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细胞工程一、选择题1近日名为“我的皮肤”的生物活性绷带在英国诞生了,它给皮肤烧伤病人带来了福音该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖57天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的下列有关叙述中,不正确的是( )A“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程B人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降C种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人D膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口与患者自身皮肤愈合与细胞膜上HLA(白细胞表面抗原)有关2植物细胞表现出全能性的必要条件是A导入其他植物细胞的基因B将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中C用适当浓度的秋水仙素处理D脱离母体后,给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件3马铃薯是利用它的块茎进行无性繁殖,种植多代以后,往往会因感染病毒而减产,为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是A选择优良品种进行杂交B进行远缘植物体细胞杂C利用芽尖进行植物组织培养D人工诱导基因突变4某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是A利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B采用花粉粒进行组织培养获得单倍体幼苗C采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养5某实验室做了如图所示的实验研究下列相关叙述中正确的是( )A与纤维母细胞相比,过程形成的诱导干细胞的全能性较低B单克隆抗体不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外C每个Y细胞只产生一种抗体,故过程不需进行筛选D过程是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程6某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养,下列说法正确的是( )A在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,也可用胃蛋白酶处理B细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸C甲、乙细胞在持续的原代培养过程中,乙会出现停止增殖的现象D仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒7动物细胞培养技术的用途有( )生产有价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素等;生产基因工程技术中所用的受体细胞;可以用于检测有毒物质;培养的各种细胞可直接用于生理、病理、药理等方面的研究。A B C D8利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体,下列相关叙述正确的是( )A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者9动物细胞融合过程中通常用灭活的病毒作为诱导剂,这里的“灭活”是指用物理或化学的手段使病毒( )A具有感染力,但破坏其抗原结构 B失去感染力,但不破坏其抗原结构C失去感染力,并破坏其抗原结构 D具有感染力,也不破坏其抗原结构10下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( )A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养11模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述,模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。对下列两个生物概念模型的理解或者分析错误的组合是( )若图1表示基因工程的操作流程图,则C表示重组质粒,D是受体细胞;若图1表示植物体细胞杂交过程,则A、B在融合前必须经过特殊处理制备原生质体,形成的C称为杂种细胞,从C到D需要的技术是植物组织培养若图2中B是核移植技术,C是胚胎移植技术,则形成d的过程体现了高度分化的动物体细胞也具有全能性若图2中B表示下丘脑,C表示垂体,切断下丘脑与垂体的联系,对胰岛的影响比对甲状腺、肾上腺的影响更大A B C