《中国药典》2010年版元素分析方法应用--冉晓静.ppt

中国药典2010年版元素分析方法应用,冉晓静2010.12.27,主要内容,沉淀重量法容量滴定法比色、比浊、紫外-可见分光光度法、荧光分析法火焰光度法原子吸收分光光度法电感耦合等离子体发射光谱（ICP-AES或ICP-OES）和电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）离子色谱,沉淀重量法,沉淀重量法是利用沉淀反应，将被测组分转化成难溶物，以沉淀形式从溶液中分离出来的方法。所得沉淀最后以称定其重量的方法测定。,沉淀重量法,应用：复方氯化钠注射液中氯化钾含量测定钾与四苯硼钠作用生成四苯硼钾沉淀，经过滤洗涤干燥所得沉淀重量与0.2081相乘，即得供试量中KCl的含量。,容量滴定法,EDTA滴定原理:EDTA能与多种金属离子产生络合反应或称螯合反应，EDTA分子中的两个氮原子及四个羧氧原子可供配位，与金属离子相键合，同时生成由多个五元环组成的络合物分子。中国药典用来测定钙、锌、铝、镁、铋等阳离子含量。银量法滴定原理：利用某些阴离子能与银离子生成难溶性银盐。中国药典用来测定氯、溴、碘等银离子含量。,EDTA滴定钙含量,应用：非诺洛芬钙及其制剂（p457）、氯化钙及其制剂（p1010）、泛酸钙及其制剂（p375）、乳酸钙及其制剂（p482）、复方氯化钠注射液：在氢氧化钠碱性条件，以钙紫红素或紫脲酸铵为指示剂，乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定钙的含量。磷酸氢钙片在氨-氯化铵缓冲液（pH10.0）条件下，先加入过量的乙二胺四醋酸二钠滴定液，待待测离子完全络合后，过量的EDTA，以铬黑为指示剂，再用锌滴定液回滴定。乳酸钠林格注射液BP方法：,容量（电位）滴定法,EDTA滴定锌含量,应用：葡萄糖酸锌及其制剂、醋氨己酸锌及其制剂、硫酸锌及其制剂、枸橼酸锌及其制剂、复方十一烯酸锌软膏、炉甘石（主要成分为碳酸锌）：在氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)条件下，以铬黑T为指示剂，用乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定锌含量。,EDTA滴定铝含量,应用：硫糖铝及其制剂（p1005）、氢氧化铝及其制剂（p553）、二甲硅油片（p12）在醋酸醋酸铵缓冲液(pH6.0)条件下，先加入过量的乙二胺四醋酸二钠滴定液，待待测离子完全络合，过量的EDTA，以二甲酚橙为指示剂，再用锌滴定液回滴定。,EDTA滴定镁含量,应用：硫酸镁及其制剂（p1004）、复方铝酸铋胶囊及片（p587）在氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)条件下，以铬黑T为指示剂，用乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定镁含量。,EDTA滴定铋含量,应用：碱式碳酸铋及其制剂片（p1094）、胶体果胶铋及其制剂片（p852）、枸橼酸铋钾及其制剂片（p523）、复方铝酸铋胶囊（p587）以二甲酚橙为指示液2滴，用乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定铋的含量。,银量法滴定氯含量,应用：氯化钠，氯化钾，总氯量。,比色、比浊、紫外-可见分光光度法、荧光分析法,原理：利用某些元素在一定条件下，和特定的试剂作用生成有色的或具有荧光的物质，通过目视比色或在规定的波长处测定其吸光度或荧光强度的方法，进行元素限度的检查或含量测定。,比色、比浊,应用：重金属检查法：重金属是指在弱酸性（pH33.5）溶液中，能与硫代乙酰胺或硫化氢作用显色的金属杂质，如铅、银、汞、铜、镉、铋、砷、锑、锡、锌、钴、镍等。在药品生产过程中遇到铅的机会较多，铅又易积蓄中毒，故检查时以铅为代表。,比色、比浊,重金属检查法：一法：硫代乙酰胺比色法适用于溶于水、稀酸或乙醇等的药物。除用甲管标准铅溶液管与乙管供试液管外，中国药典2010年版加设丙管监控管（pb+供试品），要求丙管（监控管）中显示的颜色不浅于标准铅溶液管（甲管）时，方法适用，若丙管（监控管）呈色浅于甲管，则可能供试液中重金属杂质不呈游离状态存在或与供试药物络合或供试液pH值偏离3.5，重金属离子与硫代乙酰胺呈色变浅，甚至不呈色，因而未被检查出，试验无效，应取样按第二法检查。,比色、比浊,重金属检查法：二法：炽灼后的硫代乙酰胺比色法适用于溶于含芳环、芳杂环以及难溶于水、稀酸或有机溶剂的药物，或受某些因素干扰不适宜采用第一法检查的药品。供试品经有机破环，处理配成溶液后同一法操作。,比色、比浊,重金属检查法：三法：硫化钠比色法适用于碱溶性药物，同中国药典2005年版附录未加监控管。三种方法显示的结果均为微量重金属的硫化物微粒均匀混悬在溶液中所呈现颜色。,比色、比浊,应用：铁盐检查法：硫氰酸盐法。适用于微量铁盐的限度检查。