油脂、鱼粉酸价的测定

油脂、鱼粉酸价的测定1.原理：试样中的游离脂肪酸用氢氧化钾标准溶液滴定，每克样消耗的氢氧化钾的毫克数，称为酸价。2.试剂与溶液2.1中性乙醚-无水乙醇（或95%乙醇）混合液：乙醚+无水乙醇（或95%乙醇）=2+1混合贮存于试剂瓶中，临用前以酚酞为指示剂，用3g/l(0.05mol/l)的KOH中和至酚酞指示液呈中性。2.2氢氧化钾标准溶液c(KOH)=0.05mol/l2.2.1 称取KOH（M=56.1023）2.8g溶于1000ml试剂瓶中（用橡皮塞）待标定。2.2.2邻苯二甲酸氢钾（M=204.227）经105烘至恒重，准确称取1.0200g定容于100ml的容量瓶中，取10ml加入2-3滴酚酞指示剂，用待标定的KOH滴定至粉红色，根据消耗的毫升数计算KOH的量浓度。2.3酚酞指示剂：10g/l乙醇溶液。3.仪器与设备试验室常用玻璃器皿10ml碱式滴定管4.1油脂中酸价的测定 准确称取3-5g(精确至0.0001g)油脂样品于干燥的三角瓶中，加入50ml中性乙醚-无水乙醇（或95%乙醇）混合液，振摇使油脂完全溶解，必要时可置热水中温热溶解，冷至室温，加入2-3滴酚酞指示剂，用KOH标准溶液滴定至初呈微红色，0.5分钟内不褪色为终点。4.2鱼粉中酸价的测定 准确称取鱼粉样品3-5g(精确至0.0001g)于干燥的三角瓶中，加入50ml中性乙醚-无水乙醇（或95%乙醇）混合液，摇匀静置30分钟过滤，滤渣用20ml混合液（2.1）洗净，合并滤液,加2-3滴酚酞指示剂，用KOH标准溶液滴定至初呈微红色，0.5分钟内不褪色为终点。5.结果计算： VC56.11酸价（mgKOH/g）=- W式中：V-滴定消耗KOH标准溶液的体积（ml）； C-KOH标准溶液的量浓度mol/l； W-试样的质量，g； 5611-1ml、1mol/l KOH标准溶液中含KOH毫克数。允许误差：双试验结果允许绝对偏差不得超过0.5mgKOH/g，取其平均值作为测试结果，测试结果取小数点后第一位。 相对偏差10%6.注意事项：6.1乙醚-无水乙醇（或95%乙醇）混合液使用前必须调至中性，不能接触明火；6.2 KOH必须用碱式滴定管，标准溶液不能存放于带磨口塞的试剂瓶中；6.3当滴定消耗KOH标准溶液较多时，生成的脂肪酸钾盐易解离，使测定结果偏低，在测定中加入乙醚-无水乙醇（或95%乙醇）混合液有两个作用：提取鱼粉中的油脂；在滴定中防止生成的脂肪酸钾盐解离；6.4如用无水乙醇代替95%乙醇及用50%乙醇代替水来配制KOH标准溶液时，测定过程中可能不易水解且浑浊，可使终点变化迟缓现象得到改善。6.5对于滤液颜色较深的样品，用酚酞作指示剂时会影响终点的观察，可用百里酚蓝兰（黄色-蓝色）代替酚酞（无色-红色）或者用百里酚蓝与酚酞混合指示剂代替酚酞，（百里酚蓝与酚酞1：3混合，其PH变色为点9.0,黄色-紫色。酸价考察的是鱼粉中脂肪酸的变化，TVBN考察的是蛋白质的变化，应该综合考虑一下分析：鱼粉质量鉴定的方法及其分析指标的评价 在实验室，通常情况下，我们先进行镜检，即在生物镜下观察鱼粉的情况，是否有掺杂使假现象存在以及初步确定它是全鱼粉还是混合鱼粉以及下杂鱼粉，镜检后，还要对鱼粉做物理化学的分析，鱼粉的主要成分是粗蛋白质、脂肪、粗灰分和水分等，并就鱼粉的氨基酸组成进行检测，参照国家相关标准来予以判定，在此本文不做详述为了鉴别是否掺入尿素等，还应作非蛋白氮的检测。鱼粉的营养价值评价鱼粉质量或品质包括鱼粉营养价值和鱼粉鲜度。3.1鱼粉营养价值常规检测主要指标的评价粗蛋白质：一般来说，粗蛋白质含量越高，鱼粉的营养价值越高。但在实际生产中，由于掺杂使假的存在，粗蛋白含量高的鱼粉不一定就品质好。