肠杆菌科 最新医学PPT

肠杆菌科Enterobacteriaceae,肠杆菌科的共同特点,肠杆菌科:是一群生物学性状相似的 G-杆菌，寄居于人和动物的肠道至少有44个菌属，170个以上的菌种多数是肠道的正常菌群少数为致病菌，可引起人类肠道传染病,肠杆菌,肠杆菌科细菌,机会致病菌：E.coil,致病菌： 沙门菌、志贺菌，鼠疫杆菌等,正常菌群转变为致病菌:引起胃肠炎 的大肠杆菌,肠杆菌科的共同特点,形态与结构G- 杆菌无芽胞一般无荚膜周鞭毛菌毛,培养兼性厌氧或需氧营养要求不高,肠杆菌科的共同特点,生化反应：活泼 触酶（+）、氧化酶阴性生化鉴定-乳糖发酵致病菌：不发酵乳糖非致病菌：发酵乳糖,SS培养基,肠道非致病菌,肠道致病菌,鉴定中最重要的生化反应,乳糖发酵试验,肠道非致病菌（埃希菌属）发酵乳糖、产酸产气,肠道致病菌（志贺菌属、沙门菌属等）不发酵乳糖 ,菌体O抗原：LPS的最外层，属特异性；IgM型抗体 核心多糖是肠杆菌科细菌的共同抗原 （S-R型变异）鞭毛H抗原：引起IgG型抗体 H-O型变异的意义K 抗原或Vi抗原：型特异性，可阻止O抗原凝集,肠杆菌科的共同特点,H抗原(鞭毛),O抗原(LPS侧链),K抗原或Vi(荚膜),F抗原(菌毛),O抗原(LPS),肠杆菌科的共同特点,抵抗力:不强不耐热 湿热60经30min即被杀死对低温有耐受力。对一般消毒剂敏感 胆盐、煌绿等燃料对非致病菌有抑制作用，可用于选择培养基易变异,第一节埃希菌属Escherichia,埃希菌属:6个种，众多型别，E.COil是临床最常见的模式菌种:大肠埃希菌一般为肠道内正常菌群宿主免疫能力低下条件致病，引起肠道外感染少数血清型有致病性环境和食品卫生学中的粪便污染检测指标,埃希菌属,形态染色,短杆菌革兰染色阴性有周鞭毛有菌毛肠外感染株有微荚膜不形成芽胞,培养特性与生化反应,兼性厌氧营养要求不高生化反应活泼，硫化氢试验（）动力试验（+）绝大多数发酵乳糖IMViC试验结果为+ + - -,抗原结构,O抗原：菌体抗原170种,引起IgMH抗原：鞭毛抗原50种，引起IgGK抗原：荚膜抗原100种以上鉴定后大肠杆菌血清型命名法：O：K：HO157：K58：H7,致病物质,黏附素 特异性高 定植因子抗原、集聚粘附菌毛等 外毒素 肠毒素及溶血毒素志贺毒素内毒素,所致疾病,内源性肠道外感染：条件致病泌尿道感染化脓性感染腹膜炎、阑尾炎免疫力低下者败血症新生儿脑膜炎,外源性肠道内感染胃肠炎(腹泻)：致病菌肠产毒性大肠埃希菌ETEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠致病性大肠埃希菌EPEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠集聚性大肠埃希菌EAEC,肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）,致病因素-肠毒素(二种)临床疾病- 5岁以下婴幼儿腹泻 旅游者腹泻,不耐热肠毒素 LT加热65、30分钟失活,耐热肠毒素 ST加热100、20分钟不失活,肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）,致病因素-不产生肠毒素 侵袭结肠粘膜上皮细胞-组织坏死-炎症侵犯部位-结肠临床疾病-较大儿童与成人腹泻 