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1/95种中草药对凡纳滨对虾生长和抗病力的影响种中草药对凡纳滨对虾生长和抗病力的影响凡纳滨对虾俗称南美白对虾,是世界三大养殖虾类品种之一。由于生长迅速、抗逆性强、出肉率高、耐高密度和低盐度养殖,使得该种虾养殖产量占虾类总产量的80以上,已成为我国主要的对虾养殖品种。随着虾养殖规模的不断扩大、集约化程度的提高以及虾生存环境的恶化,疾病的危害程度越来越大。特别是对虾白斑综合症病毒是迄今为止危害最为严重的一种对虾病毒,感染虾710D内死亡率可达801001。养殖生产上使用抗生素和其他化学类药物来防治,容易打破生物间相互依赖、相互制约的生态平衡,抑制有益藻类的繁殖给对虾健康养殖带来了严重后果。中草药具有天然、高效、毒副作用小、不易产生抗药性等特点,且药中某些成分既有抗菌作用又有免疫作用,能改善机体的免疫状态和提高自身抗病能力,在水产养殖中的应用越来越受到关注23。目前,KUMARANT等4、BALASUBRAMANIANG等5、YOGEESWARANA等6和BALASUBRAMANIAN等78研究发现采用中草药提取物投喂斑节对虾可以显著增强其对WSSV侵染的抵抗力。郭志勋2/9等9和阴晓丽等10研究发现番石榴叶水提取物对WSSV有一定的杀灭作用。另外,杨清华等11和吴俊文12研究表明在饲料中添加复方中草药投喂凡纳滨对虾本文由论文联盟HTTP/收集整理可以提高对虾对WSSV的抗病能力。笔者将黄芩、黄芪、板蓝根、柴胡、茯苓和甘草5种中草药超微粉碎后分别以相同质量分数量加入到对虾基础饲料中,比较各种中草药在对虾抗WSSV的效果,为对虾健康养殖提供科学依据。1材料与方法材料中草药。5种中草药干燥超微粉碎后分别以质量分数的加入到基础饲料中。试验材料。从漳浦养虾场购买健康凡纳滨对虾000尾,体长CM,体质量G。试验饲料。试验用基础饲料组成为优质鱼粉、虾壳粉、面粉、豆粕、酵母粉、多矿、多维、诱食剂等,在此基础上添加中草药制剂,添加量分别为/KG。饲料主要营养水平为粗蛋白,粗脂肪,粗灰分,水分86,钙,磷。方法生长试验。对虾经暂养D后,分为对照组和5个中草药组,每组3个重复,每个重复60尾对虾,放置在2003/9L实验桶中,适应D后分别投喂基础饲料和5种添加中草药的试验饲料。日投喂量按体重的35,分3次投喂,每天换水1015,全程充氧,水温为,盐度为8,养殖试验持续3D。试验结束时,对每个桶中的对虾进行称重,并按照以下公式计算增重率、特定生长率、饲料系数和存活率增重率/WO100特定生长率/T100饲料系数F/存活率NT/NO100式中,WT和WO分别为鱼的终末体重和初始体重;T为试验天数;NT和NO分别为T天后和初始鱼的尾数;F为T天内摄食的饲料量。消化酶及血清免疫酶的活性测定。饲养满3D后对试验对虾饥饿2H,每桶随机抽取10尾进行解剖,取肝胰脏组织立即投入19液氮中,转移至实验室放置于80冰箱中保存待测。消化酶及免疫酶的活性测定将解冻后的肝胰腺称重,加入10倍体积的预冷生理盐水,在冰水浴中匀浆MIN。采用低温高速离心机对匀浆液进行离心,吸取上清,即为粗酶液。淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶活性及氧化物歧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化物酶的活性和总蛋白含量4/9均使用南京建成生物工程研究所生产的相应试剂盒测定。感染试验。试验结束后,每桶随机抽取0尾,投喂经检测感染WSSV的新鲜病虾,剁碎后按体重的510投喂,每天正常投喂、吸污、换水,定时检查虾的活动情况,及时收集、编号、保存死亡对虾,计算存活率。数据统计与分析采用SPSS统计软件对数据进行统计与分析,先对试验数据进行单因素方差分析,并进行DUNCANS多重比较法分析平均数的差异显著性。2结果与分析中草药对凡纳滨对虾的生长、成活率和饲料系数的影响由表1可知,不同中草药对凡纳滨对虾的生长、成活率和饲料系数的影响不同。从增重率来看,茯苓组黄芪组甘草组柴胡组板蓝根组对照组,其中黄芪组与甘草组以及柴胡组、板蓝根组和对照组之间差异不显著外,其他组差异显著。各组特定生长率大小为茯苓组黄芪组甘草组柴胡组板蓝根组对照组,其中黄芪组与甘草组以及柴胡组、板蓝根组和对照组之间差异不显著外,其他组差异显著。各组的饲料系数的大小为茯苓组柴胡组黄芪组甘草组茯苓组对照组,除对照组之间差异不显著,其他组差异显著。5/9中草药对凡纳滨对虾消化酶活力的影响由表2可知,不同中草药对凡纳滨对虾肝胰腺消化酶活性的影响不同。