左卡尼汀口服液对2型糖尿病肾病的治疗作用及体内代谢的研究（可编辑）

左卡尼汀口服液对2型糖尿病肾病的治疗作用及体内代谢的研究捅要目的研究左卡尼汀口服液对型糖尿病肾病患者的治疗作用及机体血浆卡尼汀群浓度经时变化与疗效的关系。方法应用高效液相色谱法检测型糖尿病肾病患者血浆卡尼汀群即左卡尼汀、乙酰卡尼汀、丙酰卡尼汀的浓度筛选例型糖尿病肾病患者属早期糖尿病肾病期或临床型糖尿病肾病早期组期早期组,随机分为对照组与治疗组各例。两组均继续原糖尿病常规治疗,并停服降脂药物,治疗组加用左卡尼汀口服液治疗,疗程为周。观察治疗前、后组患者血糖、血脂包括、肾功包括、尿蛋白、体重的变化以及血浆卡尼汀群浓度的经时变化和代谢情况对治疗前后所有数据应用统计软件进行统计分析。结果对照组治疗前后比较,治疗组治疗前与对照组比较血糖、血脂、肾功、尿蛋白、体重、血浆卡尼汀群浓度各指标差别无统计学意义治疗组给药周、周后与治疗前比较,、体重均明显降低,明显升高和对照组比较,治疗组给药周后明显降低,明显降低,明显升高治疗组给药周后血与给药前比较明显下降治疗组尿给药周、周较治疗前、较对照组同期均明显改善治疗组、血浆浓度给药周、周与给药前及与对照组同期比较均明显升高,血浆浓度给药周比给药周明显升高。结论左卡尼汀口服液对型糖尿病肾病有积极的治疗作用,能明显提高患者血浆卡尼汀群的血药浓度,显著改善、体重、尿等临床指标。硕士研究生孙振龙药理学指导教师王春波教授曹玉副主任药师关键词糖尿病肾病左卡尼汀高效液相色谱法血浆药物浓度,。吕,廿,目录弓言第一章试验材料研究对象一艾暑导药品和试剂第二章试验方法试验分组与知情同意治疗方法检测指标血样品采集方法血脂、血糖、肾功、尿蛋白的测定建立检测血浆、的方法统计学处理第三章结果两组患者治疗前后血脂、血糖、体重的比较两组患者治疗前后肾功能及尿蛋白的比较两组患者治疗前后血浆左卡尼汀浓度的比较第四章讨论结论参考文献”综杰苤综述的参考文献攻读学位期间的研究成果”附录“致谢”学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明引言引言糖尿病,是世界范围内的常见病、多发病,据年报告,患者在全球己超过亿,在我国患病率达,远高于全球平均水平【】,而糖尿病肾病,作为严重的慢性并发症之一,在型患者中其发病率达【】,且随着患病时间延长发病率升高,据报道年我国住院患者中发病率达【,已是大多数国家终末期肾病,的首要病斟”】,其死亡率高、致残率高,导致患者生活质量差,家庭和社会负担加重。一旦进展至尿毒症期需行透析和移植治疗、治疗效果差,因此的早期治疗极其重要,目前对的治疗主要包括严格控制血糖和血脂、控制血压、低蛋白饮食、抗氧化应激、降低尿蛋白、中医药治疗及防治并发症等【引,对早期防治方法的探究一直是相关医务工作者的热点话题。患者早期肾小球基底膜增厚而呈高滤过状态,导致白蛋白滤出增加,随之肾小球滤过率逐步下降,而肾功能破坏亦会导致肾小管问质损害【】,导致肾小管的重吸收功能下降,肾脏滤过和重吸收功能下降导致白蛋白等物质排出增加,故临床上患者以蛋白尿为主要表现。左卡尼汀,是一种天然营养素,在机体能量代谢中必不可少,可促进脂类、葡萄糖以及氨基酸的代谢而改善机体能量供应【】,其中以促进脂肪的氧化代谢作用最为突出,研究证明给患者补充可提高胰岛素敏感性逆转胰岛素抵抗【。