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精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/5银屑病中细胞凋亡相关基因BCL银屑病中细胞凋亡相关基因BCL2、FAS、BAX的检测摘要为了探讨细胞凋亡相关基因BCL2、FAS、BAX在银屑病发病中的意义,采用免疫组化ABC法、SABC法检测了这几种基因在15例银屑病组织中的表达。结果发现银屑病的角质形成细胞中抑凋亡基因BCL2几乎不表达,促凋亡基因FAS、BAX阳性表达。提示促凋亡基因FAS、BAX在银屑病中发病起重要作用,而抑凋亡基因BCL2作用可能不大。关键词银屑病、CL2基因、FAS基因、AX基因。银屑病的发病机理尚不明确,角质形成细胞异常增生和角化不全是银屑病的主要病理改变,以往对这方面的研究主要集中在免疫学和生化学方面。近年来银屑病与细胞凋亡的关系逐渐受到越来越多学者的重视。国外有学者报道银屑病表皮中角质形成细胞凋亡异常增多。抑凋亡基因BCL2和促凋亡基因FAS、BAX是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。为了探讨这几种基因在银屑病发精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/5病中的意义,我们采用免疫组化方法检测了银屑病中细胞凋亡相关基因BCL2、FAS及BAX。1材料和方法11标本来源采用19941997年我院保存的石蜡包埋组织块。寻常型银屑病15例,其中男8例,女例;年龄1168岁,平均年龄2913岁;均为进行期银屑病。6名正常人皮肤组织,皆取自皮肤外科行重睑术、面部美容切除术者的皮肤,石蜡包埋作为对照组。测定前先将石蜡包埋组织块作常规组织切片及HE染色,在光镜下核对诊断,证实其病理诊断无误方采用。12试剂鼠抗人BCL2单克隆抗体购自DAKO公司,生物素化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。兔抗人FAS多抗、兔抗人BAX多抗及链酶亲和素生物素过氧化酶复合物免疫组化试剂盒均购自武汉博士德生物工程公司。13方法载玻片用APES处理后干燥备用,切取45M厚的石蜡切片,常规脱蜡水化。BCL2基因的检测参照ABC法稍加改进,阳性对照为正常淋巴结,阴性对照为精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/5不加一抗。FAS、BAX基因的检测采用SABC法,阳性对照分别为武汉博士德生物工程公司提供的FAS、BAX基因阳性对照片,阴性对照为不加一抗。14判断显微镜下观察,棕黄色为阳性结果。阳性强度判断标准如下强阳性指50以上细胞阳性染色;中等强度阳性指2550细胞阳性染色;弱阳性指25以下细胞阳性染色;阴性指细胞均无任何阳性染色。2结果6例正常人皮肤组织中BCL2基因除部分基底细胞呈阳性反应外,余阴性。、FAS和BAX基因为阴性表达。15例银屑病组织中BCL2基因在15例表皮增生的角质形成细胞中均呈阴性表达,但14例部分基底细胞和浸润的淋巴细胞呈阳性染色;FAS基因在12例银屑病组织中呈阳性表达;BAX基因在13例中呈阳性,阳性染色遍布表皮各层角质形成细胞中及真皮浅层浸润的淋巴细胞上。在缺少一抗的对照反应中结果均为阴性,而作为阳性对照的正常淋巴结及FAS、BAX基因阳性对照片则呈广泛强阳性染色。3讨论CL2基因最早是1984年TSUJIMOTO等从滤泡性淋巴瘤中分离出来的一种癌基因,位于18Q21位点的BCL2基因移至免疫球蛋白重链基因14Q32位点附近,造成BCL2精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/5蛋白的异常表达。BCL2基因可抑制许多因素引起的细胞凋亡,故称为“细胞凋亡抑制基因”。FAS抗原又称APO1或CD95,FAS分子是个典型的型膜蛋白,属肿瘤环死因子/神经生长因子受体家族中的一员。研究发现FAS单克隆抗体在体内体处与FAS结合后均能导致表达FAS的细胞发生凋亡,从而证明FAS是一种识别FAS配体,并将凋亡信息传递给细胞的细胞表面受体,故FAS基因又称“凋亡基因”。BAX基因属于BCL2基因家族成员,其功能与BCL2基因相反,为促凋亡基因,BAX蛋白可与BCL2蛋白形成异源二聚体,从而抑制BCL2基因的抗凋亡作用。我们的实验中正常的皮肤组织部分基底细胞BCL2基因呈阳性反应,这与国外学者的报道相符合,有文献报道这些阳性细胞为黑素细胞,正常表皮中黑素细胞与基底角质形成细胞的比例为130,提示黑素细胞死亡和再生的控制是非常严格的。黑素细胞BCL2基因强阳性表达,这可能与保护它们避免受内外环境的影响如紫外线的照射,减少凋亡有很大关系。在银屑病中除黑素细胞和浸润的淋巴细胞为阳性外,表皮增生的角质形成细胞均为阴性,这提示BCL2基因可能在银屑病中所起的作用不大。目前认为在这类丘疹鳞屑性疾病中主要是BCLX基因起作用。WRONESMITH等及FO
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