从淀粉酶活性来看,各组淀粉酶活性大小为茯苓组甘草组黄芪组板蓝根组柴胡组对照组,除茯苓组与其他组差异显著外,黄芪组和甘草组以及柴胡组、板蓝根组和对照组之间差异不显著。各组脂肪酶活性大小为甘草组茯苓组黄芪组对照组柴胡组板蓝根组,其中茯苓组和甘草组以及黄芪组、柴胡组、板蓝根组和对照组之间差异不显著外,其他组差异显著。各组蛋白酶活性大小为茯苓组黄芪组甘草组板蓝根组对照组柴胡组,其中黄芪组和甘草组以及柴胡组、板蓝根组和对照组之间差异不显著,其他组差异显著。中草药对凡纳滨对虾非特性免疫指标的影响由表3可知,中草药影响凡纳滨对虾肝胰腺非特异性免疫力。从SOD活性来看,各组SOD活性大小顺序为板蓝根组柴胡组黄芪组甘草组茯苓组对照组,其中板蓝根组、柴胡组、黄芪组和甘草组以及茯苓组和对照组之间差异不显著,其他组差异显著。各组AKP活性大小顺序为板蓝根组甘草组黄芪组柴胡组茯苓组对照组,其中板蓝根组、甘草组、黄芪组和柴胡组之间差异不显著,其他组差异显著。各组ACP活性大小顺序为板蓝根组甘草组黄芪组对照组柴胡组茯苓组,各组之间差异不显著。各6/9组POD活性大小顺序为板蓝根组黄芪组甘草组柴胡组茯苓组对照组,其中板蓝根组、柴胡组、黄芪组和甘草组之间差异不显著,其他组差异显著。中草药制剂对凡纳滨对虾抗病力的影响由表4可知,经过感染试验后,各组凡纳滨对虾的半致死时间大小为柴胡组板蓝根组黄芪组甘草组茯苓组对照组,柴胡组、板蓝根组、黄芪组、甘草组和茯苓组半致死时间分别比对照组延长了、和,其中板蓝根组、柴胡组、黄芪组和甘草组之间差异不显著,其他组差异显著。不同中草药对凡纳滨对虾抗WSSV的效果表现为柴胡组黄芪组板蓝根组甘草组茯苓组对照组,柴胡组、黄芪组、板蓝根组、甘草组和茯苓组凡纳滨对虾的存活率与对照组相比分别提高536、和,其中板蓝根组、柴胡组和黄芪组之间差异不显著,其他组差异显著。3讨论与结论中草药作为一种天然物质,具有来源广泛、价格低廉、不宜导致病原菌产生耐药性等优点。目前,已有200余种中草药具有多种免疫活性且影响和调节动物机体的免疫功能2。中草药除含有药用功效的成分外,还含有蛋白质、多糖、脂类、微量元素、维生素等营养成分,因而中草药具有增强机体免疫力、调整机体新陈代谢、增强抗应激能力、抗菌抑菌、促消化吸收、促生长、杀虫驱虫等功7/9能,适合作为免疫增强剂应用于水产养殖业1315。中草药黄芩含有黄芩多糖及甙类等多种微量有益物质,有增强机体免疫功能、促进生长的作用1516;甘草的主要成分是三萜类化合物、黄酮化合物、糖类、生物碱类、香豆素类等,是一种补益中草药,具有抗炎、抗氧化、抗病毒和抗肿瘤等生理活性17,将黄芪和甘草添加到基础饲料中可以明显增强对虾的免疫性能。该试验中黄芪组和甘草组对虾的AKP、ACP、POD和SOD均表现出较高的活力。板蓝根的有效成分为靛苷、靛红、靛蓝、葡萄糖芸香素、棕榈酸和氨基酸等,具有清热解毒、凉血等功效,对流感病毒、乙型脑炎病毒和腮腺炎病毒有抑制其感染和增殖的作用1819;柴胡的有效成分为皂苷、甾醇、挥发油、有机酸、黄酮、多糖等,柴胡具有镇静、止痛、降温、镇咳、抗炎、抗菌、保肝利胆、降血压、抗病毒、抗肿瘤等生理活性20。添加在基础饲料中投喂3D后的攻毒感染试验表明,试验对虾比对照组存活率提高和5520。茯苓含茯苓多糖、三萜类化合物茯苓素、茯苓聚糖分解酶、脂肪酶及蛋白酶等多种有益物质,具有促进消化、吸收等功能15,21。该研究中茯苓组试验对虾肝胰腺消化酶活性明显优于其他组。因此,不同中草药由于其有效成分不同,其发挥的功能也不同,就生长而言茯苓促生长作用较佳,黄芪、板蓝根、柴胡和甘草可以明显提高免疫力和抗病性8/9能。张耀等22在饲料中添加中草药黄芪、黄岑、板兰根、茯苓、鱼腥草等药用植物,发现可以通过改善动物肠道内环境,促进有益菌增殖,抑制有害菌的繁殖,从而提高营养物质的消化率;王芸等23用鱼腥草、黄芪、大黄、甘草和黄芩的水提取物按质量分数为2添加在饲料中连续饲养2D,发现黄芪、大黄和甘草能够促进凡纳滨对虾的生长及非特异性免疫功能,注射鳗弧菌攻毒试验的结果表明黄芪、大黄和甘草的累计死亡率均低于对照组,免疫保护率为746;汤菊芬等24在饲料中添加黄芪、当归、陈皮、金银花、板蓝根、连翘等6种中草药,结果表明试验组凡纳滨对虾的增重率、成活率、饲料系数、蛋白质效率、抗病力等指标均优于对照组。该研究结果与江湧等25、周歧存等26和叶建生等27中草药制剂对凡纳滨对虾生长和消化酶活性的影响的研究结果相同。随着对虾养殖规模的不断扩大、集约化程度的提高以及虾生存环境的恶化,疾病的危害程度越来越大,给养虾生产造
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