剐改善糖耐量进一步有助于患者血糖的控制。还是一种优良的抗氧化剂,可增加自由基清除酶活性而对抗氧化应激和炎症反应,保护细胞膜功能,从而对许多脏器和组织起到保护性作用【。鉴于对维持机体各方面正常生理功能必不可少,临床上已被广泛应用于心血管疾病、肾脏疾病、肝脏疾病、神经系统疾病、减肥等的治疗】。国外有报道患者体内浓度可比正常人低,而伴有慢性并发症者比不伴并发症者缺乏更明显,补充应能对及其并发症有治疗作用。美国食品药物管理局认为“公认安全无毒的,并批准其应用于体内明显缺乏的的治疗和预防。现已作为透析治疗患者的常规用药,但因患者肾功能损害严重,虽有治疗作用,已不能逆转疾病发展。是的慢性并发症之一,又是的最主要原因之一,若能早期给予治疗应有较好疗效。目前对早期临床上应用治疗的研究较少,仅国内陈婷报道了明显改善早期血脂代谢,降低血粘度,近年来孙晔萍】和丁美玲等报道了注射液还可明显改善早期患者血糖,并显著减少尿蛋白排出,能有效保护患者肾功能。相关报道均为静脉给药治疗未见口服液治疗报道,给药剂量天或天,治疗周或周即有明显疗效,针对左卡尼汀口服液和注青岛大学硕士学位论文射液的疗效对照研究方面丁峰报赳】了对血液透析患者口服和静脉给药治疗周疗效相当,且口服液更为方便、经济,而对早期体内的缺乏程度及治疗后血浆浓度与疗效的关系对比未见相关报道。因此本研究筛选患者均属早期或临床早期组,随机分为治疗组和对照组,对治疗组予以应用口服液治疗,剂量天,治疗周期延长至周,观察患者的血脂、血糖、肾功、尿蛋白等临床指标的变化,并且在给药前后应用本课题组前期建立的法【。】检测患者血浆卡尼汀群包括及其酯酰化物乙酰左卡尼汀,与丙酰左卡尼汀,的浓度,并探究其浓度经时变化与疗效的关系,为今后的临床治疗提供依据。第一章试验材料研究对象病例选择筛选年月至年月曾在本院治疗已确诊为型且符合下列标准的患者例,其中男性例,女性例年龄岁病程年。入选标准符合年国际糖尿病联盟的诊断标准,确诊为型参考的期诊断标准并结合临床实际,属于早期期及期,尿微量白蛋白在或临床型早期组即期早期组,尿微量白蛋白。常规治疗,如饮食控制、适当运动、应用降糖药物皮下注射胰岛素,空腹血糖控制在左右无高血压病或有高血压病血压控制在/以下查血肾功能各项指标、均正常无烟酒不良嗜好。排除标准患有心脏、肝脏或除外的其他肾脏疾病对本品过敏或其他严重的不良反应第一章试验材料试验前有应用肝肾毒性药物者长期服用降脂药物,病情不允许停用者试验期间不配合试验要求随意中断治疗者试验期间原有病情加重或患新病,需要立即终止实验者。仪器全自动尿液分析仪烟台宝威生物技术有限公司全自动生化分析仪美国雷杜公司美国沃特世公司液相色谱仪系列德国罗氏公司全自动生化分析仪血液透析仪瑞典金宝公司双通道紫外可见光检测器系列美国沃特世公司恒温箱北京福意电器有限公司美国沃特世公司荧光检测器微量加样器潍坊三水检验设备有限公司上海市精密科学仪器厂可见分光光度计美国西特公司精密电子天平离心机德国雅培公司美国公司涡旋振荡器离心机上海手术器械厂湖恒迈自动化仪表有限公司三频超声波振荡器大湖机械中国有限公司酸度计高纯水发生器北京中慧天诚科技有限公司药品与试剂左卡尼汀口服液东北制药总厂,批号宝威尿液分析试纸烟台宝威生物技术有限公司批号北京九强生物技术有限公司批号尿素氮检测试剂盒肌酐检