母猪繁殖障碍疾病的血清学调查报告

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/11母猪繁殖障碍疾病的血清学调查报告母猪繁殖障碍疾病的血清学调查报告摘要随着猪场规模化、集约化程度的不断提高,猪病的种类也在不断增加,特别是近年来的母猪繁殖障碍性疾病严重制约生猪产业的发展。2004年我们引进了带有外种血缘的外种猪洋二元母猪，进行了优良品种推广，结果80的猪场母猪普遍出现第一胎发生流产、早产、死胎，新生仔猪和断奶仔猪发病率和死亡率增高，高达20，而母猪一般无临庆症状，对这情况我们凝似是母猪繁殖障碍性疾病，故进行了血清调查。共采血抽样237份，分离血清212份，并对分得的212份血清全部进行蓝耳病（PRRS）检测，其中阳性80份，阳性率；对其中的160份血清进行了伪狂犬（PR）检测，160份进行了猪瘟（HC）检测，160份血清进行了细小病毒（PPV）检测。结果表明一十三个猪场均有以上母猪繁殖障碍病存在。由此可见母猪繁殖障碍病在我县外种猪场已普遍存在。关键词母猪繁殖与呼吸综合征调查血清学检测ASHOGFARMSHAVEINCREASEDINBOTHSIZEANDEFFICIENCY,SOHAVEHOGDISEASETYPES,INRENCENTYESRS,THEPROBLEMHASBEENESPECIALLYSERIOUSAMONG精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/11BREEDINGSOWS,WHEREDISEASEHASINCREASEDINFERTICITYANDNEGATIVELYAFFECTEDTHEDEVELOPMENTOFTHEHOGBREEDINGINDUSTRYIN2004,BLOODWASCOLLECTEDFROM237SOUSFROMTHESE,212SAMPLESOFSERUMWERESUCCESSFULLYPRODUCEDANDTESTEDFORBLUCEARPISEASEPRRSTHEPOSITIVETESTRATEWASPERCENT80POSITIVESAMPLESALSOTESTSFORTHREETYPESOFDISEASEPORCINEPSEUUDORABIESPR,SWINEFEVERHC,ANDWICROSCOPICVIRALINFECTIONPPVWEREPERFORMED,EACHTESTON160OFTHESAMPLESSOWPORCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORY母猪繁殖障碍疾病是近年来危害母猪的一种主要的疫病，现已被广范受到人们的重视，它以妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔、畸形胎和母猪不育、配不上种为主要特征的一类疾病。此病主要包括猪瘟HC、猪伪狂犬病PR、猪细小病毒病PPV、繁殖障碍与呼吸综合征PRRS和猪乙型脑炎JE等几种病。2004年我们对存在有明显繁殖障碍病的13个猪场的237母猪头进行采血，分离血清212份，并对分得的212份血清全部进行了检测，对其中的160份血清进行了猪伪狂犬、猪细小病毒检测，并根据检测结果对母猪繁殖障碍原因进行了分析总结，现将详细情况分述如下。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/111材料和方法材料被检血清被检血清来13个母猪场，耳静脉采血，3600转/MIN分离血清，待检。主要诊断试剂蓝耳病ELISA试剂盒由美国IDEXX公司提供；猪瘟诊断抗原及阴、阳性血清由兰州兽医研究所提供；猪伪狂犬LAT诊断液试剂盒由华中农业大学提供；猪细小病毒LAT诊断液试剂盒由华中农业大学提供。方法母猪繁殖于呼吸综合症方法间接ELISAA采样常规采血，分离血清，无腐败、溶血、凝块和沉淀。B准备A试验前将所有试剂从冰箱中取出，置室温下达到室温，并轻轻摇匀，用后立即放回冰箱。B将达到室温并完全溶解的洗液深缩用灭菌水或去离子水稀释10倍。C将待检血清用稀释液进行40倍稀释；注意匆将阳性精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/11/阴性对照血清稀释。C取出抗原孢被的96孔板（该板的1、3、5、7、9、11列孔包被的PRRS抗原，2、4、6、8、10、12列孔包被的正常MARC145细胞抗原），在工作表上标记好样品的位置。D取100UL阴性血清分别加入C1、C2、D1、D2孔中。E取100UL阳性血清分别加入A1、A2、B1、B2孔中。F取100UL稀释的待检血清分别加入相邻的PRRS抗原孔和MARC145细胞抗原孔（NHC）中。H在室温下孵育30MIM。L将反应板孔里的液体倒入废液缸，并在吸水纸上扣干。J每孔加入300UL洗涤液（含TWEEN20的PBS），置室温约3MIM，弃去孔中液体，重复35次，最后一次在吸水纸水轻轻扣干。K每孔加入100UL酶标抗体复合物，在室温下孵育30MIM。并利用此空隙，取等量底物浓缩液和底物稀释液混匀（如）。L重复I、J操作。M每孔加入100UL稀释好底物溶液，在室温下孵育15MIM。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/11N每孔加入100终止液O用酶联免疫检测仪于650NM波长下测定各孔的吸光度值。Q结果判定APCPRRSNCPRRS，试验方成立。