临床基因扩增检验的质量保证

临床基因扩增检查的质量保证，卫生部临床试验中心二进制名，定义，质量保证(QA)提供了一个产品或服务充分满足特定质量要求所需的有计划的、系统的措施。internalqualitycontrol(IQC)允许实验室人员持续评估此实验室工作的可靠性水平，监控和控制此实验室工作的准确性，并采取一定的方法和步骤，以提高室内常规工作中批内和批间示例测试的一致性。定义，实验室间质量评价(ExternalQualityAssessment，EQA)为客观比较一个实验室的测量结果和目标值之间的差异，外部机构采取了一定的措施，持续客观地评价实验室结果，发现错误并修正结果，使各个实验室之间的结果可以比较。这不是用于确定实时测量结果的可接受性，而是对实验室运行和实验方法的回顾性评价。如果eka用于评估实验室运营，以进行实践或实验室认证，则通常用实验室能力验证(Proficiencytesting，PT)来描述。在以前的文献中，eka经常描述室内质量控制。定义，放置(Run)在相同条件下获得的一组度量。平均(Mean)标准差(SD或s)变异系数(cv)、定义、准确度(Accuracy)量测目标值与其实际值的一致性等级。准确度不能用数字直接表示，通常是用不准确间接测量的。如果对分析目标重复多次测量，则结果平均值与其true或参照目标值之间的差异，即偏差是测量的不准确之处。“偏差”(Bias)测量值与可接受参照值之间的差异。定义“精度”(Precision)在特定条件下获得的独立测量结果之间的一致性程度。与精度一样，精度也间接表示为非密度。非密度测量的主要原因是随机误差，具体表示为标准差(SD)和/或变异系数(CV)。SD或CV越大，迭代测量的不连续性越大，精度越低，反之亦然。定义，正态分布质量控制以相同的方法在不同的时间重复多次测量时，如果测量数据足够多(例如横轴，纵轴表示大量测量中相应测量值的数量)，则两个低、中高度、所有测量值的平均值、左右对称的，定义，正态分布的基本统计意义可以用平均值()、标准差(s)和概率来说明。临床基因扩增检测实验室日常测量阶段，标本收集：可选测量项目，标本收集和保存。实验室测量：接受标本、贴标签、样品处理、核酸扩增、产品检测、测量的有效性以及临床诊断和治疗价值。报告和解释：结果发布、结果解释和临床管理。质量保证、室内质量管理和室间质评价之间的关系、临床标本收集、运输、保存和质量管理、标本收集标本保存配送、标本收集、标本收集时间影响扩增测试结果的标本收集部分的准备标本类型和收集抽样质量评价抽样和运输容器标本收集的污染预防、标本收集时间对扩增测试结果的影响、疾病开发过程中标本收集太早或太晚会产生不正当结果。标本收集部位的准备、血液标本收集分泌物标本：收集部位的清洗和消毒可以去除污染的微生物或其他杂物，但适当、过度清洁和消毒会去除或销毁目标微生物，因此，标本收集部位的准备必须由训练有素的人员进行。标本类型及采集量，标本类型：血清(浆)，分泌物，痰，大便，尿液，脑脊液等。标本收集量：应基于测量的病原体。一般来说，如果标本的数量足以培养病原体，那么其数量将足以进行核酸提取和扩增检测。定量测定中，标本的收集要求更为精密。抽样质量评价，血清(浆)标本：溶血，脂质等；分泌物，痰：细胞构成，所需种类的细胞数，总核酸等由评价内容组成。评价方法：包括肉眼观察、显微镜观察、化学分析等。取样和运输容器、棉签等标本收集材料应一次性使用；取样和运输容器必须是密封的一次性无菌装置。取样中使用的防腐剂、抗凝剂及相关试剂材料不得影响核酸扩增和检测过程。在标本收集过程中要注意防止污染，收集过程中要特别注意污染，防止工人的头发、表皮细胞、痰等混在一起；对于玻璃器皿，应通过高压杀菌禁用可能的RNase。标本保存，目标核酸，特别是RNA，在核酸酶的作用下迅速分解，所以标本保存对核酸扩增测定的效果至关重要。GITC作为稳定剂保存标本，可以在室温下稳定标本约7天。标本保存，临床体液标本应长期保存在-70 。提取核酸后，用于DNA扩增分析的样品可以在10mol/ltr is，1 mmol/led ta (ph 7.5 8.0)缓冲液中储存到4 。用于RNA扩增分析的样品应在上述缓冲液中保存在-80 或液氮中。