测试剂盒北京九强生物技术有限公司批号批号尿酸检测试剂盒北京九强生物技术有限公司北京九强生物技术有限公司批号总胆固醇试剂盒甘油三酯试剂盒北京九强生物技术有限公司批号批号高密度脂蛋白胆固醇试剂盒北京九强生物技术有限公司北京九强生物技术有限公司批号低密度脂蛋白胆固醇试剂盒批号葡萄糖试剂盒北京九强生物技术有限公司青岛大学硕士学位论文标准品东北制药总厂批号标准品美国西格玛公司批号标准品美国西格玛公司批号左卡尼汀衍生化试卜氨基葸美国西格玛公司卜乙基一二甲基氨基丙基碳酰二亚胺盐酸盐美国西格玛公司甲醇色谱纯美国霍尼韦尔公司批号乙腈色谱纯美国霍尼韦尔公司批号无水乙醇分析纯济南天宇化工有限公司批号乙醚分析纯莱阳精细化工厂批号氯仿分析纯青岛海滨化学试剂总厂批号盐酸分析纯莱阳精细化工厂批号冰醋酸分析纯美国天地公司批号磷酸二氢钠分析纯汕头金砂化工厂批号氢氧化钠分析纯青岛海滨化学试剂总厂批号磷酸氢二钠分析纯上海化学试剂有限公司批号超纯水青岛大学医学院附属医院腹膜透析液美国百特公司正常人血浆由莱阳市中心血站提供第二章试验方法试验分组与知情同意将入选的患者共例随机分为组,治疗组、对照组各例,两组年龄、性别、病程、病情等经统计学检验,具有可比性。试验前向组患者详细说明本次研究的背景目的、方法要求、药品对疾病的作用及不良反应,本着研究自愿、信息保密的原则,均取得组患者同意并知情签字,知情同意书如下。受试者知情同意书尊敬的受试者我们特邀您参加由青岛大学医学院的硕士研究生课题左卡尼汀口服液对型糖尿病肾病的治疗作用及体内代谢研究。该研究将在山东省莱阳卫校医院开展,受试者将被随机分为两组,治疗组给予左卡尼汀口服液服用,而对照组则不予左卡尼汀口服液服用。请您仔细阅读如下信息,并决定是否自愿参加本项研究。研究背景与目的左卡尼汀口服液主要成份左卡尼汀又名左旋肉碱,它是人体内的必需营养第二章试验方法素,其功能与机体的器官、组织代谢密切相关,主要是促进脂肪酸代谢,此外还有调节糖代谢、增加胰岛素敏感性、稳定蛋白质和细胞膜、抗氧化应激等作用,近年来日益受到重视,已被广泛应用于心血管疾病如冠心病、心力衰竭、肾脏疾病如肾功能衰竭、肝脏疾病如肝硬化、慢性肝炎、脂肪肝、糖尿病及其并发症、男性不育、肌肉萎缩、减肥等疾病的治疗与保健。我们本次研究主要针对型糖尿病肾病的早期和临床型患者,研究左卡尼汀口服液的治疗效果及其体内代谢与疗效的关系。服药要求在本研究中我们将对治疗组患者分次发放左卡尼汀口服液东北制药集团,批号药品,次,天次口服,持续用药周对照组不发放药品。治疗组和对照组在本研究期间均继续饮食控制、适当运动和药物降血糖皮下注射胰岛素,如诺和灵等糖尿病常规治疗方案,有高血压者继续服用降压药物使血压控制在/以下,停服其他降血脂药物。研究内容在本研究期间,我们将对您统一进行抽血化验肾功、血脂、血糖、血浆左卡尼汀浓度和留尿化验尿常规检查,为您检测体重和血压,时间安排为给药前、给药周和给药周各次,您需空腹状态下清晨采血和留尿,并在复诊时告诉我们您在服药期间病情的任何变化。可否同时参与其他临床研究为避免影响该研究结果,您在参加本研究期间不可参与其他药物或器械相关的临床研究。药品不良反应目前,左卡尼汀口服液已在临床应用多年,早已被美国食品药物管理局认为是“公认安全无毒”的,临床应用极少有不良反应发生,偶见口干、胃肠道轻度不适等,停药后即自行消失。