低聚糖与水溶性膳食纤维对婴儿肠道菌群益生作用研究（可编辑）

低聚糖与水溶性膳食纤维对婴儿肠道菌群益生作用研究黄品只发食品科技年第蜷第碉低聚糖与水溶性膳食纤维对婴儿肠道菌群益生作用研究秦雪梅,刘静,霍责成东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,哈尔滨摘要目的通过体外静置培养,分析低聚糖包括低聚果糖、低聚半乳糖和水溶性膳食纤维聚葡萄糖对婴儿肠道茵群的益生作用。方法取完全母乳喂养的新鲜婴儿粪便,加已灭菌的磷酸盐缓冲液,离心,取其上清液按的体积比加到培养基中,在厌氧箱中静置培养,在不同时间取样,测定婴儿肠道的茵落状态及其各种肠道茵群的数量变化,用益生指数表示通过测定不同时间代谢产物的来判断低聚糖和水溶性膳食纤维的抗发酵能力,和被降解速率,最后分析代谢产物中的短链脂肪酸含量,综合此较它们的益生作用。结果分析,、都有一定的益生作用,的抗发酵能力比较显著。关键词低聚糖水溶性膳食纤维值短链脂肪酸中图分类号文献标志码文章编号,/,收稿期通讯作者基金项目东北农业大学生物乳制品理论与技术创新团队项目。作者简介秦雪梅,女,河北张家口人,硕士研究生,研究方向为乳制品发酵。堍食品科技第卷第期通常认为,益生元是那些能够选灭菌待用。碳水化合物溶液,/通过择性地促进机体肠道内原有的一种或有限几种有孔径过滤添加到培养基中,作为唯一的碳益细菌益生菌生长或其活性的一种非消化性的源。公司通过孔径滤膜过食品功能因子】。主要是指各种寡糖或低聚糖,滤除菌后添加到培养基中。在厌氧条件下培养,它们除了能增殖双歧杆菌、乳酸杆菌之外主要培养发酵的过程中受控制【。主要仪器高效液相色谱仪的发酵终产物是短链脂肪酸。目前一些研究认为聚葡萄糖也具有益生元的作用,可促进肠色谱柱一柱道双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌的生长繁殖,同示差折光检测器时产生大量短链脂肪酸,如乙酸、醋酸、叶酸和厌氧箱离心机一一高乳酸,改变肠道,改善有益菌群的繁殖环境,功率恒温数控超声波清洗器一型。从而加快肠道蠕动,使粪便顺利排出,可有效地预防便秘。便秘的不良后果有很多,时常伴有实验方法益生作用为了评价碳水化合物对肠道重食欲不振,导致营养不良、精神萎靡、肠道功能紊乱,这样会加重便秘。由此,找到对婴儿肠道要有益菌促进生长的能力,在低聚糖和聚葡萄菌群有益生作用,可以有效预防婴儿便秘的益生糖发酵的、时分别用无菌注射器取元尤为重要引。婴儿理想的益生元应是被益生菌发酵液,测定其菌落总数和双歧杆菌数、乳高度选择性发酵的,可以促进双歧杆菌、乳酸杆杆菌数、大肠杆菌数和梭菌数。双歧杆菌数测菌增殖,抑制大肠杆菌等致病菌生长,其代谢产定/【乳酸杆菌数测定采用/梭菌数测定采用/物应和母乳喂养婴儿的代谢产物相似。目前对益生元作用的研究仍以体内分析法居多,这种方法大肠杆菌数测定采用/不但所需条件苛刻,而且费时费力。采用厌氧发菌落总数的测定采用/。同时测酵的体外分析方法,不但能节省时间,还能更好定发酵液的值,作为参考。地控制整个发酵过程。体外分析益生元的方法由为了比较各种碳源的益生影响,用下面的公等的静置培养基发展等的式计算生物指数三阶段恒化器或肠道模型法。等】/式中、分别表示培养一和等也分别采用了静置和动态培养方法,分析了大量寡糖及低聚糖的益生元活性,有定时问后双歧杆菌、大肠杆菌、乳杆的还结合了体内分析方法,证实了种方法的一致菌、梭菌与对应菌初始时间的菌数之等。本实验通过体外培养的方法,验比证其对婴儿肠道菌群的益生作用,为其在婴儿食为培养一定时间后的总菌数与初品的应用方面提供参考依据。始时间总菌数之比。定评定低聚糖和水溶性膳食纤维被微材料和方法生物的发酵速率,通过的变化来判断各种碳源材料和仪器被婴儿肠道菌群发酵的程度。分别在培养时间、试剂与材料低聚果糖、低聚半乳糖、时,取代谢产物,测定其,保龄宝生物股份有限公司聚葡萄糖同时计算出的下降值”。,观察不同碳源的发酵河南金润食品添加剂有限公司氢氧化钡、硫酸液的变化。锌分析纯,天津市东丽区天大化学试剂厂。代谢产物短链脂肪酸的测定培养基成分蛋白胨,酵母浸出物,高效液相色谱条件乙酸盐、丙酸盐和,丁酸盐的测定用色谱柱一,半胱氨柱,流动相是/的酸,胆盐,吐温,氯化血,过膜,脱气,流速是/,温度是红素/,刃天青,用。用示差折光检测器,进样量【”。蒸馏水定容至,调节为,下短链脂肪酸标准溶液的制备取甲酸、食品科技第卷第期乙酸、丙酸、丁酸标准品,加去离子水配成实验测定了位婴儿粪便中种肠道菌的菌数/的标准储备液,稀释至合适的浓度,各浓变化,分别以低聚糖和水溶性膳食纤维为唯一碳度取及试液注入色谱仪,平行测定次,以色源的研究中,发酵时,实验组中的双歧杆菌、乳酸菌及大肠杆菌的菌落总数都有所增加,谱峰峰面积定量。