D12下列有关生物工程的叙述正确的是( )A植物体细胞杂交技术是通过人为手段造成染色体变异的方法之一,获得原生质体需用胰蛋白酶去除细胞壁B茎尖细胞具有很强的分裂能力,离体培养时不需脱分化就可直接培养成完整的植株C用植物茎尖组织培育成的脱毒作物可以抗病毒D在植物组织培养中,对培养基进行某些处理,可以诱发和筛选优质的突变体13现有甲、乙两种植株(均为二倍体纯种),其中甲种植株的光合作用能力高于乙种植株,但乙种植株很适宜在盐碱地种植,要利用甲、乙两种植株各自优势,培育出高产、耐盐的植株,有多种生物技术手段可以利用,下列所采用的技术手段中不可行的是( )A利用植物体细胞杂交技术,可获得满足要求的四倍体杂种目的植株B将乙种植株耐盐基因导入到甲种植株的受精卵中,可培育出目的植株C两种植株杂交后,得到的F1再利用单倍体育种技术可较快获得纯种的目的植株D诱导两种植株的花粉融合并培育成幼苗,幼苗用秋水仙素处理,可培育出目的植株14用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )A该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B该愈伤组织的细胞没有全能性C该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成D该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构15下列有关植物体细胞杂交技术的描述,不正确的是( )A利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株B获得原生质体的过程中需要纤维素酶和果胶酶C通常用聚乙二醇或灭活病毒诱导原生质体融合D可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞16以下有关人工种子的叙述中,不正确的是( )A人工种子的胚状体没有与正常受精卵形成的胚类似的结构和发育过程B人工种子可以工厂化生产,播种人工种子可节省大量粮食C人工种子克服了有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题D人工种子的胚乳中含有胚状体发育所需要的营养,还可以添加植物激素、药物等17要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖,形成细胞群。其原因是( )A在体外培养条件下,B淋巴细胞可以无限增殖B在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体C每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应D每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体18下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤,其中对单克隆抗体制备的相关叙述不正确的是( )从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞 将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 从腹水中提取抗体 利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合A过程获得的细胞均可无限增殖B实验顺序应当是C过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆D利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选19A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如下图所示(仅显示细胞核),将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后,诱导二者的原生质体融合,形成单核的杂种细胞,若经过组织培养后得到了杂种植株,则该杂种植株是( )A、二倍体;基因型是DdYyRrB、三倍体;基因型是DdYyRrC、四倍体;基因型是DdYyRrD、四倍体;基因型是DdddYYyyRRrr20下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是( )A利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B过程中都会发生细胞的增殖和分化C多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性二、综合题21癌胚抗原(CEA)是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白,临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症。回答下列问题:(1)制备CEA的单克隆抗体时,首先将_注入小鼠体内,使小鼠产生免疫反应。然后从产生免疫反应小鼠的脾脏中获取_细胞,将其与骨髓瘤细胞融合,该融合过程所利用的基本原理是_。因为融合率不是100%,且融合过程具有_性,所以要对融合后的细胞进行筛选。筛选出的杂交瘤细胞还要经过多次筛选,最终获得_(答两个特点)的杂交瘤细胞。(2)获得杂交瘤细胞后,将其注射到小鼠腹腔内增殖或_,之后从中提取大量CEA抗体。CEA单克隆抗体的主要优点有_(答三个)。(3)CEA单克隆抗体与抗癌药物偶联后,可以使抗癌药物定向作用于癌细胞,该过程所利用的免疫学原理为_。22血管内皮生长因子(VEGF)是目前发现的诱导肿瘤血管生成的最强烈的血锌生成因子,针对VEGF生产的抗肿瘤药物,是治疗癌症的一个方向;芝加哥大学的Katherine Knight博士成功地在转基因兔中获得骨髄瘤样肿瘤,经技术改进,能高产量地生产兔单克隆抗体:我国江苏省某公司首次在全球成功开发出人源化兔单抗药物“注射用人源化抗VEGF单克隆抗体”(SIM63),有效打破了跨国公司的技术垄断。人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。请回答下列相关问题:(1)动物细胞在体外培养的技术属于 工程,由于人们对动物细胞所需的营养物质没有完全搞淸楚,在使用合成培养基时,通常需要加入 等一些天然成分:在培养时除提供细胞所需的O2外,还需要CO2,其作用是 。(2)在基因工程中,将目的基因导入动物细胞现今极常用、极有效的方法是 ,要在短时间内扩增大量的目的基因采用 技术,这个技术中的关键酶是 。