因其能改善葡萄糖的利用,在服用本品时,可能会引发低鱼蕉,为安全起见,您在接受治疗过程中应注意监测血糖水平,确保其在相对安全的范围内临床上血糖为低血糖,如果您在研究期间出现任何不良反应,请随时联系我科医生,电话。对疾病影响与展望临床上左卡尼汀已广泛应用于肾脏疾病的治疗,尤其是慢性肾功能衰竭需行血液透析患者,可补充其因透析而加重的体内左卡尼汀缺乏,改善机体糖脂类的代谢,对肾脏有保护性疗效,但临床以应用注射液为主且多在肾衰竭期用药,而应用左卡尼汀口服液治疗早期肾病却比较少。通过本次研究的疗效观察等信息将有助于今后治疗方案的制定。酬劳补偿与权益维护青岛大学硕十学位论文为了补偿对您因参加本研究而可能产生的诸多不便,我们为对照组受试者提供的研究药品全部免费,而且在本项研究期间您的相关各项检查费用均由我们支付。左卡尼汀口服液临床应用广泛,已有丰富的临床科研资料。如果本研究中您的健康确因服用左卡尼汀口服液而发生与之相关的损害,请务必立即通知您的研究医生,他们将为您采取良好恰当的治疗措施。但如果因违背本研究的程序方案或因医疗事故而产生的损伤,我们则不予补偿。您的所有合法权利不会因为签署该知情同意书而受任何影响。信息保密我们将严格保密您的个人信息和相关医疗信息,您的相关临床资料结果将仅被用于本临床研究。,研究自愿本研究本着完全自愿参加的原则,您可以拒绝参加,也可研究过程中随时提出退出研究,但您需要及时通知我们。受试者知情同意声明以上有关本研究的资料介绍,我已充分了解,对参加本研究可能出现的治疗作用与风险表示理解。我自愿参加本文介绍的临床研究,签字如下受试者签名研究者签名一日日期期年月日年月日治疗方法治疗组和对照组均保持原糖尿病基础治疗方案不变,即所有患者均给予糖尿病教育、饮食控制、适当运动和药物降血糖皮下注射胰岛素,如诺和灵等,使空腹血糖控制在左右,无高血压或有高血压而服用降压药物血压控制在/以下,停服其他降血脂药物,治疗组予加服左卡尼汀口服液,次,天次,连续服用周。检测指标分别检测给药前、给药周、给药周两组受检者的血糖、血脂、血肾功、尿蛋白、体重、血浆卡尼汀群的浓度等指标。其中血脂检查包括甘油三酯、低密度脂蛋白、胆固醇和高密度脂蛋白肾功能检查包括血尿素氮、血尿酸和血肌酐尿蛋白为定性定性检查第二章试验方法血浆卡尼汀群包括左卡尼汀和其酯酰化物主要为、。样品检采集方法受检者空腹状态下次日清晨采血,无溶血,将血样入普通试管,予离心后取血清测定肾功、血脂、血糖取血样入肝素锂抗凝管,予。离心后取血浆,分别编号标记放入冰箱中冷冻备测血浆卡尼汀群浓度。受检者取晨尿中段尿约立即送检尿常规测尿蛋白。血脂、血糖、肾功、尿蛋白的测定由我院检验科同事用全自动生化分析仪测定血脂、血糖、肾功,用全自动尿液分析仪尿蛋白定性检测。血脂检测甘油三酯测定试验原理酶比色法测定血清中的含量。血清中加入缓冲液/氯酚/酶经下述反应后产生醌亚胺。而醌亚胺为红色化合物,在波长处吸光度与血清中的含量成正比。甘油甘油三酯一甘油甘油磷酸甘油磷酸二氢丙酮磷酸过氧化物酶氨基安替比林一对氯苯酚醌亚胺试验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应时间为,波长。总胆固醇测定测定原理酶比色法测定血清中的含量,经过下列反应醌亚胺红色化合物。