BS/P，样品血清PRRS抗体阳性；S/P，样品血清PRRS抗体阴性。猪瘟检测方法正向血凝试验A取一洁净玻片，以蜡笔划成34C小格，如下图血清号第1格第2格第3格第4格阳性血清对照阴性血清对照血清样品1血清样品2B试验前，先将待检血清、标准血清和抗原置于室温，使其达到20。B将待检血清、标准血清按上表中的量，垂直接触玻片分别加到各方格内。C摇匀抗原，每一血清格内分别垂直加入抗原。D自血清格开始，用牙签将抗原与血清完全混合，摊开直径2CM左右，依次至、血清格，一个血清样使用一牙签。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创6/11E轻轻摇动玻片后，室温静置58MIN。春冬季节室温较低时，可置于30左右的温箱中。F记录结果出现大凝集片或小粒状物，液体完全透明，即100凝集。有明显凝集片和粒，液体几乎完全透明，即75凝集。有可见凝集片和颗粒，液体不甚透明，即50凝集。猪伪狂犬检测方法乳胶凝集试验操作步骤取待检样品、阳性/阴性对照血清和稀释液各一滴，分别置于玻片上，各加一滴乳胶抗原，用牙签或火柴棍搅拌，并轻轻摇动12MIN后，于35MIN内观察结果。也可将血清作倍比连续稀释，每个稀释度加乳胶抗原进行定量分析。C判定结果A所有对照成立，即阳性血清呈“”，阴性血清和稀释液呈“”，试验方有效。样品出现“”以上者为阳性。猪细小病毒检测方法乳胶凝集试验。2调查内容流行病学调查通过查阅记录，调查种源、胎次，发病的季节性。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创7/11饲养管理调查主要包括饲料质量，营养成份，有无霉变；有无环境、机械等不良因素引起的，防疫、免疫、消毒是否落实到位。临床病例剖解包括对繁殖母猪的临床检查及对发病母猪所产部分弱仔及新生病仔猪的病理剖检观察。血清学检测对采得的212份血清样品进行蓝耳病抗体检测和部分血清的伪狂犬、猪瘟、猪细小病毒检测。2检测结果及讨论发生繁殖障碍的母猪有长白、约克及长白约克，发病母猪没有明显的品系差别；发病的胎次主要集中在第一胎，在第一胎过后，很多母猪不再表现明显的繁殖障碍病说明在第一胎过后产生了抗体对该病有一定的免疫保护力；发病没有季节性，一年四季均可发病；发病猪主要表现产死胎、木乃伊胎、弱仔和新生仔猪发病死亡。猪场的饲料基本上都统一饲喂母猪专用料，不存在霉变和质量问题，也无环境或机械因素引起的流产和死胎。在采血检查时除两家猪场拿不出严格的免疫记录档案外，其他猪场都按免疫程序进行了免疫，并做到定期消毒。剖检弱仔和新生病仔猪，大体表现一致，体表贫血苍白，皮下脂肪多黄染，肾呈土黄色，在表面有小出血点，有的淋巴结水肿出血呈大理石样状，心包积液，小叶精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创8/11性肺炎，肝褐黄色。血清学检测结果母猪繁殖障碍疾病血清学检测统计表猪场蓝耳病伪狂犬细小病毒繁殖障碍病史样品数阳性数阳性率样品数阳性数阳性率样品数阳性数阳性率1场351014814611头流产、死胎、木乃伊胎2场3271710178记载不详3场145141014914头流产、死胎、木乃伊4场2014201420164头发流产5场26131311139记载不详6场1321361379头流产、死胎、弱仔、木乃伊、7场9196951配不上种、1头产死胎、7头流产、弱仔8场11011811811头流产、死胎、木乃伊、弱仔9场12712612712头流产、死胎、弱仔、木乃伊10场7276747死胎、木乃伊精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创9/1111场7342437头发生过流产、死胎、木乃伊12场24162420241724头发生过流产、死胎、弱仔13场2022212头后备发病猪合计21280160109160100110头繁殖障碍4小结与分析通过流行病学、饲料、饲养管理和对弱仔、新生病仔猪剖检等各个方面的调查，排除了母猪繁殖障碍病因为品种、种源、饲料和饲养管理因素造成的可能。因为剖检有一定的病理变化，说明是由病毒或病原微生物等致病因素引起。本次监测采样全由专业人员把关操作，蓝耳病检测采用美国进口ELISA试剂，微电脑数控机洗板，伪狂犬、细小病毒采用华中农业大学LAT试剂盒，其灵敏度高，监测结果可靠。监测猪均未接种蓝耳病疫苗免疫，经过猪伪狂犬、猪细小病毒疫苗免疫，被监测种猪群体中有蓝耳病阳性，说明有感染猪或曾经感染过；伪狂犬、细小病毒的免疫合格率分别达到和说明了种猪的免疫效果较好。本次监测的样本较大，检测结果具有代表性，监精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创10/11测结果，蓝耳病样品阳性80/212，其中1至5场样品阳性率（49/127），猪场蓝耳病样品阳性率比较高；伪狂犬和细小病毒的免疫阳性率比较高，说明种猪在经过免疫或曾经感染后产生了对该病的较高抵抗力，免受强毒的攻击。在本次的调查中还发现，同一头猪在蓝耳病呈阴性（），伪狂犬、细小病毒免疫抗体都达到免疫保护力的情况下，仍然存在繁殖障碍病，说明该猪场发生的繁殖病不仅由蓝耳病、伪狂犬、细小病毒引起，还有其它繁殖障碍疾病参与。5防制建议繁殖障碍性疾病，特别是蓝耳病，它是我县的首次监测到的一个新病，它对养猪业的危害较重，一是引起严重的种猪繁殖障碍，导致其它疫病的免疫抑制，产生免疫失败；二是隐性猪瘟很难控制和消除，是母猪繁殖障碍的潜在杀手；三是猪伪狂犬和猪细小病毒通过免