(3)当VEGF作为抗原进入动物体内时,动物体内的某些B细胞分化为浆细胞,这种浆细胞只分泌针对VEGF的一种抗体,但B细胞在体外培养不会无限增殖,解决这一问题的方法是通过动物细胞融合技术得到杂交瘤细胞,常用的化学诱导融合试剂为 ,要分离出杂交瘤细胞,应该用 培养基进行筛选,单克隆抗体最主要的优点是它的 ,并可大量制备。23某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:(1)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量 。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是 。(2)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用 消化处理。(3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的 。(4)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入 ,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 合成水平的差异,确定Y的药效。24科学家用植物细胞杂交方法,将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合,成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株,如图1所示,其中表示过程,英文字母表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如下三组实验如图2。据图回答下列问题:(1)实现过程的技术是 ,在此之前使用 酶处理细胞以除去细胞壁。过程原生质体经过 再生,与此密切相关的细胞器为 。(2)过程后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含n条染色体,则“番茄-马铃薯”细胞内含 条染色体;若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于 倍体植株。(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞,那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是 。(5)若杂种植株在有丝分裂在过程中,仅保留番茄的染色体而马铃薯的染色体会不断丢失,采用特异性引物对番茄和马铃薯基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。图3是用该引物对双亲及4棵再生植株14进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株14中一定是杂种植株的有(多选) 。(6)图2 过程培育植物体A主要应用了 技术。(7)用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行、有关实验,则过程中,培育植物体B的方法()称为 。植物体C的基因型有 。(细胞A为两两融合细胞,写出具体的基因型。)(8)三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是 。25研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建_区基因,转入原核细胞表达并提纯。(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与_细胞进行融合,使用的化学诱导剂是_,细胞融合的原理是_。(3)将融合细胞在_培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取有克隆生长的细胞培养液中的_(填“上清液”或“沉淀细胞”),应用_技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过_或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体_的特点。26花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如图所示。据图回答下列问题:(1)过程所需的酶是_。(2)过程后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体培养液的浓度要适宜,原因是_。原生质体经过_再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和_植株的根尖,通过_、_、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。(5)对杂种植株进行_接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。27某科研小组欲测定某药物对体外培养的细胞的毒性效果。供培养的细胞有:甲(肿瘤细胞)和乙(正常体细胞)。请结合所学知识回答下列有关问题:(1)动物细胞培养包括:原代培养和_。(2)在原代培养的过程中,瓶中的营养成分有:葡萄糖、_(至少写出2个)等;除此之外,还需要加入适量的_(天然成分)。(3)动物细胞培养的原理是_;在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长_。药物实验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。28下图是利用单克隆抗体技术制备三聚氰胺特异性抗体的过程,请据图回答:(1)单克隆抗体的制备过程中要用到_和_技术。(2)由于三聚氰胺分子量过小,不足以激活高等动物的免疫系统,因此在制备抗体前必须对其进行过程,下列物质中哪一种不适合作“扩容”抗原分子的是( )A蛋白质 B多糖 C磷脂 D核苷酸(3)过程会使小鼠产生能分泌相应_的B淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的_免疫。