有条件的饲料厂最好对鱼粉做全套氨基酸的检测，赖氨酸、蛋氨酸等限制性氨基酸含量高，并且各种氨基酸的实测含量接近饲料营养价值表优质鱼粉的值，则该鱼粉质量基本可靠。此外，胃蛋白酶消化率是判定鱼粉蛋白质品质的一个重要指标，品质高的鱼粉消化率达90%以上，而劣质鱼粉粗蛋白质虽高但消化率却低。粗灰分：灰分高表明骨多肉少，反之骨少肉多。优质鱼粉灰分在16%以下，灰分20%以上表明不是全鱼粉。同时，灰分高表明可能有掺沙或廉价钙原料等。砂分：优质鱼粉砂分在2%以下，砂分高表明鱼粉有掺杂的问题。盐分：优质鱼粉盐分在2%以下，盐分高表明鱼粉中掺有小干鱼或鱼溶浆等。3.2鱼粉的鲜度鉴定生产鱼粉的原料鲜度差或鱼粉在运输、储藏过程中发生蛋白质分解、脂肪氧化酸败、梅立德反应等产生一些有毒害或不能被动物所利用的物质，使鱼粉营养价值下降，这就涉及到鱼粉鲜度的问题。衡量鱼粉鲜度主要有以下几个指标。3.2.1蛋白质鲜度指标3.2.1.1组织胺是鱼粉中组氨酸经微生物脱羧反应转变而成的一种胺类物质，鱼粉组织胺含量越高，则表明受微生物污染越严重，鲜度越差，一般情况下，新鲜鱼粉的组织胺含量应低于100mg/kg。3.2.1.2挥发性盐基态氮（VBN）VBN主要发生在蛋白质含量较高的饲料中，微生物在生长过程中为了获得能量，将蛋白质分解为氨基酸，经脱氨作用，将氨基转变为羰基进入三羧循环，产生能量的同时释放出NH3。VBN只适用于鱼粉中微生物繁殖初期的检测，因天门冬氨酸等非必须氨基酸是鱼粉中氨的主要来源。鱼粉组织胺含量与VBN含量之间有相应的对应关系：即组织氨越高，则VBN越高，反之组织氨越低，VBN越低。新鲜鱼粉的VBN一般不超过110mg/100g。3.2.1.3生物胺指数（BAI）鱼粉腐败变质后，不但产生组织氨和VBN，同时还产生腐胺、尸胺、草丙胺等一系列低级胺类物质，统称生物胺，用生物胺指数更能客观、准确地反映鱼粉鲜度情况，但由于测定的项目较多、较繁琐，因此目前还没有普遍采用。3.2.2油脂新鲜度鱼粉中含有油脂，油脂长期暴露在温度和湿度较高的环境下时，会发生生化反应，导致油脂的氧化酸败。鱼粉中油脂的氧化酸败是造成鱼粉鲜度和营养价值下降的重要因素，常用酸价、过氧化物价和硫巴比妥酸(TBA)来表示。酸价可作为油脂氧化前期指标，硫巴比妥酸(TBA)可作为油脂氧化后期指标，酸价越高说明油脂水解程度越严重，氧化酸败的机会越多。过氧化物价是测定油脂氧化初期产生的过氧化物含量，其值越高，鱼粉品质越差。过氧化物进一步分解产生醛和酮。硫巴比妥酸(TBA)能与不饱和脂肪酸的氧化产物聚合产生一种红色物质，以此物质含量来评估油脂后期氧化的程度。一般新鲜鱼粉的酸价应不超过7mgKOH/g，过氧化物价不超过5mmol/kg.。4鱼粉生产和储存中的质量问题据马作圻（1994）报道，鱼粉在生产和储存过程中所处的条件不同，其品质会发生不同的变化，高温条件下，氧化脂肪酸与氨基酸结合成蛋白质综合体，使某些氨基酸失去营养价值，如精氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、亮氨酸、赖氨酸等。类似的反应是氨基酸与还原糖结合生成棕色聚合物即所谓梅拉德反应（Maillaidreaction）。湿度对鱼粉质量影响颇大，鱼粉含水量为8%时经过250天氧化氮升高19.92%，挥发性氮升高24.41%。当鱼粉储存温度为10时，经过150-250天后，可溶性蛋白质减少17%-27%,20时则减少36%-40%。5结束语5.1鱼粉质量的好坏，一般以营养价值和鲜度表示。鱼粉营养价值的高低对畜禽的生长发育有重要的影响，鲜度不佳则能直接使畜禽的生长受阻或发生疾病，从而降低了鱼粉的使用效果。5.2评价鱼粉营养价值的高低仅以粗蛋白的高低为衡量标准远远不够，鱼粉粗蛋白越高，质量越