细菌耐药性监测

细菌耐药监测，中国医院感染网南、耐药菌问题日益严重，“目前，药物失去作用的速度与科学家发现新药物的速度基本相同”。 据世卫组织报道，从抗微生物治疗面临的困境出发，抗药性问题始终是细菌获得新的抗药机制，未见传统的抗药效果，70多年前青霉素的诞生宣布了抗生素时代的开始。 此后，在各种抗生素的选择性应激下，细菌形成了不同的抗药机制，逃避了抗生素的攻击。 链球菌葡萄球菌GNBMRS，VRE，ESBL，AmpC，TB，念珠菌，全世界的多药耐药细菌的出现， MRS是对苯并重氮唑啉具有耐药性万古霉素敏感性降低的PRP耐药青霉素和多药耐药肺炎链球菌VRE耐药万古霉素肠球菌ESBL中产生超广谱-Lac酶的KPN和产生ECOTypeI的TypeI(AmpC )酶的阴沟， 产气剂肠杆菌和氟西汀柠檬酸杆菌等拟多药耐性绿、嗜麦芽和不动杆菌，2004年10月9日，抗菌药物临床应用指导原则日2008年4月，卫生部办公厅关于进一步加强抗菌药物临床应用管理的通知一.加强围手术期抗菌药物预防应用的管理.加强氟喹诺酮类临床应用的管理.按照抗菌药物等级管理制度的规定， 加强抗菌药物临床应用管理四、加强抗菌药物临床应用指导和监督管理， 2008年6月卫生部办公厅关于重视和加强多重耐药菌的医院感染管理的通知一.加强多药耐药菌医院感染管理二.建立和改善多药耐药菌监测三.预防和控制多药耐药菌传播四.加强抗菌药物合理应用五.加强对医务人员的教育和培训六.加强对医疗机构的监督管理。 选择抗菌药物的耐药性出现、敏感细菌、抗菌药物的耐药菌株，并根据经验进行治疗，以加强细菌的主要耐药机制，构建外膜透过性低的亲和力受体产生灭活酶和灭活酶的自主排放系统。 疑似发生感染的基础感染病情程度感染病情程度的细菌感染诊断为细菌感染可能知道病原菌目前的耐药情况，临床微生物室的重要任务是对分离的病原菌进行抗菌药敏试验(AST，简称药敏试验)。 抗菌药物敏感性试验、检验报告临床治疗结果是敏感、正确的耐药失败预测正确的耐药失败预测(假敏感)耐药成功错误预测(假耐药)、临床微生物学检验的全过程、细菌耐药性监测的方法、通常药物敏感性试验的特殊耐药机制的检验耐药流行病学分析、AST、 目的强调细菌抗生素耐药临床治疗结果的预测不是体外测定的数据，而是体外AST的解释不是体外AST的结果，成功和失败地测定患者用药后的疗效，强调实验室与临床的统一，体外r体内r，r的结果可信为体外S体内s， 应对s的结果有怀疑的定义： AST如果没有测定细菌耐药性的体外抗菌试验(ART )细菌耐药性检测治疗，过量：不当用药、过量抗生素治疗失误：误用药、危重患者丧失急救时机不必要的副作用增加，不必要的费用增加，细菌耐药性降低，医疗服务质量下降(1)手工试验1 .纸片扩散法(s，I，R)2.稀释法(MIC)3.Etest(MIC)(2)自动仪器Vitek、Microscan Phoenix(3)分子试验PCR直接测定mecA基因(4)酶试验nitricocfin、ESBL，纸片法最适合常规实验室其特点方便，操作方便，测定药物可随意改变，柔韧性强。 重要的是纸片法药敏试验有完善的质量控制方法，结果相当可靠。 纸片法唯一不足的是中等耐性株会成为问题。 肉汁稀释法和琼脂稀释法是将抗菌药物的倍数比稀释到肉汁和琼脂中定量测定MIC的方法。 稀释法能准确测定厌氧菌和苛性培养菌，但对这些菌纸扩散法无能为力。 琼脂稀释法比肉汁稀释法更准确的原因是细菌的生长状况可以调查，并可以在平皿中测定多株细菌。 这两种方法的缺点需要时间。、自动化药敏计、现有Vitek系统、Microscan系统、SensstiterARIS等。 然而，自动化装置也存在局限性。 首先药物选择不灵活，其次难以检测特殊菌的耐药性，特别是快速药敏板可靠性差。 E-Test法是扩散法与稀释法相结合的特点，长塑料条件包括连续变化指数梯度的抗菌药物，具有精确、可靠、稳定性好的特点，且对各耐药表型均有良好效果，唯一缺点是价格高。 NCCLS提出常规药敏试验对象药品种，a组药作为优先药品进行常规药敏试验和报告。 b组药物可与a组药物并行进行药敏试验，但必须选择性报告从脑脊液中分离肠杆菌，在三代头孢菌素和尿道感染分离菌中应用复方新碱。 这些抗菌药物的报告，在a组抗菌药物过敏、不耐药、只能治疗a组抗菌药物失败病例的多种细菌混合感染的许多地方细菌感染不同，或者作为传染病资料在感染管理中心报道。 c组药物被用于替代或补充，具有传染病或流行株，并且需要检测一种或多种优先药物(特别是同级药物，例如-内酰胺药物或氨基糖苷类)的耐药株，也可用于治疗少见细菌的报告。 报告也可以作为流行病学资料提供给感染管理中心。 u组药物作为补充，仅用于尿路感染株药敏试验。 试验用抗菌药物种类的选择重视高效、低毒、廉价等原则的试验用抗菌药物种类的选择由医院控制感染委员会临床医师、药物学及微生物工人根据本机构的实际情况协商决定。基本术语、敏感性：表示检验菌按测定药物常规剂量给药后，在体内达到浓度而抑制或灭绝。 耐药性：表明检测菌不受常规给药量后体内到达的浓度的抑制。 