(4)单克隆抗体的制备所基于的免疫学基本原理是_。(5)过程动物细胞特有的促融方法是用_,过程用特定的选择性培养基筛选,会使_的细胞死亡;选出的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,才能获得产三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株。(6)制备的三聚氰胺单克隆抗体可用于检测乳制品中存在的微量三聚氰胺,说明三聚氰胺单克隆抗体具有_等特点。29下图是应用生物工程技术获得人们所需要的生物新品种或新产品的示意图。请据图回答下列问题:(1)在培育转人生长激素基因牛过程中,目的基因是指编码蛋白质的基因,基因工程中的目的基因还可以是具有 的因子。(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,科学家将人的生长激素基因与 的启动因子等调控组件重组在一起是,通过 方法完成过程。过程先通过 技术培养到桑椹胚或囊胚阶段,再采用 技术,培育出转基因犊牛。(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,最可能是 细胞,单克隆抗体具有 的优点。(4)在抗虫棉培育过程中,过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,是因为其细胞表达 。30下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。请根据示意图回答下列问题。(1)单克隆抗体技术是 技术中最重要的用途。(2)合成与分泌单克隆抗体涉及到的细胞器是 。(3)骨髓瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起,细胞融合完成后,在培养基中有 种两两融合的细胞,融合的原理是 ,动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的物理方法和诱导剂PEG外,还经常采用 。(4)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优点是 。(5)选出的杂交瘤细胞所具有的特点是 。参考答案1B【解析】试题分析:A、“我的皮肤”的获得采用了动物细胞培养技术,属于动物细胞工程,A正确;B、人的皮肤烧伤后会因人体第一道防线的破坏而导致免疫力下降,B错误;C、种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人,否则容易发生排斥反应,C正确;D、人类白细胞抗原(HLA)是人类主要组织相容性复合物,作为不同个体免疫细胞相互识别的标志,因此膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口与患者自身皮肤愈合与细胞膜上HLA有关,D正确故选:B2D【解析】导入其他植物细胞的基因属于基因工程技术,A错误;高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制,但细胞核仍然保持着全能性,则将细胞核移植到去核的卵细胞中能表达全能性,B错误;用适当浓度的秋水仙素处理属于细胞工程中的单倍体和多倍体育种,C错误;植物细胞表现出全能性的条件是细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等),一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素),D正确。【考点定位】植物细胞全能性的条件【名师点睛】细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能;生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因;在生物体内,由于基因的选择性表达,细胞不能表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官。植物细胞表现全能性的条件:细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等);一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。3C【解析】进行植物微型繁殖时常采用茎尖或根尖作为外植体,原因是茎尖或根尖病毒极少,因此切取一定大小的茎尖或根尖进行组织培养,再生的植株就可能不带病毒,故选C 。【考点定位】植物培养的条件及过程【名师点睛】(1)植物组织培养过程是:离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,然后再分化生成根、芽,最终形成植物体植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。(2)培育无病毒植株苗,应选择不含病毒部分培养,而植物体新生部位不含病毒,如根尖和茎尖。4B【解析】试题分析:利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗属于无性繁殖,A正确;采用花粉粒进行组织培养获得单倍体幼苗,需经染色体加倍后才能选育出所需的优质苗,B错误;采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上属于无性繁殖,C正确;采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养,可选育出所需的优质苗,D正确。