原理是利用硫氰酸盐在酸性溶液中与供试溶液中的三价铁盐生成红的可溶性硫氰酸铁的配位化合物，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。,比色、比浊,应用：氯化物检查法：适用于微量氯化物的限度检查。氯离子在硝酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银的浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液在同样条件下生成的氯化银浑浊液比较，测定供试品中氯化物的限量。,比色、比浊,应用：硫化物检查法：原理为微量硫化物和稀盐酸作用产生硫化氢气体，遇醋酸铅试纸产生棕色斑点，与一定量的标准硫化钠溶液在同一操作条件下产生的棕色斑点比较，以检查供试品中硫化物的限量。,比色、比浊,应用：砷盐：一法：古蔡氏法（Gutzeit），原理是利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，判断药物中含砷盐的限量。,紫外-可见分光光度法,砷盐：二法：二乙基二硫代氨基甲酸银（Ag-DDC）比色法。原理是利用砷化氢与Ag-DDC反应，使Ag-DDC中的银还原为红色的胶态银，比色或照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定比较吸光度。,紫外-可见分光光度法,应用：锌限度检查：原理为微量的锌在pH9.0的条件下，与锌试剂（邻2-(2-羟基-5-磺基苯偶氮)亚卞基肼基苯甲酸）溶液反应，生产蓝色化合物，在620nm的波长处测定吸光度，与标准锌溶液同法测得的吸光度相比较。,紫外-可见分光光度法,应用：氟检查法：用于检查含氟有机药物中氟的量，原理为有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏为无机氟化物，在pH4.3时，氟离子与茜素氟蓝和铈离子以1：1：1结合成蓝紫色水溶性螯合物；用氟对照溶液经同法处理后，照紫外-可见分光光度法，在610nm的波长处分别测定吸光度。,紫外-可见分光光度法,应用：硒检查法：用于检查某些药物在生产工艺中未能除尽的微量杂质的一种限度检查。原理为采用氧瓶燃烧法将供试品燃烧分解，使结合在骨架上或被吸附的微量硒成为硒的氧化物，利用盐酸羟胺，将Se6+还原为Se4+，在pH2.00.2的条件下与二氨基萘作用，生成4，5-苯并苯硒二唑，用环己烷提取后，照紫外-可见分光光度法，在378nm的波长处测定吸光度，与硒对照溶液同法测得的吸光度相比较。,荧光分析法,应用：氯化钠（p1011）的铝盐测定法在醋酸醋酸铵缓冲液(pH6.0)条件下，铝盐与8-羟基喹啉反应生成发蓝光的8-羟基喹啉铝，照荧光分析法法，在激发波长392nm、发射波长518nm的波长处测定荧光的强度，与铝对照溶液同法测得的荧光的强度相比较。,火焰光度法,可用于钠、钾、锂、（钙）含量测定发射光谱，利用火焰的热能使某种元素的原子激发发光，通过检测其光谱能量的强弱，可求出物质中某元素的含量，,火焰光度法,应用：中国药典2010年版三部附录I钾离子测定法、附录J钠离子测定法人血白蛋白、冻干人血白蛋白,原子吸收分光光度法（AAS）,原理：测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素，系待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产生的原子蒸汽时，被蒸汽中待测元素的基态原子所吸收，通过测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品中待测元素的含量。遵循分光光度法的吸收定律。原子化器有：火焰原子化器、石墨炉原子化器、氢化物原子化器、冷原子原子化器。定量方法有标准曲线法、标准加入法、单点法、用于杂质限度检查时的b(a-b)法。,原子吸收分光光度法（AAS）,应用：肝素钠（p366）：钠含量的测定：火焰原子化器、标准曲线法、其中的氯化铯为消电离剂，在供试品溶液和钠标准溶液中加入等量的氯化铯目的是消除电离干扰，因钠含量较高，采用次灵敏线330.3nm(灵敏线为589.0nm),原子吸收分光光度法（AAS）,应用：口服补液盐散（）(p31)总钠、钾含量测定：火焰原子化器、标准曲线法、其中的氯化锶为消电离剂，采用灵敏线为589.0nm。,原子吸收分光光度法（AAS）,应用：乳酸钠林格注射液(p484):氯化钠，氯化钾，氯化钙含量测定：火焰原子化器、标准曲线法、三种元素均采用了灵敏线。其中测定钙时，在供试品溶液和钠标准溶液中加入等量的镧溶液，镧为释放剂，目的是消除化学干扰。乳酸钠林格注射液:USP和BP标准,原子吸收分光光度法（AAS）,应用：葡萄糖酸钙片（p932）：溶出度火焰原子化器、单点法，采用灵敏线422.7nm。,原子吸收分光光度法（AAS）,应用：维生素C（p901）:铁，铜检查：火焰原子化器、用于杂质限度检查时的b(a-b)法。,原子吸收分光光度法（AAS）,应用：氢化大豆油（p1211）、氢化蓖麻油(p1212)：镍限度检查：石墨炉原子化器、分别采用标准加入法和标准曲线法、其中在供试品溶液和镍标准溶液中加入的硝酸镁和磷酸二氢铵为基体改进剂，目的是提高灰化温度，消除物理干扰。