【毕业论文】维生素c和牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响

学号13984005毕业论文（2013届本科）题目维生素C和牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响学院畜牧兽医学院专业水产养殖姓名吕广祺指导教师魏华完成日期2013年6月12日毕业论文任务书论文题目维生素C和牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响下发任务日期2012年9月学生姓名吕广祺指导教师魏华一论文主要内容通过本实验研究维生素C和牛磺酸对麦穗鱼以及两者联合作用对麦穗鱼的抗缺氧存活时间的影响。二论文的基本要求1有关资料的收集要求尽量收集第一手资料，资料要真实、可靠、有代表性。2资料的整理与分析要求条理清晰，数据分析详尽。3查阅相关文献，要求贴近主题，有参考价值。4认真撰写论文，字数在10000字以上。三论文工作进度安排阶段论文各阶段名称日期1探索实验阶段（预实验）20134120134142数据的分析与处理201341520134303查阅相关文献20135120135144撰写论文初稿201351520135315论文修改20136120136116论文完成2013612备注四应收集的资料及主要参考文献（指导教师指定）1、牛磺酸对泥鳅和麦穗鱼抗缺氧能力的影响2、维生素E和维生素C的协同抗氧化作用及对水产动物的影响3、水产动物对维生素C和维生素E的营养需求说明此任务由指导教师填写一式两份，一份发给学生，一份发给指导教师留存。沈阳农业大学毕业论文选题审批表选题名称维生素C和牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响题目来源配合教师科研学号13984005姓名吕广祺专业水产养殖学指导教师魏华职称讲师研究内容研究不同浓度（01G/L、03G/L、06G/L、09G/L）的维生素C和牛磺酸（05、1、15、2）对麦穗鱼以及两者联合作用对麦穗鱼的抗缺氧存活时间的影响研究计划2013412013414预实验20134152013430数据的分析与处理20135152013531查阅相关文献20135152013531撰写论文初稿2013612013611论文修改2013612论文完成特色目前对于药物对麦穗鱼抗缺氧能力的研究还较少，本实验意在为之后的研究提供部分探索。指导教师意见教研室意见学院意见毕业论文指导记录学生姓名吕广祺专业水产养殖学指导教师姓名魏华职称讲师本年度指导毕业生人数3论文题目维生素C和牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响时间地点指导内容201342201347201341320135120135162013622013610实验室实验室实验室办公室办公室办公室办公室指导预实验设计，准备实验器材等根据预实验数据修改实验方案正式实验指定参考文献论文撰写论文修改论文定稿学生签字年月日指导教师签字年月日教研室主任签字年月日指导过程沈阳农业大学毕业论文考核表论文题目维生素C和牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响姓名吕广祺学号13984005专业水产养殖指导教师评语指导教师（签字）年月日评阅人评审意见评阅人（签字）年月日注答辩委员会意见除填写简要评语、给出成绩外，还要提出是否授予学位的建议。