考点:无性繁殖、单倍体育种及植物组织培养5B【解析】试题分析:过程是通过诱导基因作用使纤维母细胞脱分化为干细胞,与纤维母细胞相比,干细胞的全能性较高,A错误;抗体是大分子化合物,分泌出细胞的方式是胞吐,需要能量,但不需要载体蛋白,B正确;虽然每个Y细胞只产生一种抗体,但不一定是我们所需的抗体,需要用抗原-抗体杂交的方法筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,C错误;过程是干细胞再分化为其他组织器官细胞,细胞分化过程中遗传物质没有改变,D错误。考点:单克隆抗体的制备过程;胚胎干细胞的研究与应用6C【解析】试题分析:胃蛋白酶最适pH值接近于2,呈酸性,而细胞培养液的pH值接近于中性,所以不能用胃蛋白酶处理,A错误;细胞培养过程中,5%CO2的作用是调节细胞培养液的pH值,B错误;乙是正常肝细胞,存在细胞接触抑制现象,在原代培养过程中会出现停止增殖的现象,需要传代培养获得细胞株和细胞系,C正确;病毒没有细胞结构,不能独立生活,必须依赖于细胞生存,应该用细胞来培养病毒,D错误。考点:动物细胞与组织培养过程7D【解析】试题分析:动物细胞培养技术的用途有:生产有价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素等;生产基因工程技术中所用的受体细胞;可以用于检测有毒物质;培养的各种细胞可直接用于生理、病理、药理等方面的研究。所以,正确。考点:动物细胞与组织培养过程8D【解析】试题分析:单克隆抗体是浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的,A错误;单独的效应B淋巴细胞有产生抗体的能力,但没有无限增殖的本领,因此在体外培养的情况下是不可能得到大量的单克隆抗体的,B错误;将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞有浆细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞三种,C错误;单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点,因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者,D正确。考点:单克隆抗体的制备过程9B【解析】试题分析:灭活病毒,会使病毒蛋白的高级结构受到破坏,蛋白不再有生理活性,所以失去感染、致病和繁殖能力。考点:细胞融合的概念及方法10D【解析】试题分析:培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞,A错误;传代培养过程上少数细胞的细胞核型会发生改变,B错误;二倍体细胞的培养次数通常是有限的,只有少数细胞突变后可无限传代,C错误;恶性细胞系的细胞具有癌细胞的特点,可进行传代培养,D正确。考点:动物细胞与组织培养过程11B【解析】试题分析:若图甲表示反射弧及神经传导过程图,由于兴奋在神经元之间传递是单向的,所以A、B表示感受器,C表示神经中枢,D表示效应器,正确;若图甲表示植物体细胞杂交过程,由于植物细胞有细胞壁,所以A、B在融合前必须经过酶解法处理制备成原生质体,融合后形成杂种细胞C,并通过植物组织培养技术,得到杂种植株D,正确;若图乙表示免疫的过程(部分),其中a表示抗原,B表示B淋巴细胞,C表示效应B细胞,d表示C产生的抗体,错误;若图乙表示单侧光对胚芽鞘的影响,其中a表示单侧光,B表示胚芽鞘的感光部位,C表示效应部位,d表示因生长素的作用细胞生长加快而出现向光性,不是分裂加快,错误。所以分析均错误的组合是。考点:反射弧各部分组成及功能;生长素的作用以及作用的两重性;人体免疫系统在维持稳态中的作用;植物体细胞杂交的过程12D【解析】试题分析:植物细胞的细胞壁成分主要是纤维素和果胶,根据酶的专一性,获得原生质体需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,A错误;茎尖细胞具有很强的分裂能力,离体培养时需要脱分化和再分化才能培养成完整的植株,B错误;用植物茎尖组织培育成的脱毒作物,由于不具有抗病毒基因,因此不能抗病毒,C错误;在植物组织培养中,对培养基进行某些处理,可以诱发和筛选优质的突变体,D正确。考点:植物培养的条件及过程;植物体细胞杂交的过程13C【解析】试题分析:甲、乙两种植株均为二倍体纯种,利用植物体细胞杂交技术,可获得满足要求的四倍体杂种目的植株,A可行;基因工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传特性,因此将乙种植株耐盐基因导入到甲种植株的受精卵中,可培育出目的植株,B可行;甲乙两植株之间存在生殖隔离,因此两者不能杂交,即使能杂交也不能产生可育后代,因此C不可行;诱导两种植株的花粉融合并培育成二倍体幼苗,用秋水仙素处理可形成可育四倍体后代,D可行。考点:植物体细胞杂交的过程;基因工程的应用14B【解析】试题分析:愈伤组织是外植体脱分化和分离形成的,A正确;愈伤组织细胞含有该生物全部的遗传物质,仍然具有全能性,且全能性比外植体高,B错误;愈伤组织是高度液泡化,无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织,C正确;愈伤组织经过再分化可以形成胚状体,D正确。考点:植物培养的条件及过程15C【解析】试题分析:利用植物的体细胞杂交,可以获得杂种细胞,进而培育成杂种植株,由于不同种植物的染色体的种类和数目不同,所以可以获得多倍体的杂种植株,A正确;在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁,进行植物原生质体的融合,B正确;植物的体细胞融合可用化学法(聚乙二醇)或物理法诱导融合,而不能使用生物方法(灭活病毒)诱导,动物细胞融合可以,C错误;不同种植物的细胞所含染色体的种类和数目是不同的,故我们可以根据细胞中染色体的形态和数目的差异来鉴定杂种细胞,D正确。考点:植物体细胞杂交的过程16A【解析】试题分析:人工种子的胚状体具有与正常受精卵形成的胚类似的结构和发育过程,A错误;人工种子可以工厂化生产,播种人工种子可节省大量粮食,B正确;人工种子克服了有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题,C正确;人工种皮中可加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等,也可添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育,D正确。