NYT 551-2002 产蛋下降综合征诊断技术

551一2002产蛋下降综合征诊断技术 551称一种使母鸡产蛋减少、蛋质下降，由腺病毒引起的病毒性传染病，已成为产蛋损失的主要原因。我国农业部把该病列为二类动物疫病。本标准包括临床诊断、病毒分离和红细胞凝集抑制试验三种诊断技术。本标准的附录标准由农业部畜牧兽医局提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位:天津出人境检验检疫局、哈尔滨兽医研究所。本标准主要起草人:曹燮政、唐秀英、柯忠哲、米保国、韩惠珠。 551标准适用于鸡的产蛋下降综合征的诊断和检疫，对其他禽类本病的检疫可以参照执行。查被检鸡群在过去一年内是否出现过产蛋下降综合征的症状，是否有产蛋下降综合征病例接触史，是否进行过相关的免疫接种，了解鸡群的来源及上代种群的疫病史，周围1 否有水禽场或野生水禽栖息地。点注意下列情况:a)鸡群产蛋率下降15006000;b)鸡蛋破损率5%c)鸡蛋中有较多的畸形蛋、软壳蛋、无壳蛋、薄壳蛋、砂壳蛋，时有水样蛋清，棕色蛋鸡生产浅色蛋、白壳蛋;d)如不同品种鸡同时感染，产棕色蛋的品种减产甚于产白色蛋的品种;e)精神、采食、排泄及运动无明显异常。1 . 2 0. 01 磷酸盐缓冲生理盐水(配制方法见附录A(规范性附录)。样品的采集和处理酌情选择下列一种或数种:a)采扑杀鸡的输卵管和子宫的翻膜、卵巢，加灭菌石英砂研磨，加混悬液后冻融3次，3 000 r/上清液，加人青霉素(使最终浓度为1 000 ,链霉素(使最终浓度为1 000 pg/37作用1 减产鸡的咽喉部、泄殖腔拭子，浸人5 浸出液冻融2次，3 000 r/上清液加人青霉素(使最终浓度为3000IU/链霉素(使最终浓度为3 000 ,37作用1 h,c)采劣质蛋清，加等量最终浓度为1 000 IU/链霉素(使最终浓度为1 000 pg/37作用1 h,d)采减产鸡抗凝血20 2 000 r/上清液，吸取上层灰白色的白细胞层，加心2次，弃上清液，再用5 融3次，加青霉素(使最终浓度为1 000 ,链霉素(使最终浓度为1 000 pg/37作用1 h,离心，取上清液。毛尿囊腔接种r 5515枚，另25枚接种种量均为。. 2 。3748 获48 1%鸡红细胞悬液(其血凝性(若接种样品的鸭胚尿囊液能凝集红细胞，而接种进行分离物鉴定(若样品接种鸭胚尿囊液不凝集红细胞，则用尿囊液接种鸭胚盲传，样品连续盲传三代仍不凝集红细胞者可判为病毒分离阴性。性血清被鉴定抗原抑制滴度应与表中示例结果表示毒分离试验阳性。衰1应用红细胞凝集抑制试脸鉴定分离物抗原血清分离毒株阳性血清6抗原+注:必要时进行新城疫、传染性囊病、高致性禽流感的鉴别诊断。6孔，一次试验使用的反应板孔底角度应相同。径2 原。3阿氏液(配制方法见附录A(规范性附录)。%鸡红细胞悬液:采不少于3只健康成年鸡血液，以1:2的比例与20倍量生理盐水洗涤3次，每次以2 000 r/后一次10 生理盐水配成100悬液。塑料管引进血流6 融一端，镊夹封口。血液凝固析出血清后以2 000 r/取血清段，封口备用。普查或疾病流行时，每群采血鸡不少于30只。加两排。孔50 匀后依次倍比稀释至第11列孔，弃去50 12列孔为红细胞对照。细胞悬液50 静置220 微量反应板作45。竖立，待第12列孔内红细胞流成塔状时即判定结果。以凝集100%红细胞的抗原最高稀释倍数为该抗原的凝集效价，亦即1个红细胞凝集单位。若两排结果不一，取其均值。个红细胞凝集单位抗原稀释倍数=抗原效价一84个红细胞凝集单位抗原稀释倍数=抗原效价=4412 1孔加被检血清和生理盐水各50 2孔加8个红细胞凝集单位抗原50 3孔至第12孔各加人4个红细胞凝集单位抗原50川。将第1孔中液体混匀后吸出50 此依次倍比稀释至第12孔，弃去50叮。微量反应板的第8排第2至第6孔，每孔加人50 1孔和第2孔各加4个红细胞凝集单位抗原50 第2孔起依次作倍比稀释至第6孔，弃去50讨。这样，抗原对照孔的抗原含量依次为4,2,1,1/2,1/4,1/8个红细胞凝集单位。微量反应板的第8排第7至第12孔，每孔加人生理盐水各50 5被检血清对照:血清样品每排第1孔为被检血清对照。12. 5. 6 37C，感作10 细胞悬液50 荡1 2置30 定结果。a)阳性血清滴度与已知滴度相符，若有差异，不应超过1个滴度;b)抗原对照，第1,2孔红细胞完全凝集，第3孔完全凝集至50%凝集，第4,5,6孔不完全凝集或渐至不凝集;c)红细胞对照，完全不凝集;d)被检血清对照，完全不凝集。立，当红细胞对照孔和被检血清对照孔中红细胞流成塔形时立即判定被检血清滴度。以完全抑制红细胞凝集的最大稀释度为被检血清的红细胞凝集抑制抗体滴度。:16为阳性，被检血清滴度=1周后重复采血检测31=8时判为阳性;被检血清滴度镇1综合判定临诊症状明显，3. 未经产蛋下降综合征疫苗接种、临诊症状不明显、3. 可判定为产蛋下降综合征病毒感染鸡群。已经产蛋下降综合征疫苗接种，无临诊症状，3. 2为阳性结果，判为免疫鸡群。 551范性附录). 2 0. 01 a,12H,0) 2. 62 H, 0.