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文档简介

国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理实验器材：培养箱，10只移液管，12只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，电炉，石棉网，铁架台，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品： 磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl实验步骤：一：10只移液管，12只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，45个平皿，500ml大烧杯1个，100ml量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。用酒精灯擦拭超净台，紫外消毒30min二：1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。4：灭完菌后放入超净台中备用。三：1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。3：取4只试管，编号144：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取细菌溶液，加入3中，摇匀以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。9：取4只平皿，编号1410：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取的菌液置于4只平皿中，加入摄氏度温度下的培养基，约厚度。缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。11：将培养基在6摄氏度条件下培养12小时。12：取出培养皿，选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数。四：实验结果（记得在操作过程和得到结果时拍照）1号，2号菌落个数多不可计，舍弃4号平皿中菌落数目小于10 cfu ，舍弃3号平皿中菌落分布较均匀，数3号中的菌落数，一共有210个 cfu 。计算样品中细菌浓度为：1.05 105 Cfu/ml点评超净台中的实验步骤讲述详细，明确，不错。前面的步骤叙述有点乱，建议按照如下标题重新调整顺序。实验步骤：仪器清洗将烧杯，培养皿、试管等仪器用洗衣粉清洗，超声5min.然后用清水清洗，超声5min,最后用三蒸水清洗，放入烘箱中烘干。培养基配制精确称量。放入锥形瓶中，加入。mL蒸馏水，摇匀3，灭菌 包扎、灭菌，烘干备用超净台中的操作（如上）除了实验步骤和结果，还要有讨论和注意事项例如：实验讨论：1、 评价该方法（操作简易程度，灵敏度如何，适用性）2、 为何选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数？注意事项比如各种仪器的使用注意事项，以及保
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