答辩委员会意见主任委员（签字）年月日成绩目录中文摘要1英文摘要2前言31牛磺酸311牛磺酸的生物功能312牛磺酸对水产动物的作用42维生素C421维生素C的生物功能422维生素C在水产动物中的应用51材料与方法611实验动物驯养612实验仪器和药品613实验方法614数据分析72结果与分析721观察结果722实验结果7221牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响7222VC对麦穗鱼抗缺氧能力的影响8223牛磺酸和VC联合作用对麦穗鱼抗缺氧能力的影响83讨论与结论1031讨论1032结论11参考文献12致谢14摘要本实验旨在研究维生素C、牛磺酸以及两者联合作用对麦穗鱼抗缺氧能力的影响。实验采用锥形瓶密封法进行，维生素C分别以0G/L、01G/L、03G/L、06G/L、09G/L5个浓度组别进行；牛磺酸分别以0、05、10、15、2为5个浓度组别进行；联合作用以1TAU03G/LVC、1TAU06G/LVC、15TAU03G/LVC、15TAU06G/LVC为浓度进行。结果表明不同浓度的牛磺酸溶液对麦穗鱼的抗缺氧能力都有不同程度的提高，其中浓度为1、15和2的牛磺酸水溶液对麦穗鱼的抗缺氧能力有极显著提高（P0001）；不同浓度的VC溶液对麦穗鱼具有剂量依赖性，高浓度的VC（06G/L、09G/L）可以极显著提高麦穗鱼的抗缺氧能力（P0001），而低浓度（01G/L、03G/L）的VC效果相对不明显。在联合实验中，不同浓度的VC和牛磺酸混合溶液与对照组比较对麦穗鱼的抗缺氧能力都有极显著提高（P0001），而且比VC和牛磺酸分别单独作用效果更加明显。结论牛磺酸、VC以及二者联合作用都可提高麦穗鱼的抗缺氧能力。关键词牛磺酸；麦穗鱼；抗缺氧能力；维生素C；联合作用ABSTRACTTHEEXPERIMENTWASDESIGNEDTOSTUDYTAURINEANDVITAMINCONPSEUDORASBORAPARVAANDTHEJOINTACTIONONHYPOXIASURVIVALTIMEOFTHEPSEUDORASBORAPARVATHEEXPERIMENTUSEDCONICALFLASKSEALED,EXPERIMENTWITH0,05,1,15,2CONCENTRATIONOFTAURINERESPECTLYTHECONCENTRATIONOFVCWERE0G/L,01G/L,03G/L,06G/LAND09G/LTHECONCENTRATIONSOFCOMBINEDEXPERIMENTWERE1TAU03G/LVC,1TAU06G/LVC,15TAU03G/LVC,15TAU06G/LVCALLOFTHEEXPERIMENTGROUPSHADFOURDUPLICATEEXPERIMENTSTHERESULTSSHOWEDTHATDIFFERENTCONCENTRATIONSOFTAURINESOLUTIONONTHEANTIANOXIACAPACITYOFPSEUDORASBORAPARVAHADDIFFERENTDEGREESOFINCREASE,OFWHICH1,15AND2TAURINESOLUTIONPSEUDORASBORAPARVAHYPOXIATOLERANCEOFTHEGRASSTHEREWASASIGNIFICANTINCREASEINP001CONCENTRATIONSOFBELOW03G/LVCHAVELITTLEEFFECT,WHILEINWHICHTHECONCENTRATIONOF06G/LAND09G/LVCSOLUTIONONTHEPSEUDORASBORAPARVAHADSIGNIFICANTANTIHYPOXIAABILITYINCREASEDP001INTHEJOINTEXPERIMENTWITHDIFFERENTCONCENTRATIONSOFVCANDTAURINEONTHEPSEUDORASBORAPARVAMIXEDSOLUTIONOFANTIHYPOXIAWASENHANCED,EACHCONCENTRATIONONTHEPSEUDORASBORAPARVAABILITYOFANTIHYPOXIASIGNIFICANTLYINCREASEDP0001,ANDCOMBINEDEFFECTSWEREMOREEFFICIENTTHANVCORTAURINEALONETHERESULTSSHOWEDTHATTAURINEANDVC,ANDTHEIRJOINTEFFECTCOULDENHANCETHEANTIHYPOXIAABILITYOFPSEUDORASBORAPARVAKEYWORDSTAURINEPSEUDORASBORAPARVAHYPOXIATOLERANCEVITAMINCCOMBINEDEFFECTS前言1牛磺酸11牛磺酸的生物功能牛磺酸（TAURINE），又称牛胆素，化学名称为2氨基乙磺酸，是一种小分子含硫氨基酸，1927年首次由牛胆汁中分离出来。1976年HAYES等证明其具有生物学功能1。此后许多学者对其生物学功能进行了深入研究，表明它在渗透压调节，增强细胞膜抗氧化、抗自由基损伤及抗病毒损伤方面有作用，尤其是在心血管系统、中枢神经等方面的作用更为显著。111牛磺酸的渗透调节作用海洋动物的渗透压主要靠牛磺酸来维持和调节；对哺乳动物虽渗透压由无机盐来维持，但渗透压的变化主要由牛磺酸的移动来平衡。现已证明牛磺酸在中枢神经系统、视网膜、血小板、骨骼肌和心脏等许多器官中起渗透调节作用。112牛磺酸的抗氧化作用牛磺酸能够增强细胞膜抗氧化、抗自由基损伤及抗病毒损伤的能力。牛磺酸与VC、VE、类胡萝卜素和一些多酚类化合物一样，具有消除活性氧自由基的作用。他们共同组成生命内源的防御系统，防止毒素对细胞及组织的伤害2。牛磺酸的清除活性氧自由基和抗脂质过氧化损伤的作用与其剂量呈依赖关系，它能防止兔精液细胞膜的脂质过氧化，保持正常精子的活动能力。体外试验表明，牛磺酸可直接作用于微粒体膜，减少膜的脂质过氧化反应，从而抑制肝的脂质过氧化。口服牛磺酸还可显著降低引起细胞膜脂质过氧化的物质四氯乙烯对鼠肝和肾的损伤。113牛磺酸与神经系统的作用牛磺酸是新生动物脑中含量最丰富的游离氨基酸，随着脑的发育，牛磺酸的水平逐渐下降，成年动物大脑中牛磺酸的含量仅为新生动物的三分之一；在发育成熟的大脑中，其含量仅次于谷氨酸。在中枢神经系统中，牛磺酸主要分布于大脑皮层、小脑、海马及嗅球等区域，且发现各种动物视网膜中，牛磺酸的含量均较机体其它组织高。牛磺酸可使人脑神经细胞增殖，促进神经细胞突触的形成，加速神经细胞的分化形成3。114牛磺酸与环核苷酸系统间存在着相互调节的作用关系牛磺酸在海马区可拮抗由去甲肾上腺素、腺苷和组胺诱发的CAMP水平升高现象，其作用机制可能是通过对受体的竞争性抑制来实现的。何天培等报道，牛磺酸可显著抑制应激大鼠心肌及血浆中CAMP、CGMP的升高，从而颉颃由CAMP、CGMP通道的蛋白磷酸化及基因转录4。低剂量的牛磺酸（01251MOL/L）可增加催乳素的释放，而高剂量（4MOL/L）时，上述刺激作用不再出现。原因是高剂量的牛磺酸可使生长激素抑制素的释放增加。此外，牛磺酸还可影响CA2的结合、转运、调节及CA2依赖或CA2刺激过程，CA2的高亲合摄取过程需要ATP、碳酸氢盐和NA的存在，而牛磺酸可激活这一过程。12牛磺酸对水产动物的作用日本的研究发现牛磺酸是虾饵料中最好的诱食添加剂。含有这种添加剂的虾饵料，其摄食效果最好，并对调节饵料的综合营养的微量元素的平衡具有良好作用。牛磺酸还可提高水产动物的抗缺氧能力，增加其在养殖、运输等过程中的存活时间，现已在不同鱼类中都得到证明。魏智清等研究报道，在水中添加牛磺酸溶液可以提高泥鳅鱼和麦穗鱼的抗缺氧能力56。邱小琮等研究报道，饲料中添加牛磺酸可提高鲫鱼的血红蛋白含量，从而提高鲫鱼耐缺氧能力，尤其是05的添加量显著的提高鲫鱼的密闭缺氧存活时间7。