疟疾诊断

疟疾诊断技术,曹俊疟疾室江苏省寄生虫病防治研究所,全球疟疾形势,每40秒就有1名非洲儿童死于疟疾！,全球一半以上的人口都生活在疟疾流行区每年2亿多人感染每年80多万人死于疟疾主要因恶性疟主要为非洲儿童,Bill and Melinda Gates Call for New Global Commitment to Chart a Course for Malaria Eradication (3E),Topic: 3EEliminationEradicationEnd,Gates Foundation Malaria Forum, 16-18 October, Seattle.,Science. 2007 Dec 7;318(5856):1544-5.,消灭疟疾！,疟疾防控策略,基本原则：早期诊断，规范治疗标准：疟疾病人在发生症状的24小时内接受正确、支付得起、规范的治疗。好处：治愈病人防止病情恶化减少传播,临床诊断: 根据症状实验室诊断: 查见原虫直接检测原虫（形态学） 显微镜镜检QBC method 检测抗原快速诊断(RDT): HRP-2, pLDH, Aldolase分子诊断 PCR, Real-time PCR and LAMP检测抗体 免疫荧光抗体试验(IFA)酶联免疫试验(ELISA),疟疾诊断方法,疟疾诊断,疟疾诊断,现场应用,实验室,临床诊断 显微镜 快速诊断 分子生物学 抗体检测 RDTPCR LAMP ELISA IFA,较常用 金标准 最有前景 很敏感 流行病学,临床诊断,常用于高流行区无需实验设备依据发热病史灵敏度不稳定特异性较差和类似症状疾病难以鉴别诊断,1、显微镜镜检,厚薄血片,厚薄血膜的比较,厚血膜裂解的红细胞血量较大0.25 l 血液/100 视野血样较浓缩敏感性更高原虫密度计数较难进行虫株鉴别,薄血膜单层，固定的红细胞血量较少0.005 l 血液/100 视野更有利于形态鉴别需花更多时间读片密度低，较易漏诊,抗体检测方法 流行病学调查和监测，不能确诊 抗原检测方法 可作确诊 快速免疫诊断试条(RDT) 操作简单、快速,有望替代镜检,2免疫学检测,Stages of development of Plasmodium falciparum at which antigens detected by malaria rapid diagnostic tests are produced.,靶抗原,疟原虫乳酸脱氢酶 pLDH泛种, 恶性疟特异性, 间日疟特异性抗体疟原虫死亡后即消失更准确反映原虫存活状态具有评估疗效的潜在价值三日疟，卵形疟依旧在研发中稳定性？,恶性疟富氨酸蛋白HRP2只能用于恶性疟疟原虫死亡后依旧长时间存在,间日疟特异性依旧在研发中,醛缩酶Aldolase泛种特异性疟原虫死亡后即消失更准确反映原虫存活状态稳定性？,快速免疫诊断试剂盒 (RDTs)工作原理,如何使用RDT,如何使用RDT,如何使用RDT,如何使用RDT,如何使用RDT,如何使用RDT,RDT example 1: ParaSight F test,RDT example 2: OptiMal Assay Kit,RDT example 3: Amrad ICT,RDT,优点：1. 快速便携2. 无需专门设备采购RDT需考虑的因素：1. 用于检测的虫株2. 使用地区流行情况3. 最终用户4. 产品质量,WHO测试结果,Pf,Pv,Malaria Rapid Diagnostic Test Performance- Results of WHO product testing of malaria RDTs: Round 2 (2009),常采用PCR方法 检测特异性、敏感性优于镜检 检测成本高于镜检 主要用于特殊诊断和抗药性检测,3基因检测,P. malariae,P. ovale,Marker,P. vivax,bp,P. falciparum,PCR检测,检测样本：抗凝血(200 l) 或滤纸血(5 l)检测灵敏性：全血血样：0.1 parasite