核酸的乙醇沉淀物可以在-20 保存。运送标本，采集标本，要尽快送到试验实验室。可以在室温下携带或邮寄包含RNA测定用血清(纸浆)样品和DNA测定用GITC抗凝剂等适当稳定剂的样品。实验室应根据受试核酸的特性，适当规定各种临床标本的运输条件。临床基因扩增检测的室内质量管理，测定前质量管理核酸样品准备和质量管理统计质量管理质量管理评价，测定前质量管理，实验室设施，仪器设备和管理理想试剂和操作方法人员培训，实验室设施，设备和管理，临床基因扩增检测实验室足够合理的空间，良好的照明和空调设备；实验室设备要保养好，实验用品要满足相应的要求。校准校正器？过滤器插头槽的使用和质量检查？离心机？热循环机？鱼缸盒和/或恒温干浴器？微型平板阅读器和洗衣机？基因扩增仪器设备质量控制，使用过滤器塞吸入头并进行质量检查，首先准备含有1 2%甘油和色素(如甲基橙)的水溶液，如果吸入头的最大尺寸为100l，则将样品采集体积调整为110 120 l，复盖吸入头后吸收上述着色液体。如果吸头质量好，则有色液体不应出现在过滤器插头上，否则表示过滤器插头不严格。使用过滤器塞吸入头和质量检查测试过滤器塞吸入口的质量：首先纯化多个强阳性和多个阴性核酸标本，然后用扩大样品所需的体积设定样品采集，使用评估中的过滤器塞吸入口对强阳性样本(10个阳性样本吸入模拟)进行10次前后10次，并将最后的吸收液添加到具有放大反应液的管内； 换个新的吸入口，连续将10个声音样本拖到10个放大反应管的过程，重复3次，强烈的阳性样本必须是强阳性，如果阳性弱或阴性，则吸入口可能含有放大抑制剂。 所有语音样本都必须是阴性，阳性表示吸附头不能有效防止气溶胶对样品采样器的污染。核酸提取用离心管质量检查、离心管PCR抑制物质检查等，放大装置孔间温度的重复性和均匀性检测方法使用热电偶探头、微伏转换器和自动图标记录仪构成孔间温度变化超过1 时可测量的放大加热模块孔内温度监测记录系统。TE将装有缓冲液和石蜡油的放大反应管放置在放大装置的每个孔中，热电偶探头通过放大反应管帽插入缓冲液中，然后按照程序进行常规PCR放大，如果加热模块为96孔，则必须测量至少12个不同位置孔的温度，在整个放大过程中，将热电偶探头移动到上述其他孔以监视温度，但是每个孔内的温度监控必须至少有一个放大周期。放大气管孔间温度的反复均匀检测方法，第二种方法不是直接测量孔内温度，而是通过放大功能间接知道孔间均匀性，具有一定浓度的积极质量管理样品的放大反应管对放大装置的每个孔进行一般放大检查，观察结果的一致性程度，如果一个或多个孔的结果有问题，则决定其中一个或多个孔是否会重复产生假语音结果，如果是，则应表明该孔的热传导有损伤。理想试剂及其工作方法，工具包的质量检查定量测量是构成阶段的变异和的平方根(SD)=常识的SDa、SDb、SDc是阶段a、b、c等的标准偏差(例如试剂的制备、样品收集、核酸提取、放大和产物检测等)，理想的试剂和操作方法，提高测量精度的措施，包括试剂的准备、标本收集、核酸提取、测量方法和仪器操作的“标准操作程序”(SOP)、人员培训、临床基因扩增检查的操作，主要是从标本处理中提取核酸的步骤，其用途主要是使用助听器，尽管简单的操作，但仍是微量操作知道又知道。核酸样品制备、扩增检测和质量管理，一般核酸提取试剂促进目标核酸在细胞内释放的原理核酸分离纯化，目标核酸提取质量临床标本和核酸提取中可能存在的抑制和干扰物质核酸样品制备和扩增检测质量管理产品检测质量管理，一般核酸提取试剂是目标核酸在细胞内释放的原理，目标核酸可以与宿主细胞集成的原理，细胞质内的多种组成是细菌或病毒原生动物或真菌细胞内的目标核酸存在于细胞内等细胞内，如果这些细胞破裂，目标核酸也可能存在于细胞外。 使用三吨-100等洗涤剂分解细胞，然后用蛋白质分解酶(蛋白酶k)消化与核酸结合的蛋白质，把目标核酸释放到细胞内。核酸的分离和纯化，核酸的分离和纯化，就是去除蛋白质，脂质等妨碍核酸扩增的物质。经典方法硅吸附法对于商业核酸提取工具包，在临床实验室使用之前，必须评估相应的核酸提取纯度和效率。临床标本及核酸提取中可能存在的抑制和干扰物质，临床标本：血清或血浆中的血红素及其代谢产物，痰中酸性多糖和糖蛋白成分，分解目标核酸的核酸酶等。