张书松等实验表明，牛磺酸可以增强黄河鲤鱼的抗缺氧能力，其中0608的添加量对黄河鲤鱼的抗缺氧能力有显著的提高8。2维生素C维生素C又称抗坏血酸，是水溶性抗氧化剂，也是血浆中最有效的抗氧化剂易被氧化，遇空气、热、光、碱性物质、氧化酶及极微量的铜和铁都会加速其氧化破坏。21维生素C的生物功能211还原作用作为一种强抗氧化剂，它的最大特性是还原性，通过还原作用消除有害氧自由基的毒性。其抗氧化作用表现在可以与O2、HOO及OH迅速反应，生成半脱氢抗坏血酸9，清除单线态氧，还原硫自由基，其抗氧化作用依靠可逆的脱氢反应来完成。由于它是供氢体，也可使被氧化的维生素E和巯基恢复成还原型，这是其间接抗氧化作用10。戴德哉等报道维生素C体内抗氧化作用优于体外，其在体内可能通过其他间接途径发挥抗氧化作用，而不仅是直接清除氧自由基11。212抗氧化作用VC可防治坏血病，既可作为羟化酶辅基参与动物结缔组织、骨骼、血管细胞间质等形成，还可作为还原剂提高动物体的抗氧化能力，是一种动物必需的、具有多重生物学功能的营养素12。在生物体内，VC以氧化型或还原型形式存在，既可作为氢受体又可以作为氢供体，是最重要的还原剂和抗氧化剂之一，在体内各种氧化还原反应中发挥重要作用。VC最主要的作用就是中和体内所产生的自由基。VC是一个极好的电子源，它可以为羟基和超氧化物自由基等提供电子，终止自由基的活性，减轻氧化损伤13。22维生素C在水产动物中的应用221VC对鱼类繁殖性能的影响VC对鱼类繁殖性能有重要影响。研究发现，维生素C可促进金鲫亲鱼卵母细胞的成熟和精巢的发育。CIERESZKO和DABROWSKI发现虹鳟精子浓度和活力与精液中VC的浓度有关，饲料中VC为130270MG/KG时表现出正向作用14；精液中VC浓度73G/ML时胚胎的存活率下降15。雌性虹鳟的卵重、产卵量随着VC摄人量和卵巢VC浓度的增加而增加。222VC对鱼类抗应激性的影响VC在提高鱼类对环境应激和病原体抵抗力方面的有效性已广为认知，在实践中也取得了良好的应用效果。许多情况如拥挤、抓捕、运输、水质恶化等都会引起鱼类的应激反应，所有的生理应激因素都将影响鱼类的健康状况，并降低体内微量营养素的储备。ISHIBASHI等的研究表明，与对照组相比，受到间歇性低氧应激的鱼类在添加高水平VC后继续维持正常生长，而应激所造成的死亡率随VC剂量的增加而降低16。高剂量的VC有助于维持较高的免疫活性并使鱼类健康生长。在水产养殖方面，有学者分别开展了VC对中华鰟鮍等水产动物抗缺氧能力的影响研究，结果表明，VC能够显著提高水产动物的抗缺氧能力，对水产动物因缺氧造成的危害有明显缓解作用。大量的研究发现许多疾病的发生均与脂质过氧化及免疫功能低下有关，抗氧化营养素如维生素C等有清除体内自由基的抗氧化作用，对免疫功能的调节也有报道，补充抗氧化维生素可以纠正和提高机体的免疫反应。同时某些抗氧化营养素之间存在协同作用。VC可防治坏血病，既可作为羟化酶辅基参与动物结缔组织、骨骼、血管细胞间质等形成，还可作为还原剂提高动物体的抗氧化能力，是一种动物必需的、具有多重生物学功能的营养素1718。在生物体内，VC以氧化型或还原型形式存在，既可作为氢受体又可以作为氢供体，是最重要的还原剂和抗氧化剂之一，在体内各种氧化还原反应中发挥重要作用1920。VC具有D和L型光学异构体，其中LVC是自然界存在并具有生理活性的异构体，而DVC通常不具有抗坏血酸功能。VC参与许多生理过程，如生长、繁殖、发育、伤口愈合、免疫和应激反应等。尽管鱼类正常所需的VC是微量的，但是，为了提高鱼类的抗应激和抗病能力，对VC的需求大大提高2122。而许多鱼类由于缺乏L古洛内酯氧化酶LGULONORLACTONEOXIDASE而不能自行合成VC，因此，养殖鱼类必须在饲料中添加VC。1材料与方法11实验动物驯养麦穗鱼（4G02G）购买自沈阳小津桥花鸟鱼市场，在去氯自来水中驯养2天，水温控制在1824之间，光照周期12H。