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文档简介

细胞生物学实验,广东药学院生命科学与生物制药学院,实验三细胞膜的通透性,1.掌握细胞膜通透性的实验方法。2.观察并掌握相对分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质对细胞膜通透性的影响。,一、实验目的与要求,细胞膜在不断变化的环境中必须保持自身的稳定状态才能生存。细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻止另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。,二、实验原理,血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。,二、实验原理,未溶血,溶血,渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。此时光线较容易通过溶液，使溶液呈现透明即溶血。,二、实验原理,在不同相对分子量、脂溶性大小以及电解质和非电解质等各种溶液中，红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，通过观察红细胞溶血现象时间的不同来记录渗入速度，从而测量各种物质通透性的差别。,三、实验材料、仪器和主要试剂,1.材料：含适量肝素的兔血。2.实验仪器小烧杯，试管，试管架，刻度吸管，注射器，秒表等。3.试剂乙二醇、丙三醇、葡萄糖；甲醇、乙醇、丙醇等。,四、实验方法与步骤,1.相对分子质量大小对膜通透性的影响在编号的三支试管中，分别加入2ml的1mol/L等摩尔浓度的乙二醇、丙三醇、葡萄糖高渗液，分别滴加两滴血液，用手腕轻轻摆动，晃动试管观察溶血时间，最长延长至15分钟，记录溶血时间、实验结果。,四、实验方法与步骤,2.脂溶性大小对细胞膜通透性的影响在3支试管中，各加入3mol/L甲醇、乙醇、丙醇溶液2ml后，分别滴加血液2滴，轻轻摇动试管并观察溶血现象，记录各管的溶血时间。,四、实验方法与步骤,3.电解质和非电解质对细胞通透性的影响在16支试管中，各加入不同浓度的葡萄糖及氯化钠溶液2ml后，分别滴加血液2滴，轻轻摇动试管，室温放置15min，观察发生溶血的浓度，确定等渗浓度，并计算等渗摩尔系数。,五、注意事项,1.溶血现象可用一张有字的白纸来辅助识别，能够清楚地透过溶液看到溶液后方纸上清晰的字迹时，为完全溶血。2.因相对分子质量大小对膜通透性有影响，所以将溶血时间适当地延长至15min，
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