,原子吸收分光光度法（AAS）,应用：中国药典2010年版一部附录B铅、镉、砷、汞、铜测定法中国药典2010年版一部正文：阿胶（p175）、丹参（p70）、三七总皂苷（p1）、紫雪散（p1152）等品种的质量标准收载该项目。铅、镉测定法采用石墨炉原子化器、标准曲线法、其中在供试品溶液和铅标准溶液中加入的的硝酸镁和磷酸二氢铵为基体改进剂，目的是提高灰化温度，消除物理干扰。背景校正方式为氘灯或塞曼效应，目的是为了消除光谱干扰。,AAS-铅、镉、砷、汞、铜测定法,砷测定法采用氢化物原子化器、标准曲线法。其中在供试品溶液和砷标准溶液中加入的碘化钾和抗坏血酸为还原剂，使As5+还原为As3+。以含硼氢化钠的0.3%氢氧化钠溶液（临用前配制）作为还原剂，盐酸溶液（1100）为载液，氮气为载气，背景校正方式为氘灯或塞曼效应，目的是为了消除光谱干扰。,AAS-铅、镉、砷、汞、铜测定法,汞测定法采用氢化物原子化器、标准曲线法。以硼氢化钠作为还原剂，将无机汞和有机汞全部还原为Hg0，产生的汞蒸汽以盐酸溶液（1100）为载液，氮气为载气带到原子吸收池内进行测定，背景校正方式为氘灯或塞曼效应，目的是为了消除光谱干扰。,AAS-铅、镉、砷、汞、铜测定法,铜测定法采用火焰原子化器、标准曲线法。,电感耦合等离子体发射光谱（ICP-AES或ICP-OES）,中国药典2010年版一部附录p69原理:电感耦合等离子体(ICP)又称感耦等离子体或高频等离子体，电感耦合等离子体发射光谱法是以等离子体为激发光源的原子发射光谱方法，可进行多元素分析。适用于各类药品中从痕量到常量的元素分析，尤其适合矿物类中药、营养补充剂等药品中的元素定性定量测定。,电感耦合等离子体发射光谱（ICP-AES或ICP-OES）,样品由载气(氩气)引入雾化系统雾化后，以气溶胶形式进入等离子体的中心通道，在高温和惰性气氛中被充分蒸发、原子化、电离和激发，使所含元素发射各自的特征谱线。根据各元素特征谱线的存在与否，鉴别样品中是否含有某种元素(定性分析)；由特征谱线的强度测定样品中相应元素的含量。,电感耦合等离子体发射光谱（ICP-AES或ICP-OES）,定量方法有标准曲线法（内标校正的标准曲线法）、标准加入法。,电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）,原理：电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）是以等离子体为离子源的一种质谱型元素分析方法。主要用于多种元素的同时测定，并可与其他色谱分离技术联用，进行元素价态分析。本法具有很高的灵敏度，适用于各类药品中从痕量到微量的元素分析，尤其以痕量重金属元素的测定。,电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）,样品由载气(氩气)引入雾化系统雾化后，以气溶胶形式进入等离子体的中心区，在高温和惰性气氛中被去溶剂化、汽化解离和电离，转化成带正电核的正离子，经离子采集系统进入质谱仪，质谱仪根据质核比进行分离，根据元素质谱峰强度测定样品中相应元素的含量。,电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）,定量方法有标准曲线法（内标校正的标准曲线法）、标准加入法。,电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）,应用：中国药典2010年版一部附录B铅、镉、砷、汞、铜测定法中国药典2010年版一部正文：阿胶（p175）、丹参（p70）、三七总皂苷（p1）、紫雪散（p1152）等品种的质量标准收载该项目。,原子光谱方法比较,在原子光谱分析领域，按分析灵敏度高低排列的顺序是：电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）、石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)、电感耦合等离子体发射光谱（ICP-OES）、火焰原子吸收光谱法(FAAS)、火焰光度法。从分析检测的线性范围看，GFAAS最差，在两个数量级以内，ICP-MS最好，高达八个数量级。,离子色谱法（IC）,中国药典2010年版一部附录p40，中国药典2010年版二部附录p38、内容一致。离子色谱是高效液相色谱的一种，是分析阴离子和阳离子的一种液相色谱方法，采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定。,离子色谱法（IC）,离子色谱法常用于无机阴离子、无机阳离子、有机酸等的定性和定量分析。它的分离机理主要为离子交换，即基于离子交换树脂上可解离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换；离子色谱的其他分离机理还有形成离子对、离子排阻等。,离子色谱法（IC）,色谱柱：一种为有机聚合物载体的，这类载体的表面通过离子键附聚了大量具有阴离子交