刚购回的鱼用20PPM的高锰酸钾溶液浸泡消毒3分钟，然后置于塑料水桶中暂养，暂养期间不投喂饲料。待麦穗鱼适应环境后，选择健康无病，游动正常，大小基本一致，体重相近的个体进行实验。12实验仪器和药品121实验仪器电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；记号笔；笔记本；白大褂；手套；渔网塑料水桶；250ML锥形瓶；保鲜膜；皮筋。122实验药品维生素C片（东北制药有限公司）；牛磺酸，食品级，纯度为987（北京嘉康源科技发展有限公司）。13实验方法131实验操作步骤实验采用保鲜膜密闭锥形瓶的方法进行，先用分析天平称量药品装入250ML锥形瓶（实际容量为320ML）中，分别加一定量事先曝气的自来水溶解药品，将实验用的鱼挑选大小相当活动状态良好的放入瓶内，然后将水加满，用保鲜膜封口，注意瓶内不留气泡，然后倒立在盛水的托盘中，观察鱼的死亡时间，并做下记录，每组实验重复4次。132实验分组1321VC实验组将麦穗鱼随机分为5组，每组5尾，放入250ML的锥形瓶中。对照组装满自来水，4个实验组分别装入VC浓度为01G/L、03G/L、06G/L、09G/L的自来水溶液。1322牛磺酸实验组将麦穗鱼随机分为5组，每组5尾，放入250ML的锥形瓶中。对照组装满自来水，4个实验组分别装入牛磺酸质量分数为05，10，15，2的自来水溶液。1323牛磺酸和VC联合作用组将麦穗鱼随机分为5组，每组5尾，放入250ML的锥形瓶中。对照组装满自来水，4个实验组分别装入质量分数为03G/LVC1TAU，06G/LVC1TAU，03G/L15TAU，06G/L15TAU的混合溶液中。14数据分析统计分析以SIGMASTATV31软件采用ONEWAYANOVA方差分析及TUKEYS检验法，组间比较用TTEST检验，各组数据以平均值标准误表示。以P005、P001和P0001表示差异的显著性。采用EXCEL2010软件绘制图表。2结果与分析21观察结果麦穗鱼在密闭缺氧条件下，从开始的正常游动到身体渐渐失去平衡，一段时间后游动缓慢，丧失游动能力，口和鳃偶尔开闭，最后死亡。死亡时部分鱼飘浮在水体上方，同时口和鳃张开，有的鱼体稍弯曲，僵硬，眼睛充血。22实验结果221牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响图1不同浓度牛磺酸对麦穗鱼抗缺氧能力的影响根据图1可以看出，不同质量分数的牛磺酸溶液对麦穗鱼的抗缺氧能力的影响不同。在4个不同浓度的牛磺酸溶液中，麦穗鱼的耐缺氧存活时间均高于对照组，其中质量分数为1，15和2的牛磺酸溶液使麦穗鱼的抗缺氧能力显著改善，其中质量分数为05的实验组与对照组有非常显著差异（P001），质量分数为1，15和2的实验组与对照组有极显著差异（P0001）。质量分数为1时，麦穗鱼的抗缺氧存活时间比对照组提高了123倍；质量分数为15的情况下，麦穗鱼抗缺氧存活时间比对照组提高了164倍；质量分数为2时，麦穗鱼的抗缺氧存活时间比对照组提高了162倍。222VC对麦穗鱼抗缺氧能力的影响图2不同浓度VC对麦穗鱼抗缺氧能力的影响根据图2可以看出在浓度分别为01G/L、03G/L、06G/L和09G/L的VC溶液中，麦穗鱼的耐缺氧存活时间都比对照组长，其中VC浓度为03G/L，06G/L和09G/L时，麦穗鱼的耐缺氧时间有显著提高。浓度为06G/L和09G/L的VC溶液与对照组有极显著差异（P0001）。VC浓度为06G/L时，麦穗鱼的抗缺氧存活时间比对照组提高了139倍；VC浓度为09G/L时，麦穗鱼抗缺氧存活时间比对照组提高了155倍。