醌亚胺在波长吸光度与血清的含量成正比。青岛大学硕士学位论文胆固醇酯酶胆固醇酯脂肪酸胆固醇胆固醇氧化酶九一口过氧化物酶一氨基安替比林苯酚醌亚胺,试验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应时间波长。高密度脂蛋白胆固醇测定试验原理胆固醇酯酶与胆固醇氧化酶经化学修饰后,与硫化环状糊精复合物、葡萄糖硫酸钠并用,使对、乳糜微粒等的酶反应性降低,只选择性与发生作用。在第一步反应中使、乳糜微粒与硫化环状糊精复合物、葡萄糖硫酸钠结合,在第二步反应中利用化学修饰的、,可直接测定。化学修饰胆固醇游离脂肪酸化学修饰胆固醇胆甾烯酮过氧化氢酶氨基安替比林苯醌色素试验方法使用全自动生化分析仪设置检测条件为温度,反应时间,波长。低密度值蛋白胆固醇测定试验原理胆固醇酯酶与胆固醇氧化酶经化学修饰后,将特异的表面活性剂加入,使选择性的溶解,以测定胆固醇。其他脂蛋白因受到糖化合物和表面活性剂的阻碍而不反应,以脂蛋白形式在反应液中残存。因此可直接测定。第二章试验方法化学修饰胆固醇游离脂肪酸化学修饰胆固醇胆甾烯酮过氧化氢酶氨基安替比林苯醌色素试验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应时间为,波长。血糖检测测定原理用葡糖糖过氧化物酶法,反应式如下葡糖糖氧化酶葡萄糖一葡萄糖酸过氧化物酶氨基安替比林苯酚红色醌类化合物在波长处比较样本和经同样处理的标准液的红色醌类化合物的吸光度,可计算得出样本中的葡萄糖含量。实验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应时间为。,波长肾功检测尿素氮测定测定原理第一反应,将血清中内源性氨去除。在第二反应中,在尿素酶的作用下,将尿素分解为氨,可依据谷氨酸脱氢酶的减少量测得氨的含量。酮戊二酸谷氨酸青岛大学硕士学位论文尿素酶尿素酮戊二酸谷氨酸试验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应波长在处,反应时间。肌酐测定测定原理在碱性环境中肌酐与苦味酸盐反应生成黄橙色复合物。肌酐苦味酸复合物的橙色程度与血清中的的浓度成下比。吸光度在波长与标本中的的浓度成正比。肌酐苦味酸肌酐苦味酸复合物试验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应时间为/。,波长尿酸测定测定原理酶比色法测定血清中的含量。啭品中的尿酸经下述反应,产生红色醌亚胺。醌亚胺颜色的强度与血清中的浓度成正比。尿酸酶尿酸斗尿囊素过氧化物酶氨基安替比林醌亚胺实验方法使用全自动生化分析仪,设置检测条件为温度,反应时间为。,波长尿蛋白检测测定原理试纸区待测物可发生特异显色反应,通过尿液分析仪自动识别试纸区颜色的变化,可给出测试结果,颜色越深,浓度越高。其中依据指示剂蛋白误差第二章试验方法法原理检测尿蛋白,蛋白质与染料结合形成能产生色变的复合物,尤其是对白蛋白的反应最为敏感。试验方法使用尿液分析仪,尿试纸浸透尿液后放吸水纸上吸去多余尿液,将其放在自动分析仪传送带上,按开始键自动检测。建立检测血浆、的方法【】色谱条件色谱柱,“,流动相乙酸铵乙腈流速以进样量山检测波长,贮备液和标准血样的制备空白血浆取健康成人血浆,装入血液透析仪中,在腹膜透析液,以的速率持续进行透析无,将条件下,用血浆中的,与去除。