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文档简介

实验动物染色体标本的制备与观察,一、实验目的,初步掌握动物骨髓细胞染色体标本制备的基本过程，了解操作步骤的原理；了解一些哺乳动物染色体的数目和特点。,二、实验原理,1、染色体的中期阻断法,材料:具有高度分裂能力的细胞植物细胞染色体制备:常规的压片法动物细胞染色体制备:滴片法,秋水仙素柠檬酸钠KCl溶液固定剂姬姆萨染液姬姆萨（Giemsasstain；天青-伊红）,2、几种试剂的作用,一些常见动物的染色体数目：家兔：44野兔：48猪：38黄牛：60马：64驴子：62骡子：63猩猩：48金丝猴：44猫：38狗：78,3、小白鼠染色体的特点：呈“U”型，全部为端着丝粒染色体；40条（19对常+1对性）,三、实验材料与仪器,1、材料：小白鼠2、试剂：2%柠檬酸钠、0.1%秋水仙素（现用现配）、Giemsa染液（pH6.8）0.4%Kcl溶液0.067mol/L的磷酸盐缓冲液（pH6.8）1：10Giemsa磷酸盐缓冲液（pH6.8）固定液：甲醇：冰醋酸（3：1）3、器材和仪器：注射器解剖器移液管载玻片盖玻片光学显微镜,四、实验内容,1、注射秋水仙素（按4g/g的剂量）2、取骨髓细胞：股骨，剪掉两端，2%柠檬酸钠冲洗，离心管收集，取下针头，反复吸打3、低渗：0.4%Kcl，810ml，370.5，10min；1000rpm，8min4、固定：固定液5ml，注意不要冲动细胞团块（？），轻轻吸打细胞，静置20min。固定23次。5、滴片：干净、冷、湿的载玻片上，23滴，文火烘干。6、染色:Giemsa染液,10min。7、镜检。（绘图）疑问：有的染成蓝色，有的染成紫红色，为什么？,颈椎脱臼法,股骨,取骨髓细胞,滴片,图:小白鼠染色体,拓展实验,1、实验前不给小白鼠腹腔注射秋水仙素（每组2只）2、注射秋水仙素后2h、4h、6h、8h后再进行试验,五、作业及思考题,1、制备的小白鼠染色体标本，分裂相是否多，染色体分散程度如何？有什么不足处，原因何在？2、如果在实验前不给小白鼠腹腔注射秋水仙素，所制备的染色体制片会出现怎样的情况？3、在该实验
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