腹泻、脓血便、里急后重,肠致病型大肠埃希菌（EPEC ）,最早发现的引起腹泻的大肠埃希菌致病因素-不产生肠毒素、无侵袭力 菌毛粘附（小肠）微绒毛绒毛萎缩刷状缘破坏上皮细胞功能受损 水样腹泻 所致疾病- 婴幼儿腹泻（严重者可致死）,肠出血型大肠埃希菌（EHEC）,致病因子- 志贺毒素 Stx-1:破坏核糖体,阻止蛋白质合成,细胞损伤- 肠绒毛结构破坏-分泌增多，吸收减少 Stx-2:破坏肾内皮细胞血清型- O157：H7主要疾病- 5岁以下儿童 出血性结肠炎(剧烈腹痛及血便) 溶血性尿毒综合征污染食品是其重要的传染源,The “life cycle” of E. coli O157:H7,5-10% prevalence in animals40% prevalence in farms,大肠埃希菌O157:H7的贮主是牛,肠集聚型大肠埃希菌（ EAEC）,致病因子 细菌集聚，形成砖状排列 粘附上皮细胞，阻止液体吸收主要疾病-引起婴儿和旅游者持续性水样腹泻,微生物学检查法,标本（标本采集的原则）分离培养与鉴定肠道外感染肠道内感染,血清学鉴定如疑为致病性大肠杆菌需作血清学鉴定。,已知分型Ab,分离菌,直接法玻片凝集试验,+, 3个大肠菌群/1L饮水， 5个大肠菌群/100ml汽水，果汁 100个细菌总数/1ml饮水,卫生细菌学检查,大肠菌群数,每100ml（g）饮食样品中大肠菌群数,我国卫生标准：,细菌总数,每1ml或1g样品中细菌总数,防治原则,接种疫苗对饮水和食物的消毒,加热对病人隔离治疗,补充水,维持电解质平衡耐药性非常普遍,药敏试验,问题,致病性大肠埃希菌的种类大肠埃希菌的卫生细菌学检查及其意义,第二节志贺菌属Shigella,教学大纲,掌握 志贺菌属生物学性状特点（抗原构造及分类）志贺菌的致病物质及所致疾病志贺菌感染的微生物学检查法熟悉志贺菌的防治原则,case,王某，女，18岁。一天前发热38，腹痛、腹泻，水样便。现腹痛加剧，脓血粘液性便便检：镜下满视野脓细胞。血液检查：血白细胞为15000/mm3,中性粒细胞90%。根据症状初步诊断是什么？如何进行微生物学检查帮助确诊？,生物学性状,形态染色 G-杆菌不形成芽胞 无鞭毛有菌毛无荚膜,生物学性状,培养兼性厌氧营养要求不高一般为光滑菌落，宋内氏志贺菌形成扁平粗糙型菌落,生化反应不分解乳糖分解葡萄糖ss选择培养基双糖管动力试验阴性硫化氢试验阴性,SS培养基,肠道非致病菌,肠道致病菌,抗原构造及分类,O抗原分类依据：群特异性抗原、型特异性抗原 菌种 群 型痢疾志贺菌 A 110（唯一不发酵甘露醇）福氏志贺菌 B 16、x、y变型（13型）鲍氏志贺菌 C 118 宋内志贺菌 D 1,我国以福氏、宋内氏流行多见,分为4群，40个血清型,比其他肠道杆菌弱6010分被杀死对酸和一般消毒剂敏感在污染的瓜果、蔬菜上存活10-20天多重耐药性,抵抗力,致病物质,主要致病物质为侵袭力、内毒素，少数菌株产生外毒素。 