考点:人工种子的制备17D【解析】试题分析:能产生抗体的B淋巴细胞属于高度分化的细胞i,不能无限繁殖,骨髓瘤细胞能无限繁殖,但不能产生特异性抗体,A错误;在动物体内B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体,B错误;当有特定的抗原刺激机体时,特定的B淋巴细胞参与特异性免疫反应,C错误;每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,D正确。考点:单克隆抗体的制备过程18A【解析】试题分析:利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选,筛选得到杂交瘤细胞和筛选出能够产生特异性抗体的细胞群;故A正确;过程进行有丝分裂产生多个杂交瘤细胞,保持了亲本的遗传性状,属于广义上的克隆,故B正确;单克隆抗体的制备流程为:细胞融合细胞筛选细胞培养提取单克隆抗体,顺序应当是;故C正确;过程利用促融合因子使两种细胞发生融合,得到B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞,其中B淋巴细胞相互融合的杂种细胞不能无限增殖的,故D错误。考点:单克隆抗体的制备过程19C【解析】试题分析:据图分析,A物种基因型为Dd,属于二倍体,B物种的基因型为YyRr,也属于二倍体,植物细胞融合后形成的杂种细胞含有两个亲本的遗传物质,基因型为DdYyRr,属于异源四倍体。考点:植物体细胞杂交的应用20A【解析】试题分析:利用此过程获得的试管苗的基因型与亲本相同,可能为杂合子,A正确;为脱分化过程,为再分化过程,这两个过程中都会发生细胞的增殖,过程也会发生细胞的分化,但过程不会发生细胞的分化,B错误;多倍体植株的培育不需要采用植物组织培养技术,C错误;此过程需要采用植物组织培养技术,该技术的原理是细胞的全能性,D错误。考点:植物培养的条件及过程21(1)癌胚抗原(CEA) B淋巴(或浆细胞) 细胞膜的流动性随机 既能产生CEA(特异性)抗体,又能无限增殖(2)在体外培养 特异性强、灵敏度高、可大量生产(3)抗原和抗体的特异性结合【解析】试题分析:(1)制备CEA的单克隆抗体时,首先将癌胚抗原注入小鼠体内,使小鼠产生免疫反应。然后从产生免疫反应小鼠的脾脏中获取B细胞,细胞融合的原理为细胞膜具有流动性。融合过程具有随机性,因此必须筛选出杂交瘤细胞。筛选出的杂交瘤细胞既能产生CEA(特异性)抗体,又能无限增殖。(2)单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强,灵敏度高,并可以在体外大量制备。(3)生物导弹”是单抗上连接抗癌药物,利用抗体和相应抗原(癌细胞)特异性结合的能力,利用抗癌药物或毒素杀伤和破坏癌细胞。考点:本题主要考查了单克隆抗体的相关知识。22(1)动物细胞(1分) 血清(或血浆) 维持培养液的PH(2)显微注射 PCR(多聚酶链式反应)(1分) Taq酶(热稳定DNA聚合酶)(3)聚乙二醇(PEG) 选择(1分) 特异性强、灵敏度高【解析】(1)动物细胞在体外培养的技术属于动物细胞工程,由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,故在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等天然成分;气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2,其中O2的作用是提供细胞进行有氧呼吸,CO2的作用是维持培养液的pH。(2)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。要在短时间内扩增大量的目的基因采用PCR技术,这个技术需要高温使得DNA分子解旋,因此相关酶具有耐热型,该技术用了关键酶为Taq酶。(3)效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,诱导细胞融合的方法有化学法(聚乙二醇)、灭活的病毒(如仙台病毒、灭活病毒)、和物理方法(电激、振动和离心)。通过选择培养基可以对杂交瘤细胞进行筛选,单克隆抗体其特点是特异性强、灵敏度高。【考点定位】动物细胞与组织培养过程【名师点睛】、单克隆抗体的制备(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原,然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞 。(2)获得杂交瘤细胞将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。23(1)动物血清或血浆 调节pH值(2)趋于停止(接触抑制) 胰蛋白酶(3)抗生素(4)Y 蛋白质【解析】试题分析:(1)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质(如促细胞生长因子等),因此在动物细胞培养时,通常要在合成培养基中加入适量血清;细胞培养应在含有5%CO2的恒温培养箱中进行,其中CO2的作用是维持培养液pH。(2)甲细胞为肿瘤细胞,已经失去接触,而乙细胞为正常肝细胞,存在接触抑制,因此在这两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长停止甲细胞能无限增殖,因此其传代的次数比乙多;胰蛋白酶能消化组织细胞间的蛋白质,使组织细胞分散成单个细胞。(3)培养瓶中加入抗生素可以抑制细菌的活动。