肿瘤标志物分析前及分析后的影响因素

,肿瘤标志物分析前及分析后的影响因素,湖北省肿瘤医院 雷旦生,肿瘤标志物,肿瘤标志物（TM）的定义是指存在于机体血液、细胞、组织或体液中,并与肿瘤的发生、发展密切相关的化学物质，其化学本质可以是蛋白质、酶类、激素、核酸和糖蛋白等。,1978年由美国国立癌症研究所（NCI）提出，1979年确认并开始使用；目前已发现TM有千余种，常用的有上百种，其中40余种已广泛应用到临床诊治中；,肿瘤标志物分类,分类,TM检测的质量保证,TM作为一种肿瘤辅助性诊断指标，其检测结果会影响医师对疾病的判断与处理，因此合理选择检测项目和尽力确保检测结果的准确性和稳定性尤为重要。,近年来，许多国际组织分别制定了常用TM的应用指南，对TM测定的质量管理也提出了要求，虽然各个“指南” 观点并不完全相同，但大部分的意见是一致的,对我们的工作有较大的参考价值,分析前,分析中,分析后,TM分析过程的影响因素,TM质量控制,TM的分析前质量保证,NACB：Practice Guidelines And Recommendations For Use Of Tumor Markers In The Clinic肿瘤标志物临床应用实践指南和建议,实验诊断学高等医学院校八年制教材,Effects of Preanalytical Variables on clinical laboratory tests分析前因素对临床检验结果影响,TM的分析前影响因素,TM的选择,正确定位TM的诊断价值和应用范围,治疗前应该确定TM与肿瘤的关系,以TM生物半衰期作为复查间隔时间,注意影响TM浓度变化的生理和病理因素,A,B,C,D,选择,正确定位TM的诊断价值和应用范围,预后和疗效判断诊断和初筛,旧的标志物：要结合肿瘤的诊断、预后判断、疗效判断和复发监测等各个环节，对其应用价值进行详细的评价,新的标志物：许多与肿瘤有关的基因和蛋白不断被发现，需要详尽的临床评估明确其诊断性能,治疗前确定TM与肿瘤的关系,初次诊断时表达的肿瘤标志物有可能也适合用于治疗监测，可以作为治疗监测的基础水平,一些肿瘤标志物可用于评估肿瘤的预后,治疗后肿瘤标志物的浓度下降可用于初步评估肿瘤是否完全消除及其残留量,在术前和首次疗程开始前，必须了解肿瘤标志物与肿瘤的关系，因为：,以TM生物半衰期作为复查间隔时间,TM的半衰期是指肿瘤组织被完全切除后血液循环中TM浓度下降到50%的时间,有助于选择TM的监测时间和解释TM浓度变化与临床疗效和肿瘤复发的关系,若复查间隔时间太短,将误认为肿瘤未被完全切除；间隔时间太长,将无法区分是肿瘤复发还是疗效欠佳,一般应在治疗结束后5-6个半衰期采血为好，这时原有的TM约97-99%已被清除,主要TM的生物半衰期,影响TM浓度变化的生理和病理因素,产生TM的肿瘤细胞的总数量、肿瘤的质量、肿瘤的扩散以及肿瘤的分级； TM合成与释放速度；个别肿瘤不携带或不表达TM，或表达但不释放，则该肿瘤标志物不会升高； 如果肿瘤的血供较差TM减少，坏死程度不同使TM的浓度与肿瘤的大小不成比例；TM的分解和排泄速度，如果机体出现排泄障碍，如肾功能衰竭、肝功能不全或胆汁淤积，TM浓度将不成比例升高；抗体生成后形成免疫复合物，其清除速度取决于复合物大小,影响TM浓度变化的几种常见因素,采血到血清分离的间隔时间60min，NSE浓度会从血小板中释放而增高。溶血使红细胞释放NSE，浓度升高。皮肤接触试管内壁使SCC浓度升高。样本被唾液污染，使SCC、CA19-9、CEA浓度升高。黄疸血样本引起PSA检测值升高。治疗药物，如高浓度的二价或三价金属离子、嘌呤类、吲哚和胍类、Vit C、顺铂、丝裂霉素、E2、表柔比星等，引起PSA假性上升。