核酸提取：很多洗涤剂，例如二胺四乙酸(EDTA)、硫酸十二烷基(SDS)，还有有机溶剂，例如盐酸异硫氰酸酯胍和胍、苯酚、氯仿和乙醇。临床标本中可能存在的抑制/干扰物质的质量控制措施，质量控制措施：使用内部质量控制(internalcontrol，IC)(通常为内部标准)的方法包括竞争和非竞争内部标准两种。核酸提取和扩增效果的质量控制，弱阳性质量控制样本(矩阵与正在测试的样本相同):至少一个，最终测试结果应综合反映核酸提取和扩增测试的效果。语音质量控制样品(矩阵与测试对象样品相同):至少有一份，放大测量可以确定核酸提取过程中是否有污染。，统计质量管理，确定理想的室内质量管理样品条件，设置质量管理样品，数量和排序顺序统计质量管理的特性统计质量管理方法，理想的室内质量管理样品条件，矩阵和正在测试的样品；测试对象物质的浓度接近测试的决定水平。稳定；稳定。已设置目标值或预期结果。没有已知的生物传染危险。单一批可以大量获得。质量控制样品设置、数量和排序顺序，在每个测试中使用多少质量控制样品，在临床样品中并排放在哪个位置最合适？理论上，为了最大限度地找出实验的随机化和系统误差，需要在几个临床标本中插入一个质量管理标本，但考虑到目前国内的实际情况和成本效益，一般来说，临床基因扩增试验的标本不是特别大，那么质量测量需要一个接近切-切-关的弱阳性和阴性质量管理样品。定量测量应根据测试的测量范围采用高、中、低三种浓度的质量控制样品。测量中的排列顺序可以列在标准品或校准品之后，临床样品之前。这是监视临床基因扩增检查室质量管理的独创性，即污染发生的语音质量管理的设置。应包括一个语音原听样本、一个从样本核酸提取过程中获取的ATC，以及只包括放大反应混合液的管子。语音原听质量控制样品功能，监控实验室转移放大产物的污染；实验操作引起的样本之间的交叉污染；放大反应试剂的污染。在样本核酸提取过程中引入的ATC的基本功能与声音源厅质量控制样品相同，但气质是水，不含可能存在于声音源厅质量控制样品中的放大抑制剂，因此对污染的反应更敏感，不能替代源厅声音样品。仅包括放大反应混合液管功能，监控放大试剂是否污染，识别强烈污染。要确认实验室是否有污染，请打开一个或多个ATC作为样品准备区域30 60分钟，加入放大反应混合物，用水代替核酸样品放大，这是阳性的，如果这里只包含放大反应混合液的管子是阴性，说明实验室之前放大产物的存在。统计质量管理的特点，检验错误有两种类型。一个系统错误，一个随机错误。系统误差通常表现为质量控制物测量平均值的漂移，由工作人员使用的仪器、试剂、标准或校正器的问题引起，这些误差可以通过上述措施方法控制和排除。随机误差表现为测量SD的增加，主要是实验操作者的操作等随机因素造成的，很难完全避免和控制。统计质量管理的功能，统计质量管理的功能，就是发现错误发生的原因，并采取措施防止它发生。在实施统计质量控制之前，要最大限度地调整可控制的误差发生因素。这不是搞好室内质量管理的前提，而是保证常规检查工作质量的前提。统计质量管理方法，基准衡量质量管理规则表示法和Levey-Jennings质量管理图表定义方法Levey-Jennings质量管理图和Westgard多规则质量管理方法累计和(CUSUM)质量管理方法“立即方法”质量管理方法，标准确定，最佳条件如果RCV接近OCV或小于2OCV，则允许RCV。这是布局之间的变异。确定布局中的过渡；室内质量控制物质的测量精度评价。临床基因扩增检查IQC统计计算问题，质量控制样本扩展后，可以使用拷贝数/ml或IU/ml进行统计计算或数值计算。基因扩增结果的原始数值很大，用它对数值进行质量控制统计分析可能更方便。、质量管理规则的表示和定义、质量管理规则的表示质量管理规则的功能通常用符号AL表示质量管理规则的符号和定义、质量管理规则的表示，通常用符号AL表示质量管理规则。其中，a是质量控制衡量标准中超出质量控制限制的测量值的数量，l表示控制限制，通常为平均值或平均值1-3sd。如果质量控制衡量标准超出控制限制l，则可以将批衡量标准确定为不可控制。常用的13S质量管理规则(1表示原型的a，3S表示原式的l，平均3s)的确切含义是