223牛磺酸和VC联合作用对麦穗鱼抗缺氧能力的影响图3不同浓度牛磺酸与VC混合溶液对麦穗鱼抗缺氧能力的影响根据图3可以看出，不同浓度的混合溶液中的麦穗鱼的耐缺氧存活时间都比对照组要长，而且与对照组都有极显著性差异（P0001）。联合实验和VC与牛磺酸分别单独作用相比较数据见表1。表1联合实验和VC与牛磺酸分别单独作用相比较组别平均存活时间（MIN）与对照组相比对照组722903G/LVC1TAU12541722806G/LVC1TAU11941640303G/LVC15TAU11731611506G/LVC15TAU131918121对照组（VC）659503G/LVC7581149406G/LVC92313995对照组（TAU）4261TAU5251232415TAU702164793讨论与结论31讨论已有资料表明，牛磺酸是维持细胞功能稳态的重要物质，具有增强细胞对缺血和缺氧的耐受能力，防止多种致病因素引起的细胞钙超载和脂质过氧化损伤的作用。牛磺酸还能保护血浆成分和血细胞免受氧化剂和自由基的损伤，对红细胞的稳定有明显的保护作用。在大鼠、小鼠、豚鼠等哺乳动物中所做的大量试验证明牛磺酸能改善缺血、缺氧所致的组织能量代谢紊乱，改善细胞膜结构，延长其存活时间2329。罗璨等观察了牛磺酸对大鼠持续性局部病灶性脑缺血的影响，研究显示，牛磺酸可通过增强脑组织SOD活性，提高清除氧自由基能力，减轻脑缺血后的炎症反应，从而发挥对脑缺血的保护作用30。牛磺酸分子中所含硫基是天然的氧自由基清除剂，推测其可通过减轻自由基对SOD酶结构与活性的损害发挥保护作用。本实验采用密封瓶口的方法，瓶中水的溶氧量一定，在相同溶氧量条件下，随着鱼对氧的消耗，二氧化碳会从鳃排出，这样随着二氧化碳分压升高和PH降低，加重了缺氧程度，最后造成鱼呼吸中枢麻痹而死亡。缺氧对呼吸中枢的直接作用是抑制，这种抑制随着缺氧程度的加深而加强，直到呼吸停止，因为严重缺氧时呼吸中枢会低水平活动或传人冲动无效，出现呼吸抑制反应，最后鱼窒息死亡，同时脑和心脏缺氧也是死亡的重要原因。在本实验中，通过麦穗鱼鳃上皮进入血液的氧，约98是以血红蛋白结合的形式存在于红细胞内，约2的氧以物理性溶解态存在于血浆中。从目前的资料分析，牛磺酸具有维持细胞功能稳态的作用，具有增强细胞对缺血、缺氧的耐受力，防止多种致病因素引起的细胞钙超载和脂质过氧化损伤的作用。有试验证明，牛磺酸能保护血浆成分和血细胞免受氧化剂和自由基的损伤，对红细胞膜的稳定有明显的保护作用。加入牛磺酸使鱼血液中的红细胞膜稳定，提高对氧的运输能力，或在氧分压下降时提高血红蛋白与氧的亲和力，因而麦穗鱼的存活时间得到了明显提高。鱼类好氧而容易产生各种自由基，如果产生的自由基过多，便会抑制抗氧化酶的活性，导致脂质、蛋白质、DNA和其他生物大分子被氧化而破坏这些大分子和生物膜31。VC最主要的作用就是中和体内所产生的自由基。GENDY等研究表明，VC可以直接快速地清除自由基并抑制自由基的形成，从而解除肝脏的毒性；VC还可以对抗许多有毒物质，包括一些重金属；VC还能刺激一些能够解除肝脏毒性的酶来抵御各种应激反应的侵害32。在低温条件下，在日粮中添加抗氧化剂，动物可以通过维持寒冷条件下氧的供需平衡，有效降低心脏在冷应激条件下所带来的负作用33。本实验中，浓度为06G/L和09G/L的VC溶液对麦穗鱼的抗缺氧能力有极显著改善，说明VC对麦穗鱼的抗缺氧能力确实有提高作用，这说明VC对缺氧损伤具有保护作用。在常规养殖环境下，鱼类的抗氧化防御系统主要是通过各种抗氧化酶来阻止过量ROS形成。在细胞质和线粒体中，氧离子可被SOD催化为H2O2，后者在CAT和GPX的共同作用降解为H2O和O2，从而消除氧离子的毒害。GR主要负责将氧化的谷胱甘肽还原为谷胱甘肽。还原型谷胱甘肽GSH）是含硫基的非蛋白抗氧化物，它也可以解除H2O2和脂质过氧化物的毒性。GSH还可以作为GPX、GR、GST等抗氧化酶的重要辅因子。