中介、第一、中介某药物菌株，其MIC值接近该药物的血液浓度或组织液浓度，与敏感菌株相比，其药物治疗效果差；第二，对于可浓缩于某部位的药物或可大幅度提高使用量的药物，中介是敏感的；第三，中介是作为缓冲区域， 为了防止微小的试验误差可能导致较大的错误结果，这一点对于这些毒性较大的药物尤为重要。 MIC :最低抗菌浓度MBC :最小杀菌浓度MIC50 :最低抗菌浓度的50位MIC90 :最低抗菌浓度的90位，多重耐药菌：多重耐药的病原菌。 其定义定义为一种微生物对三种(如氨基葡萄糖苷类、红霉素、B-内酰胺类)或三种以上抗菌药物同时具有耐药性，不同种类三种。 泛耐株：对大多数种类抗菌药物的耐药性。 例如泛耐不动菌对氨基葡萄糖苷、青霉素、头孢菌素、烃类、四环素类、氟喹啉类、磺胺嘧啶类等具有耐性。 万古霉素耐药葡萄球菌万古霉素耐药和高浓度氨基糖苷耐药肠球菌； 耐青霉素肺炎链球菌耐头孢曲松淋病奈瑟菌耐亚胺培南肠杆菌ESBL的大肠杆菌克雷伯菌及肠杆菌属其他细菌。 一些特殊细菌药敏实验方法，1 .青霉素耐性肺炎链球菌(PRP )，Oxa纸片首次测定MHA 5%羊血，OXA1ug/片20mm抗菌圈=S，报告19mm不报告，MICMIC法a，肉汁稀释法，b，Etest法， 补充肺炎链球菌对-内酰胺药物的耐药性2 .耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillinresistanstaphylococousaureus，mrsaoxiclinsrisrisrisritionanthylloccousaureus 琼脂筛选法是1997年美国NCCLS推荐的mrsa的实证试验，即MH培养基NaCl(4%w/v )苯并偶氮唑啉(6ug/ml )、0.5号麦克斯韦管比浊后点种或线、35oC24小时，生长的菌落至少一个为mrsa。 值得注意的是，凝固酶阴性葡萄球菌应孵育48小时。mecA基因检测法采用PCR检测mecA基因，该试验明确耐药株是由外源型青霉素结合蛋白a(PBP2a )引起的，还是由自身的PBP点突变和-内酰胺酶产生的，仅在怀疑的情况下进行该试验。 葡萄球菌-头孢西丁；“30ug纸片头孢西丁的药敏结果和新折射点可以预测mecA介导的耐药性”，11000000000000000006 Table2C，头孢西丁(30ghz )纸片，常规操作培养24小时(耐药，18小时亦可见结果) 的结果不是头孢噻肟，而是用纸片扩散法筛选葡萄球菌中的mecA，头孢噻肟菌环(mm)s.aureus19*20*cons24*25*报告oxacillinR*报告oxacillinS， 10000000000000000000 Table2C，3 .万古霉素耐性肠球菌(vre ) (vancomycinresistantenterococcc )，4，超宽谱-内酰胺酶(extended spectrum- lactamasesble ) 2、下述耐药菌分离率： (1)耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA，MRSE) (2)万古霉素敏感性下降的葡萄球菌(3)耐青霉素肺炎球菌(PRP) (4)耐万古霉素肠球菌(VRE) (5)耐氨苄青霉素流感菌(6)产生超广谱酶的大肠和肺炎克雷伯菌(cleb shera ) (8)耐多药绿脓杆菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单细胞菌。 3 .真菌的分离率。 4 .各细菌对各种药物敏感或耐药比例。 5 .万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)6.多种耐药结核分枝杆菌(MDR-TB)7.念珠菌如MRSA对青霉素类敏感的庆大霉素耐药革兰阳性球菌或其他对氨基糖苷类敏感的肠杆菌科抗三代头孢菌素有氨基、羧基1 .不可能的结果2 .需要修正的结果葡萄球菌、嗜血杆菌、淋病菌如-内酰胺酶阳性，应报告对所有青霉素类的耐药性。 耐林可霉素葡萄球菌即使对克林霉素有敏感的结果也要报告其耐药性。 庆大霉素耐药革兰阳性球菌对美国星、耐替尼星有敏感的结果，但不仅仅用抗菌杀菌，应报告其耐药性。 同样，鸢尾素/阿米卡星也有类似的规则。 3、提示性药物细菌对这种药物的抗药性。 葡萄球菌对苯二偶氮唑啉具有耐药性，表明对所有-内酰胺类抗生素都具有耐药性，对氨基糖苷类也具有耐药性。 氨苄青霉素耐性肠球菌提示所有青霉素类和亚胺培南耐性。 庆大霉素耐药革兰阳性球菌对氨基糖苷类有耐药性。 大肠杆菌和克雷伯菌对头孢克肟、头孢他啶和三聚氰胺的耐药性，产生超广谱内酰胺酶(ESBL )。 MRS体外药敏试验可能对某些头孢菌素类、碳青霉素类或内酰胺酶抑制类抗生素有敏感结果，但给药无效。 具有ESBL的大肠杆菌和克雷伯菌即使对实验中的-内酰胺类敏感，在临床上也是无效的，必须向临床说明。 4 .临床医生应当做好耐药性统计分析，建立我院、我区和本国细菌耐药性监测数据库和网络，控制细菌耐药性，1、合理使用抗菌药物的经验治疗和预防应用以最佳疗程2、控制医院感