持续透析结束后,将空白血浆按每份分装,于冷冻贮存。,配得衍生化试剂的配制精密称取,用丙酮溶解并定容至,加入。的贮备液用前配制溶液取。磷酸二氢钠溶解混匀后定容至标准贮备液、混合标准液的配制分别精密称取标准品吕和,得浓度分别为,用水分别溶解并定容至并混匀,的标准贮备溶液,然后依次量取、贮备液,用水定容即配得血浆混合标准液,其中的浓度为一,的浓度为岬,的浓度为一,冷藏保存。标准血样向空白血浆中加入各自精密量取血浆混合标准液,配置标准血样的浓度系列依次为,的浓度系列依次为,的浓度系列依次为,冷藏保存。质控血样配制方法同标准血样,分别配制、浓度依次为,低浓度,中浓度,高浓度三种质控血样。青岛大学硕十学位论文血浆样品的处理量取混匀后再用血浆样品,加入乙腈,涡旋离心磷酸缓冲液,再加入,取山上清液,先加入山盐酸,涡旋混匀,加入从溶液,涡旋混匀,之后在涡旋同时缓缓加入溶液,混匀后放置在室温并且避光条件下反应。待衍生化反应完成后,加入乙醚每次涡旋洗涤次,缓慢吸除乙醚相,向水相中加入磷酸缓冲液,再次涡旋混匀,并用三氯甲烷每次分别洗涤次,缓慢取出水相,加入山磷酸缓冲液,涡旋混匀,取“准备进样分析。、和衍生化过程的结构/的结构衍生化过程。/忙仁一或,第二章试验方法技飞或,氨基葸衍生物衍生化副产物统计学处理应用统计软件进级资料采用秩和检验,以青岛大学硕十学位论文第三章结果本临床试验中治疗组和对照组各有例患者因未按试验要求服药或糖尿病常规治疗不严格,已按筛选标准予以剔除,最终完成试验人数对照组和治疗组各人。两组患者治疗前后血糖、血脂、体重的比较两组患者治疗前后血糖的比较对照组治疗前后各时间比较血差别无统计学意义治疗组给药周与给药前比较、给药周与给药周比较、给药周与给药前比较,血均明显降低治疗组与对照组比较,给药前、给药周血差别均无统计学意义,给药周治疗组血糖明显降低,详见表。表口服液对组患者血糖的影响结果,注与同组给药前比较,注与同组给药周比较,注与对照组同期比较,。两组患者治疗前后血甘油三酯的比较对照组治疗前后各时间比较血差别均无统计学意义治疗组给药周与给药前比较、给药周与给药周比较、给药周与给药前比较,血均较前明显降低治疗组与对照组比较,给药前、给药周、给药周比较,血差别无统计学意义。详见表。表服液对组患者血甘油三酯的影响结果孑,注与同组给药前比较,注与同组给药周比较,第三章结果两组患者治疗前后血胆固醇的比较对照组治疗前后各时间比较血胆固醇差别均无统计学意义治疗组给药周与给药前比较、给药周与给药周比较、给药周与给药前比较,血均较前明显降低治疗组与对照组比较,给药前、给药周、给药周血差别均无统计学意义,详见表。表服液对组患者血胆固醇的影响结果。注与同组给药前比较,注与同组给药周比较,两组患者治疗前后血低密度脂蛋白胆固醇的比较对照组治疗前后各时间比较血低密度脂蛋白胆固醇差别均无统计学意义治疗组给药周与给药前比较、给药周与给药周、给药周与给药前比较比较,血均较前明显降低治疗组与对照组比较,给药前、给药周血差别均无统计学意义,给药周治疗组明显降低,详见表。