使用VC时，能够更好地提高抗氧化酶的活性，同时能够作为GPX、SOD等酶的辅因子，感应抗氧化酶的活性，有效地降低脂质和蛋白质氧化。马文涛等34报道在维生素C慢性给药中，大鼠急性应激状态时脑组织SOD活力未见明显改变，提示维生素C具有非常强的抗自由基作用，基本能消除自由基对神经细胞的损害，从而具有神经保护作用。在联合实验中，不同浓度的牛磺酸和VC组配不同，对麦穗鱼的抗缺氧作用均比VC和牛磺酸单独作用效果好，说明在牛磺酸和VC联合作用下，麦穗鱼的抗缺氧能力得到了提高，而且效果较牛磺酸与VC单独作用明显，虽然其真正作用机理还不清楚，两者的联合作用机制有待进一步研究。本实验充分说明了一定浓度下牛磺酸和VC以及两者联合作用都对缺氧损伤同样具有保护效应，可通过对神经系统的调节以提高麦穗鱼的抗缺氧能力，其中1、15、2浓度牛磺酸溶液、06G/L和09G/L浓度的VC溶液以及15TAU06G/LVC混合溶液的效果最好，其各自的具体作用机制有待于进一步研究探讨。32结论牛磺酸和VC都具有增强麦穗鱼抗缺氧能力的作用。（1）不同浓度牛磺酸溶液中的麦穗鱼存活时间与对照组比较有不同程度的提高，以质量分数为1、15、2的溶液效果最为明显P0001，表明牛磺酸对麦穗鱼的抗缺氧能力有提高作用。（2）不同浓度的VC溶液对麦穗鱼的抗缺氧能力呈现剂量依赖效应。浓度为06G/L和09G/L的VC溶液对麦穗鱼抗缺氧能力有极显著改善（P0001），表明VC对提高麦穗鱼的抗缺氧能力有明显效果。（3）在联合实验中，牛磺酸和VC的混合溶液对麦穗鱼的抗缺氧能力都有明显提高（P0001），而且在同种药品同种浓度下，比牛磺酸与VC分别单独作用时效果更明显，说明二者之间存在协同效应。参考文献1HAYESKCCAREYRSCHMIDTSYRETINELDEGENERATIONASSOCIATEDWITHTAURINEDEFICIENCYINTHECATJSCINCE,1996,188949532温宝书,张敏牛磺酸的细胞保护作用J中国药学杂志,1995,3084514523韩春来,王茂荣影响脑功能的活性氨基酸牛磺酸J中国食品与营养,2001,446474何天培,顾景范牛磺酸对应急大鼠第二信使及心肌离子含量变化的影响J营养学报,1998,2032602655魏智清,于洪川,邱小琮等牛磺酸对泥鳅和麦穗鱼抗缺氧能力的影响J黑龙江畜牧兽医,2005,1072746魏智清,杨涓,赵红雪等牛磺酸对鲫抗缺氧能力的影响J淡水渔业,2006,3617107邱小琮,赵红雪,魏智清牛磺酸对鲫鱼密闭缺氧存活时问和血红蛋白含量的影响J信阳师范学院学报自然科学版,2006,1921791848张书松,王春秀,高春生牛磺酸对黄河鲤鱼抗缺氧能力的影响J水生动物营养,2008,0256579BENDICHATHEANTIOXIDANTROLEOFVITAMINJCADVFREEBIOLMED,1986,241910翟惠敏,李亚洁氧自由基对脑损伤的作用和维生素的防护作用J南方护理学报,2001,811811DAIDEZ,CHENSHIH,FENGYTEAPOLYPHENOLSANDQUERCETINPREVENTINGTHEHEART,BRAINANDLIVERFROMTHEINJURYBYFREERADICALSINCOMPARISONWITHASCORBICACIDJCHINJNATMED,2004,2422312许友卿,易波,丁兆坤维生素E和维生素C的协同抗氧化作用及对水产动物的影响J饲料工业,2011,3214596213刘成梅,梁汉萦,刘伟等罗非鱼鱼皮多肽的超滤分离及其抗氧化活性研究J食品科学,2008,290522723014DABORWSKIK,CIERESZKOAASCORBICACIDANDREPRODUCTIONINFISHENDOCRIONREGULATIONANDGAMETEQUALITYJAQUACULTURE,2001,3262363815魏万全,姚冰,JACQUESGABAUDAN水产动物对维生素C和维生素E的营养需求J饲料广角,2003,9313316ISHIBASHIY,KATOK,IKEDAS,ETALEFFECTSOFDIETARYASCORBICACIDONTOLERANCETOINTERMITTENTHYPOXICSTRESSINJAPANESEPARROTFISHNIPPONSUISANGAKKAISHI,1992,582147215217赵红霞,曹俊明,谭永刚等军曹鱼幼鱼维生素C需要量的研究J动物营养学报,2008,20443544118钱美亚,牛翠娟,井润贞等外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长、维生素C合成和肝脏维生素C含量的影响J动物学报,2008,54231931619TATLISPEFFECTSOFSELENIUMANDVITAMINCSUPPLEMENTEDHIGHENERGYDIETONPHYSICALPERFORMANCE,NUTRIENTRETENTIONANDRELATIVEORGANWEIGHTSINCOLDSTRESSEDBROILERSJINTERNATIONALSYMPOSIUMONSELENIUMINHEALTHANDDISEASE,2006,10121320TATLISPSEVENI,YILMAZM,ETALTHEEFFECTSOFTURKISHPROPOLISONGROWTHANDCARCASSCHARACTERISTICSINBROILERSUNDERHEATSTRESSJANIMALFEEDSCIENCEANDTECHNOLOGY,2008ARCIAF,PILARSKIF,ETALESTABLISHMENTOFBCWM1CELLLINEFORWALDENSTROMSMACROGLOBULINEMIAWITHPRODUCTIVEINVIVOENGRAFTMENTINSCIDHUMICEJSCIENCEOFTHETOTALENVIRONMENT,2009,4073668367322SARMAK,PALAK,SAHUNP,ETALANTIOXIDANTACTIVITYOF5,10DIHYDROINDENO1,2BINDOLESCONTAININGSUBSTITUENTSONDIHYDROINDENOPARTJBIOORGANICMEDICINALCHEMISTRY,2009,176583658923魏智清,张振汉,于洪川等牛磺酸对小鼠耐力影响的研究J氨基酸和生物资源,2003,251656624王丽娟,王勇牛磺酸药理作用的研究进展J天津药学,2004,165464825袁国平,陈赛贞牛磺酸应用研究进展J海峡药学,2004,163202326张钧,郭勇力牛磺酸对运动力竭大鼠心肌线粒体的保护作用J中国运动医学杂志,1998宜龙,陈吉棣牛磺酸对大鼠急性运动后自由基代谢、膜流动性及钙转变的影响J中国运动医学杂志,1999,181172128张列祥,刘冰,张九芹等牛磺酸对小鼠运动能力的影响J蚌埠医学院学报,2004,291161829魏源,李良鸣,罗桂珍等服用牛磺酸和训练对力竭运动大鼠红肌线粒体的保护作用J中国运动医学杂志,2003,22218418630罗璨,郭莲军,殷光甫牛磺酸对大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用J中国药理学通报,2004,20551251631TALAZO,GULCINI,GOKSUS,ETALDIETARYLIPIDLEVELINDUCEDANTIOXIDANTRESPONSEINMANCHURIANTROUT,BRACHYMYSTAXLENOKPA