论黄原酸盐高效降解菌的紫外诱变选育

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/5论黄原酸盐高效降解菌的紫外诱变选育文章标题论黄原酸盐高效降解菌的紫外诱变选育摘要黄原酸盐降解菌1经紫外线诱变选育后，筛选出突变菌株2，对未诱变菌株1和诱变菌株2进行了生物生长和降解性能实验，结果表明紫外诱变的最佳时间是50秒,在PH为10,温度为30，振荡速率120R/MIN的培养条件下，3D内变异优势菌株2对含黄药废水的CODCR和黄药的去除率比未诱变菌株1分别提高38和48，变异菌株生长速度快。关键词黄原酸盐；生物技术；降解菌；紫外诱变；突变菌株。作者简介舒生辉，男，汉族，江西九江人，硕士研究生，主要研究方向微生物工程在水污染治理中的应用。基金项目国家自然科学基金项目精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/5黄原酸盐俗称黄药，是有色金属硫化矿物浮选生产中最为有效的捕收剂。黄药具有恶臭，嗅觉值为005MG/L，即使浮选废水中残存量极少，也可使水质发臭，并严重影响附近水域的生态平衡，当CROCSSME5MG/L,在3天内可杀死大部分鱼类1。黄药对人畜的危害主要表现在伤及神经系统和肝脏器官，对造血系统也有不良影响2。据报道，目前国内该类废水中黄药的净化处理所采用的措施都是物理、化学氧化方法。用生物法降解黄药仅国外有少量报道，SOLOZHENKIN和LYUBAVINA用荧光假单胞菌处理铅选厂含有012MG/L残存黄药的废水，悬浮处理5分钟后黄药就被全部分解了，试验表明黄药能被生物降解法有效地破坏。我们课题组的张萍也做了关于“一株盐生物降解菌的特性研究”，筛选出一株黄原酸盐降解菌，经鉴定为铜绿假单胞菌，实验表明PH80该菌株降解模拟废水中黄药的效率达957，CODCR的去除率达到8473，而南京某矿山锌精矿溢流废水的PH高达1136，因此选育处理高PH黄药废水效果好的优势变异菌有重要的实践意义。紫外诱变技术机理是紫外光照射能使微生物的脱氧核精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/5糖核酸的分子结构形成“胸腺嘧啶二原体”，造成复制错误，引起基因突变，从而获得高效降解活性的变异菌种4。本研究利用紫外诱变技术诱变一株从南京某矿山锌精矿溢流废水驯化筛选到的黄药降解菌1选育出在高PH下对黄药有特殊降解功能的变异菌株2。1实验材料和方法11实验材料111菌种南京某矿山锌精矿溢流废水经驯化筛选获得的降解黄药的菌种1。112培养基及试剂黄药选择性培养基精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/5NAHCO3080G，NA2CO3360G，MGSO40006G，CACL201MG，NH4CL01G，黄药5MG、10MG、15MG、20MG、25MG、30MG，蒸馏水定容至100ML，PH值调制100。葡萄糖/无机盐培养基在上述培养基的基础上添加葡萄糖002G。固体培养基牛肉浸膏05G，蛋白胨10G，氯化钠05G，琼脂20G，于100ML蒸馏水。富集培养基牛肉浸膏05G，蛋白胨10G，氯化钠05G，溶于100ML蒸馏水。无菌生理盐水、无菌水以上培养基和试剂在使用前均需经121、01MPA下灭菌20MIN。113仪器设备TU2100紫外分光光度计；XJ消解装置；721分光精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/5光度计；SPX150BS生化培养箱；冰箱；超净操作台；高压灭菌锅；802B电动离心机；PH计；JB3型定时恒温磁力搅拌器；光学显微镜；摇床；15W紫外灯；漏斗、三角瓶、玻璃珠、滤纸。12实验方法121微生物的富集培养以无菌操作将菌株1接种于50ML活化富集培养基中，301、120R/MIN好氧振荡培养24H后，将菌株1培养液以3000RMIN离心5MIN，倾去上清液，将菌体打散加人无菌生理盐水再离心洗涤。而后将菌悬液放入一已灭菌的，装有玻璃珠的三角瓶内用手摇动，以打散菌体。并将菌液倒入有定性滤纸的漏斗内过滤，单细胞滤液装人试管内，一般处于浑浊态的细胞液含细胞数可达108个/ML左右，作为待处理菌悬液。122紫外诱变取4ML制备的菌悬液加到直径9CM培养皿内，放一无菌磁力搅拌子后置磁力搅拌