侵袭力-,粘附并穿入回肠未端、结肠粘膜上皮细胞,粘膜固有层细胞增殖、炎症坏死粘膜、WBC、细胞碎片、纤维蛋白和血液共同组成粘液脓血便,内毒素志贺菌仅在肠道内增殖，一般不侵入血流各菌株均可产生强烈内毒素，引起典型痢疾症状,内毒素,全身表现内毒素血症、发烧、神志障碍、严重者中毒性休克,破坏肠粘膜加重坏死及溃疡形成,典型痢疾症状脓血粘液便,刺激肠壁植物神经肠功能紊乱,典型痢疾症状腹痛、里急后重等,外毒素-志贺毒素 Stx-1:破坏核糖体,阻止蛋白质合成,黏膜细 胞损伤-肠绒毛结构破坏-分泌增多 Stx-2:破坏肾内皮细胞-溶血性尿毒综合征.,所致疾病,细菌性痢疾夏秋季节肠道传染病感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血潜伏期 1-3天宋内氏常为轻型感染，福氏易转变成慢性,传染病流行三环节传染源- 病人、带菌者传播途径- 粪口途径易感者- 人类普遍易感,且敏感性较高，少量菌体即可致病（10-150个细菌）,所致疾病,急性痢疾发热、腹痛、水样腹泻粘液脓血便、里急后重痢疾志贺菌引起的严重-脱水、酸中毒、电解质紊乱- 死亡率20%慢性痢疾治疗不彻底，病程超过2个月，10%-20%为慢性中毒痢疾 多见于小儿；无明显的消化道症状，全身中毒症状高热、休克中毒脑病；呼吸衰竭、循环衰竭,痢疾杆菌,粪口途径,回肠末端,结肠粘膜上皮细胞内繁殖,肠壁粘膜,形成炎症,出血、溃疡、坏死,脓血粘液样便,释放内毒素,中毒症状、发热,肠壁植物神经,功能紊乱,肠蠕动共济失调,直肠扩约肌痉挛,腹痛,里急后重,免疫性,免疫期短，不稳固免疫主要是消化道粘膜的SIgA,微生物学检查法查,及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存,SS平板（无色透明小菌落）,血清学反应（玻片凝集）,最后诊断,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应）,快速诊断,免疫荧光菌球法协同凝集试验胶乳凝集试验,防治原则,加强饮食卫生的管理隔离患者、彻底治疗减毒活菌苗抗生素,问题,志贺菌属的致病物质及其作用机制是什么？对可疑痢疾患者如何进行微生物学检查？,第三节 沙门菌属,Salmonella,教学大纲,掌握沙门菌抗原构造与分类沙门菌致病物质及所致疾病沙门菌感染的微生物学检查法肥达反应原理及结果判定分析 熟悉肠热症的特异性预防,一群革兰阴性杆菌分两个菌种： 肠道沙门菌，邦戈沙门菌 众多型别分布广泛感染的宿主范围广多数可感染动物少数对人类致病有些动物沙门菌也可对人致病引起人畜共患病,分类,鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌,伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌肖氏沙门菌希氏沙门菌,人,人、动物,生物学性状,形态染色G-杆菌 周身鞭毛，有菌毛无芽胞、无荚膜 培养和生化反应兼性厌氧/营养要求不高不分解乳糖大部分菌株产生H2S（硫化氢试验阳性）动力试验阳性,抗原构造与分类,常见沙门菌的抗原组分,组 菌名 O抗原 H抗原I H抗原IIA 甲型副伤寒沙门菌 1、2、12 a B 肖氏沙门菌 1、4、5、12 b 1、2 鼠伤寒沙门菌 1、4、5、12 i 1、2C1 希氏沙门菌 6、7 c 1、5 猪霍乱沙门菌 6、7 c 1、5D 伤寒沙门菌 9、12 d 肠炎沙门菌 1、9、12 g、m E1 鸭沙门菌 3、10 e、h 1、6,伤寒、希氏沙门菌的表面抗原与毒力有关,Vi抗原,免疫原性弱，伴随活菌一起存在,测定Vi抗原有助于检出带菌者,因为,所以,本质,Vi抗原：少数沙门菌有如伤寒沙门菌、希氏沙门菌，不稳定 可以阻止O抗原与其相应抗体发生凝集,抵抗力,对湿热耐力差耐低温：冰冻土壤中可过冬水中能存活2-3周粪便中可活1-2个月 耐受胆盐、煌绿及其他染料,致病物质,侵袭力 菌毛：粘附Vi抗原：抗吞噬内毒素引起体温升高、白细胞数下降。大剂量可导致中毒症状和休克 肠毒素某些沙门菌如鼠伤寒沙门菌,所致疾病-人类沙门菌病（1）,传染源:患者，带菌者传染途径:粪-口途径肠热症: 伤寒、副伤寒伤寒:伤寒沙门菌引起, (症状典型,病程长)副伤寒:甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起,肝脾-肿大胆囊-肠道-排菌(2周）肾脏-尿-排菌（3周),伤寒、副伤寒的致病过程,伤寒沙门菌和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌,肠粘膜上皮细胞,肠系膜淋巴结,固有层淋巴结,进入血液,再次进入血液,第一次菌血症发热,不适,全身疼痛,第二次菌血症（1周）高热、外周白细胞下降、肝脾肿大、表情冷漠、玫瑰疹、相对缓脉,肝脏脾脏胆囊肾脏骨髓,并发症肠穿孔肠出血,典型病例病程为3-4W,胸导管,伤寒、副伤寒杆菌,肠道（主要侵犯小肠粘膜）,吸附于M细胞表面，细胞肌动蛋白重排，内在化,粪一口途径,细菌进入吞噬转入上皮下区，被固有层中的巨噬细胞吞噬,细菌能在吞噬体的酸性环境中生存和繁殖,部分菌经过淋巴液到达肠系膜淋巴结中大量繁殖后,致病机制,进入血流（第一次菌血症）,发热,不适,全身疼痛,肝,脾,肾,骨髓,心,脑,繁殖后,再次入血（第二次菌血症）,出现明显症状,持续发热,肝脾肿大,玫瑰疹,相对缓脉,WBC下降,表情淡漠,伤寒表现,持续高热肝脾肿大伤寒病容玫瑰疹相对缓脉,所致疾病-人类沙门菌病（2）,胃肠炎（食物中毒）鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌败血症鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、 希氏沙门菌无症状带菌者症状消失后一年以上，粪便中可分离出相应沙门菌,伤寒玛丽,免疫性,肠热症后，能获得牢固免疫 即使发生，症状也轻，很少发生再次感染细胞免疫较重要胃肠炎的恢复与肠道局部生成SIgA有关,微生物学检查法,细菌学诊断标本：胃肠炎取粪便呕吐物或可疑食物肠热症在病程不同阶段采取不同标本； 发病1周取血；发病1-3周取骨髓液 发病2 周取粪便；发病3周取尿,微生物学检查,细菌学诊断,标本,SS平板,生化反应,血清学鉴定,微生物学检查-血清学诊断（Widal reaction）,用已知伤寒沙门菌O抗原、H抗原和甲型副沙寒沙门菌和肖氏，希氏沙门菌H抗原与受检血清做定量凝集试验，测定血清中有无抗体以及抗体的效价。可以辅助诊断肠热症。,血清学诊断,正常凝集价伤寒沙门菌O抗体的凝集价1：80，H抗体1:160甲型副伤寒、肖氏沙门菌H抗体凝集价1：80 动态观察 单次效价测定不能定论，可在病程中逐周复查，若效价逐次递增或恢复期效价比初次效价大于4倍才有诊断意义。,血清学诊断,O与H抗体的诊断意义,H与O抗体的诊断意义,带菌者检查,分离病原菌查Vi抗体,case 1,患者，男，20岁持续高热和腹泻8天，大便每天5-6次，偶尔有粘液和血丝，右下腹隐痛，伴食欲差、恶心、呕吐。体检：肝脏右肋下2cm，脾脏左肋下1c