD8+T细胞通过作用于MHC-限制的自身抗原并裂解其靶细胞而在斑秃的形成中扮演重要角色，而细胞因子则干扰毛发的生长周期，提前抑制毛发生长，导致脱发。临床观察发现，斑秃患者外周血可溶性肿瘤坏死因子型受体(sTNF-RI)水平高于正常人，提示sTNF-RI可能参与斑秃的发病。郎格罕细胞(LC)能够提呈抗原，参加免疫反应。有人用类OKT6、抗HLA-DR单克隆抗体及抗S100蛋白抗体以ABC法染色，观察表皮和毛囊内的LC，发现斑秃患者毛囊中LC变化主要是T6+DR-的LC增多，而T6+DR+的LC增多明显低于前者，提示毛球中的LC与斑秃发病及病情活动程度有一定关系。 Back,国内学者调查1055例原发性斑秃患者，发现个人因素、家庭因素和工作因素是诱发斑秃的三大主要因素。个人因素中以参加学习考核者居多，包括在校学生、在职参加各种专业培训等；家庭因素以生活纠纷者居多；工作因素以常处于高度紧张而又十分辛勤的工作状态之中者占绝大多数。有人研究斑秃患者个性和心理社会因素与发病的关系发现，内倾个性者发生斑秃是无内倾个性者的4倍，不稳定型个性者发生斑秃的机遇是稳定型个性者的3倍，有心理社会因素者发生斑秃的机遇是无心理社会因素者的3.33倍。说明个性和心理社会因素是斑秃重要的致病因素 。,早秃（男性型秃发）,心理因素 雄激素因素 遗传因素 头皮皮下血流（SBF）,国内学者测定209例男性型秃发患者的心理状态，发现患者均处于严重的抑郁和焦虑之中，表现为易倦、失眠、易怒、焦虑等症状。女性患者在心理失衡方面比男性更严重。心理状态的不正常与男性型秃发的发生互为因果，二者形成恶性循环。 Back,雄激素可抑制头发生长。将生长期毛囊的毛乳头细胞和毛根鞘成纤维细胞放入含有睾酮（T）或二氢睾酮（DHT）的基质中传代培养，发现两种细胞的生长受到抑制。5-还原酶和芳香酶在雄激素代谢中起重要作用，5-还原酶能使头皮局部的DHT浓度升高，使毛囊逐渐萎缩，最终导致秃发。存在于头皮毛囊外毛根鞘中的芳香酶，对男性型秃发的发生发展有抑制作用，其作用机理仍未明确。雄激素必须与相应的受体结合才能发挥作用。研究表明，秃发区头皮的雄激素结合容量或雄激素受体水平比同一患者正常生发区高。皮脂腺对雄激素有较高的亲和力是男性型秃发的发病机制之一 。 Back,研究男性型秃发的相关因素，发现在遗传、睡眠质量、睡眠时间、吸烟、皮脂、胡须等因素中，以遗传因素的OR值最大，有阳性家族史为59/98，对照组仅6/99，这证实了遗传因素在男性型秃发中所起的作用。 Back,经133Xe灌洗法测量，发现早期男性型秃发患者的SBF值仅为正常人的38.5%，而应用具有扩张血管作用的药物治疗能获得实质性疗效，因此推测局部SBF下降在男性型秃发的发生中起了一定的作用。,脂溢性脱发,脂溢性脱发的病因和发病机制尚未完全清楚，一般认为与雄性激素有关。有研究显示：脂溢性脱发患者秃发区雄激素受体(AR)表达明显高于正常人,但与家族史无关,约35%脂溢性脱发患者脱发区头皮组织无AR阳性表达。脂溢性脱发患者血清中Fe元素及SOD含量比正常人明显减少。100%脂溢性脱发患者与两个以上相关因素有关。因此认为脂溢性脱发是一种多因素的疾病。Back,斑秃,可用镇静类药物、抗组织胺类药物缓解病人精神神经症状，精神抑制的患者可将兴奋剂与镇静剂交替使用。可选用的药物有：维生素B6、B12、咖啡因、非那根、甲状腺素、胱胺酸等。病情严重者可选用可的松类激素，如强的松。免疫促进剂如转移因子、左旋咪唑等也可应用。外用药局部适当应用也能起到较好的疗效，如0.01-0.1%的二硝基氯苯（DNCB）膏剂、0.1%升汞酊剂、10%辣椒酊剂等。对于顽固的脱发可用氟美松加普罗卡因进行局部皮下封闭治疗。,早秃（男性型秃发）,男性型秃发有效的疗法有抗雄激素治疗。可选用的药物有雄激素受体竞争抑制剂，如氯甲地孕酮、安体舒通、甲腈咪胍等。5-还原酶抑制剂，如孕激素、雌激素、非那雄胺等。也可使用扩张血管药物，如米诺地尔。外用药有2-4%的黄体酮酊、1%的敏乐定霜剂。,脂溢性脱发,可口服维生素B6、B12、胱胺酸等进行治疗。也可用抗雄激素疗法。外用可选硫磺软皂、含硫代硫酸钠的头粉等洗涤头发，外搽氯柳酊、升汞酊等制剂。 Back,病因、病机,诸病源候论鬼舐头候记载：“人有风邪在头，有偏虚处，则发秃落，肌肉枯死。或如钱大，或如指大，发不生，亦不痒，故谓之鬼舐头。”外科正宗油风曰：“油风，乃血虚不能随气荣养肌肤，故毛发根枯，脱落成片，皮肤光亮，痒如虫行，此皆风热乘虚攻注而然。”外科证治全书认为：“油风，由血燥有风所致。夫发为血余，肾主发，脾主血，发落宜补脾肾，故妇人产后，脾肾大虚多患之。”“蛀发癣，头上渐生秃斑，久则运开，干枯作痒，由阴虚热盛，剃头时风邪袭于孔腠，搏聚不散，血气不潮而成。”医宗金鉴外科心法要诀曰：“油风，由毛孔开张，邪风乘虚袭入，以致风盛燥血，不能荣养毛发。”,中医认为脱发的病因病机在于血气虚衰，肾气不足，又受风邪所致。肝藏血，发为血之余，肾主骨生髓，其荣在发，血气盛则肾气强，肾气强骨髓充满，毛发黑而有光泽，血气虚则肾气弱，气血不能上行荣养毛发，发则枯黄无泽而脱落。同时，人受七情内伤，情志抑郁，劳心伤脾，影响气血运行不畅而导致气滞血瘀，毛发失去营养而脱落，这与现代医学研究的机体内分泌与免疫功能失调，精神创伤与过度紧张，血管及血液循环障碍等因素，导致毛囊营养障碍而脱发的观点一致。斑秃多因肝肾虚亏，阴血不足，腠理不固，风邪则乘虚而入，风盛血燥，发失所养而成。也与情志不遂，气血失和有关。脂溢性脱发多由气血虚弱，湿热内蕴，或外感风邪，化燥伤阴，肌肤、毛发失养所致。,中药药效 现代中医治疗脱发，既重视整体观点，采用培补肝肾、益气养血、活血化瘀等治法与治则；又重视局部搽药等综合治疗，因而取得了显著疗效。,单味中药 中药复方,女贞子：用小鼠触须毛囊体外培养法，观察55种单味中药水煎剂或其单体对培养毛囊形态学和生长速度以及毛囊对3H-TdR的掺入率，发现女贞子、黄芪、白芷、白芨、荆芥、蒺藜、甘草酸对小鼠触须毛囊有明显的促生长作用。女贞子主要成分齐敦果酸的促毛囊生长呈浓度依赖性。银杏叶：银杏叶70