(4)该实验的目的是试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,因此自变量为是否加入Y,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,则A组细胞培养液中应加入等量Y已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关,而基因X的表达包括转录和翻译两个步骤,抗癌药物Y的作用可能是抑制基因X的转录过程,也可能是抑制其翻译过程,因此通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的mRNA或相关蛋白质合成水平的差异,可以确定Y的药效。考点:动物细胞与组织培养过程24(1)原生质体融合 纤维素酶和果胶 细胞壁 高尔基体(线粒体)(2)叶绿体(3)m+n 单(4)用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗(5)1、2、4(6)植物组织培养技术(7)单倍体育种 YYmm或Yymm或yymm(8)植物体B【解析】试题分析:(1)过程是利用物理或化学方法(如聚乙二醇试剂)诱导原生质体融合,在此之前要用酶解法(纤维素酶和果胶酶)除去细胞壁。过程是原生质体再生出新的细胞壁的过程,在植物细胞中,高尔基体与细胞壁的形成有关。(2)过程后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)“番茄-马铃薯”细胞是由番茄体细胞和马铃薯体细胞经过融合而成的,因此具有番茄和马铃薯的全部遗传物质。若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含n条染色体,则“番茄-马铃薯”细胞内含m+n条染色体;若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体,此杂种植株的花粉是生殖细胞,由生殖细胞直接发育而来的生物体,不管含有一个或多个染色体组,都是单倍体。(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞,则c具有番茄细胞两倍的染色体。那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是可以用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,可以使细胞中染色体数目增倍。(5)图3中,1、2和4中同时含有番茄和马铃薯的染色体,而3只含有番茄的染色体,因此再生植株14中一定是杂种植株的有1、2、4。(6)图2过程培育植物体A主要应用了植物组织培养技术。(7)中花粉经组织培养直接长成的幼苗是单倍体,再用秋水仙素处理幼苗,得纯合的植物体B,该过程属于单倍体育种。植物C是基因型为Yymm的花粉经过花粉两两融合后形成的细胞A后,以组织培养方式得到的。依据基因分离定律可知,亲本为Yymm的植物的花粉基因型为Ym或ym这样融合细胞A可能是Ym与Ym的花粉融合得到,也可能是ym与ym的花粉融合得到,还可能是Ym与ym的花粉融合得到。即融合细胞A的基因型可能是YYmm、yymm、Yymm组织培养得到的植物体C是细胞A全能性的体现,故植物体C的基因型取决于细胞A。所以植物C的基因型是Yymm或yymm或Yymm。(8)A中个体的基因型取决于外植体,不一定是纯合子;B是单倍体育种形成,一定是纯合子;C是花粉融合后培养形成的,若融合的花粉的基因型不同,则为杂合子,否则为纯合子。因此,三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是植物B。考点:植物培养的条件及过程;植物体细胞杂交的过程;单倍体诱导与利用25(1)低表达 胞外(2)骨髓瘤 PEG(或聚乙二醇) 细胞膜的流动性(3)选择 上清液 抗原抗体杂交(4)体外(培养)(5)特异性强(或识别抗原部位专一)【解析】试题分析:(1)H蛋白在成年个体的正常组织中低表达,选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,既能抑制癌细胞生长,又对正常组织细胞影响较小。由于H蛋白是一个跨膜蛋白,只要选择胞外区的基因进行构建,转入原核细胞表达并提纯即可获得相应抗原。(2)取经H蛋白处理的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合,化学诱导剂通常使用PEG,细胞融合的原理是细胞膜的流动性。(3)融合细胞需要用选择培养基筛选出既能分泌抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞。利用抗原抗体杂交技术来确定克隆生长的细胞培养孔中的上清液中是否含有相应的抗体。(4)培养杂交瘤细胞的方法有体外培养和小鼠腹腔内培养。(5)单克隆抗体具有特异性强的特点考点:动物细胞工程及单克隆抗体26(1)纤维素酶和果胶酶(2)叶绿体(3)保持原生质体完整性 细胞壁(4)双亲(或花椰菜和黑芥) 解离 漂洗(5)黑腐病菌【解析】试题分析:(1)细胞壁的主要成分是纤维素和果胶;过程是去除细胞壁,需要用纤维素酶和果胶酶。(2)根中不存在叶绿体,而叶片中存在叶绿体,故可以根据是否有供体的叶绿体存在来进行初步筛选。(3)原生质体没有细胞壁,如果渗透压不平衡会发生涨破的现象,为了保持原生质体的完整性,培养液要有适宜的浓度。原生质体需要经过细胞壁再生形成杂种细胞,然后再经过脱分化和再分化形成杂种植株。(4)染色体在显微镜下能观察到,要观察染色体型可以与双亲的进行比较,观察染色体要经过解离、漂洗、染色和制片后再使用显微镜进行观察。(5)在个体水平上可以通过对杂种植株进行黑腐病菌接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。考点:植物体细胞杂交27(1)传代培养(2)氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素 血清(或血浆)(3)细

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