人抗鼠免疫球蛋白抗体（HAMA）等嗜异性抗免疫球蛋白抗体可使TM的水平假性升高。年龄对TM的浓度有显著影响。,各指南关于TM临床应用的建议,患者的准备,样本采集的时机,患者的临床情况,药物与其他治疗措施的影响,A,B,C,样本采集的时机,对于大多数标志物没有明显的证据表明它们在一天中存在明显的变化，所以在一天中的任何时候都可以采集样本,测定PSA的标本采集应当在与前列腺有关的任何操作之前进行,不应当在经期采集CA125的标本，因为此期CA125的血清浓度升高2至3倍,患者的临床情况,在子宫内膜异位症患者以及妊娠的前、中期CA125可能轻微升高；在良性腹水患者，CA125可显著升高,泌尿道感染和前列腺炎可能使PSA显著升高，在抗感染治疗成功后应当再次采样以确定结果的准确性,肾衰可能导致CEA和细胞角蛋白测定结果不适当的升高,胆汁淤积可能显著升高血清CA199的浓度,药物与其他治疗措施的影响,5还原酶抑制剂导致PSA浓度中度升高（-50%）,化疗后肿瘤标志物浓度可能短暂升高,大麻可能使血清hCG浓度短暂升高,对于某些测试方法，吸烟可能使CEA的测定值轻度升高,标本的影响,样本类型,标本稳定性,标本污染,嗜异性抗体或人抗鼠抗体(HAMA),A,B,C,D,标本,样本类型,严格按照试剂盒说明书,大多数项目血清或血浆都适用： NSE宜用血浆，（由于凝血时从血小板释放，血清活性大于血浆活性，所以血浆应该为首选样本），PSA不宜30小时肝素抗凝血，AFP、CEA不宜肝素锂,有些检测项目不能使用塑料管：降低CA-125，NSE,明确告知临床,标本稳定性,TM通常都较稳定，但若要保存时，应从全血中分离出血清或血浆存放在4（短期保存）或-30（长期保存）,避免对标本热处理（如灭活补体、HIV），特别是检测hCG和PSA的标本， HCG能在温度升高时离解成、两个亚单位，f-PSA不稳定，半寿期短，应及时测定,标本污染,当唾液污染标本时，CEA、CA19-9和TPS的检测结果会显著升高。如果怀疑标本受污染，应要求重新采集标本,SCC鳞状细胞癌抗原浓度可能因皮肤污染而增高,嗜异性抗体或人抗鼠抗体（HAMA）,大多数肿瘤标志物的测定中常使用一对鼠单克隆抗体来与肿瘤抗原反应，如果病人血清中存在HAMA，TM浓度假性增高。,嗜异性抗体可出现在曾被鼠或宠物咬过的人，以及使用过动物免疫剂（如单克隆抗体）治疗过的人,避免的办法是：在样本中先加入提纯的鼠IgG，经温育后，再用PEG沉淀鼠IgG和人抗鼠IgG复合物，然后再进行测定,TM的分析后影响因素,制度上的保证,异常结果,建立危、急诊报告制,建立检验报告单、发送和签收制度,操作者签名,严格的报告单签发、审核制度,审核者签名,检验日期,报告结果后标本应保留一定时间,检测结果上的保证,操作、仪器、试剂、环境诸方面保证,室内质控结果是否“在控”,对于过高过低或有疑问的结果必须复查或重抽标本复查,咨询服务,TM的选择,检验结果的解释,检验结果的临床意义,检验结果解释及有关的问题,“正常”与“异常”的依据,最好有本实验室的正常参考范围,临界值的问题,正常参考范围,检测结果与上次结果有差异时如何判断,相差的大小,实验误差,标本质量,病情变化,钩状效应（HOOK效应）,是指由于抗原抗体比例不合适，两者交联度降低，“未捕获”的抗体抗原复合物在定量前就被清洗步骤去除，从而导致错误的偏低结果，出现假阴性的现象，其中抗体过量叫做前带效应；抗原过量叫做后带效应。,在TM检测中一定要注意前带和后带现象，以免出现假阴性结果，尤其以前带效应明显，这种情况可以通过梯度式稀释样本进行解决，常见于AFP。,随着医学科学的飞