代谢产物中短链脂肪酸含量测定分别和组的双歧杆菌增长比较快,组的双歧杆在、时取发酵液上清液,加入菌增长速度相对比较缓慢。加剧烈震荡,自然沉发酵后,和组的乳酸杆菌数继淀,/离心,除去菌体和其续上升,双歧杆菌数有所下降,大肠杆菌和梭菌他微粒,取上清液进入液相色谱仪检测。的生长受到明显的抑制。但是组的双歧杆菌数和乳酸杆菌数都有明显的增长,大肠杆菌数下结果与分析降。以不同碳源为底物的婴儿粪样在静置发酵益生作用和的各细菌数见表。表不同碳源发酵过程中对婴儿肠道细菌数量的变化/比较缓慢,在之后的,组的下降幅度赶上通过计算得出的值如表所示,可知,在组,组与它们之间的差距逐渐拉大。发酵,、和都有一定的益生作用。由表可知,在开始的和以和在,的益生作用持续的时问比较长,效果为碳源的发酵组,下降幅度相近,比较快。以比较显著。组为碳源的发酵组相对其他组下降比较表以不同碳源为底物的婴儿粪样发酵的值慢。在之后的,以为碳源的发酵组下降幅度小,组最快,依次为。组下降速度比较缓慢,所需时间较长。由的变化此可见的抗发酵能力比较强。、和在发酵过程中、代谢产物中短链脂肪酸含量、的见表。表不同碳源代谢产物含量的平均值/,平均值表底物为不同碳源的粪样在不同发酵时间中的由表可知,在发酵开始,组的就表现出明显的下降优势,组的下降的速度表不同碳源的粪样在各个时间段的变化值由表可知,所有底物发酵后,乙酸盐含量都有所增加发酵后,乙酸盐含量较时嘉食品科技年第卷第,期量品开发有明显增加,组的乙酸盐含量最高。和物的溶解度、聚合度等化学特性。肠道菌群通过发酵组乙酸盐增加幅度相近,且实际含量相产生,对人体多个器官和代谢产生较大的差不多。发酵后的丙酸盐含量均有明显增加,影响。结肠上皮细胞中的代谢活动,可能组比较快,组的丙酸盐含量比较少,是肠道细菌与宿主问相互作用最重要的体现。种但是丁酸盐含量和组高。发酵后主要的,如乙酸、丙酸和丁酸,对上皮细胞的,组的丙酸盐含量还是最少,组的丙的代谢具有重要意义。母乳喂养的婴儿几乎不产酸盐含量相对比较高。总体分析,组的主要生丁酸盐,而乙酸盐占,接近于总的,是乙酸盐和丙酸盐,丁酸盐含量几乎很少和母乳喂养状态接近的被认为益生效果最好】。组和组的乙酸盐含量也比较高,还产生一本研究仅检测了主要的,如乙酸、丙酸、丁些丁酸盐。酸。发现的主要组成是乙酸,和母乳接可以看出,以为对照,以不同碳源为底近。但是其是否有一些副作用还有待研究。物的婴儿粪样发酵后,短链脂肪酸含量都有所被双歧杆菌降解,主要产生乙酸、丙增加。发酵后,组短链脂肪酸含量增加酸、叶酸和乳酸,从而改变肠腔,降解致病显著,尤其是乙酸盐含量。做高效液相分析时发物质,直接抑制病菌生长,并且加快肠腔推进现、和还产生了其他种类的短链脂肪运动。主要代谢成乙酸盐和丙酸盐,而几乎不酸,例如乳酸。产生丁酸盐和和相比,代谢产生了讨论百分比更高的乙酸盐和更低的丁酸盐,更接近母值是一个定量描述益生元作用的指标,公乳益生元的状态。另外,聚葡萄糖引起了双歧杆式是基于发酵过程中主要菌群数量的变化,通过菌和乳酸杆菌等有益菌的增殖,也引起梭状芽孢将这些数值带入公式进行计算,然后得出具体杆菌和大肠杆菌等致病菌的降低。在和的分数,即值公式中的字母表示的均是比组,乙酸含量也很高,但是丁酸盐含量也有所增值,即培养一定时间后的菌数与初始时间菌数之长。有研究报道,丁酸是上皮细胞特别重要的能比值越大,益生元作用越强。值是判断量来源,在细胞分化和生长中起着非常重要的作益生元作用的一种简单并且实用的方式,通过比用。目前丁酸对于婴儿的作用报道比较少,还有较值的大小,可以定性、定量地描述益生元的待于研究。通过上述研究,根据值、的下降作用。本实验中,通过比较和时值的平速度、量综合分析,、和对婴均值,可以看出、和都有一定的益生儿肠道都有一定的益生作用。在开始的,作用。相对来说,在开始的和组对婴的值相对比较高但是发酵后,的值儿肠道中双歧杆菌及乳杆菌的选择性增殖作用较比较显著。从下降的速度考虑,在开始的,高,在之后的时间发酵速度比较慢,组的益组和组下降幅度比较大在整个发酵过程生作用持续的时间比较长,在发酵时的值明中,组下降速度比较缓慢,可见的抗显增加。考虑可能是碳链偏长,聚合度高对婴儿发酵能力比较强。根据断,组代谢产肠道菌群的发酵作用有更高的抵抗力,导致发酵物中的乙酸含量比较高,丁酸盐含量比较少,和的时间延长,远端结肠逐渐膨胀,不容易被婴儿母乳接近。由此可知,这种碳源对婴儿肠道菌群肠道菌选择性发酵,发酵所需时间较长。益生