实验4-大黄的薄层色谱鉴别与显微鉴别1.ppt

实验四、大黄的显微鉴别与薄层色谱鉴别,实验目的：1.熟悉根茎类生药的鉴别方法；2.掌握大黄的植物来源、理化鉴别及显微鉴别方法。实验内容：1.观察大黄的组织切片及粉末；2.进行大黄薄层色谱鉴别。,1、来源：大黄药材来源于蓼科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.、唐古特大黄R.tanguticumMaximetBalf.或药用大黄R.officinaleBaill.的根茎。,唐古特大黄,药用大黄,2、性状：（形状，颜色，表面，断面等）大黄根茎呈圆柱形、马蹄形或卵形。表面黄棕色或红棕色，有的可见类白色的网状纹理（系类白色的薄壁组织夹有棕红色的射线）；残留的外皮表面暗棕色，有纵横粗皱纹。断面淡红棕色或黄棕色，颗粒性；皮部极窄，可见暗色形成层环纹，髓宽广，有多数放射状星点（异形维管束）散在，呈大理石样纹理，习称“锦纹”。,掌叶大黄,异形维管束(星点),唐古特大黄,药用大黄,3、显微鉴别大黄根茎部分髓的横切面（髓部的异形维管束为内韧型维管束）1.木质部，导管常1数个相聚，壁非木化或微木化；2.形成层细胞扁平，排列成环；3.韧皮部位于形成层内侧，近形成层可见粘液腔；4.射线呈星芒状，含棕色物质；5.薄壁细胞含草酸钙簇晶及淀粉粒。,显微鉴别,（1）木栓层、皮层：多已除去；（2）韧皮部：筛管群明显。射线细胞内含棕色蒽醌类物质；（3）形成层：成环；（4）木质部：导管常至数个相聚，稀疏排列，不木化；（5）髓：宽广，异型维管束排列成环状或散在。,大黄根茎部分髓的横切面：,大黄粉末特征：草酸钙簇晶直径20160m，少数至196m。具缘纹孔导管、网纹导管、螺纹导管及环纹导管非木化。淀粉粒甚多，单粒类球形或多角形，脐点星状；复粒由28分粒组成。,4、大黄薄层层析：,样品提取：取大黄、撅子黄粉末各0.5g，分别置小三角烧瓶中，加15ml甲醇，用保鲜膜封口，超声提取0.5小时。,薄层板：硅胶预制板对照品溶液的制备：取大黄酸、大黄素甲醚，加甲醇溶解，制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。,流动相：石油醚(3060)甲酸乙酯甲酸（1551）。点样量：对照品溶液12l，供试品溶液24l。展距：8cm。检视：紫外光灯365nm。,点样：取薄层板1块，在距板底部1cm处画一横线，平行点样：大黄提取液撅子黄提取液大黄酸标准品大黄素甲醚标准品要求：划起始线时，要轻，不要刺破薄层；样品溶液原点应尽可能小，一般直径不超过3毫米为适宜。点样力求迅速，一般不超过5分钟。因为薄层板暴露的时间过长，会吸收空气中的水份而改变活度，影响分离效果。,展开：将已点好样的薄层板直接放入装有展开剂的层析缸内展开。当展开剂上升至距薄层板上沿1cm取出，并挥干试剂。,注意：薄层板浸入展开剂不能超过点样线，否则样品不在薄板上分离而直接进入展开剂。取出薄板后，马上用铅笔在展开剂上升前沿处划一记号，否则呈现的前沿很快消失，无法记录展开剂前沿至原点中心距离，而无法计算比移值。,检测：将薄层板于紫外灯下（365nm）检测，检测样品色谱与标准品色谱荧光斑点。,实验作业