表口服液对组患者血低密度脂蛋白胆固醇,的影响结果,注与同组给药前比较,注与同组给药周比较,注与对照组同期比较,两组患者治疗前后血高密度脂蛋白胆固醇的比较对照组治疗前后各时间比较血高密度脂蛋白胆固醇差别均无统计学意义治疗组给药周与给药前比较、给药周与给药周比较,血均较前明显升高,给药周与给药前比较,血均较前明显升高治疗组与对照组比较,给药前、给药周血差别均无统计学意义,给药周治疗组明显升高,详见表。青岛大学硕学位论文表口服液对组患者血高密度脂蛋白胆固醇的影响结果,注与同组给药前比较,注与同组给药前比较,注与同组给药周比较,注与对照组同期比较,两组患者治疗前后体重的比较对照组治疗前后各时间之间比较体重差别均无统计学意义治疗组体重给药周与给药前、给药周与给药前、给药周与给药周比较明显下降治疗组与对照组比较给药前、给药周、给药周各期差别均无统计学意义,详见表。表服液对组患者体重的影响结果,注与同组给药前比较,注与同组给药周比较,两组患者治疗前后肾功能及尿蛋白的比较两组患者治疗前后血尿素氮的比较对照组治疗前后各时间之间比较血差别均无统计学意义治疗组血给药周与给药前、给药周与给药周比较差别均无统计学意义,给药周与给药前比较明显下降治疗组与对照组比较给药前、给药周、给药周各时间之间比较血差别均无统计学意义,详见表。第三章结果表服液对组患者血尿素氮的影响结果,注与同组给药前比较,两组患者治疗前后血肌酐的比较对照组血治疗前后各时间之间比较差别均无统计学意义治疗组给药前、给药周、给药周各时间之间比较差别均无统计学意义治疗组与对照组给药前、给药周、给药周各时间之间比较血差别均无统计学意义,详见表。表服液对组患者血肌酐的影响结果,注同组不同期比较及同期不同组间比较均无显著性差异两组患者治疗前后血尿酸的比较对照组血治疗前后各时间之间比较差别均无统计学意义治疗组血给药前、给药周、给药周各时间之间比较差别均无统计学意义治疗组与对照组给药前、给药周、给药周各时间之间比较血差别均无统计学意义,详见表。表服液对组患者血尿酸的影响结果,注同组不同期比较及同期不同组间比较均无显著性差异两组患者治疗前后尿蛋白的比较青岛大学硕士学位论文对照组尿治疗前后各时间之间比较差别均无统计学意义治疗组尿阴转率给药周和给药周与给药前比较、给药周与给药周比较均明显阴转治疗组比对照组比较尿结果比较,治疗前无显著性差异,给药周明显阴转,给药周显著阴转。结果见表。表口服液对组患者尿蛋白的影响结果注与同组给药前比较,注与对照组同期比较,注与对照组同期比较,混合组分专属性试验分别取空白血浆、标准储备液、标准储备液、标准储备液和混合标准液,按“”项下方法进行处理,得空白血浆、标准液、标准液、标准液和混合标准液,分别进样分析进行测定,结果证实混合标准液测得的色谱峰与空白血浆、标准液测得的色谱峰均对应一致,测得混合标准液中、和的色谱峰按时间顺序分别在、依次出现,各自色谱图见图。,“。一一分钟图空白血浆的图谱第三章结果图左卡尼汀皿的标准图谱青岛大学硕士学位论文/、一一分钟图混合标准样的图谱线性关系的考察用空白血浆稀释不同浓度的混合标准溶液,按”方法进行处理,分别测定后,横坐标为样品浓度,纵坐标为样品峰面积】,计算得出血浆样品浓度的线性回归方程,证实样品浓度与样品峰面积之间线性关系良好,详见表及图。表、和血浆浓度回归方程与线性范围图标准曲线图标准曲线青岛大学硕学位论文图标准曲线选择性试验将高、中、低三种浓度的质控样品分别取样进行测定后,把峰面积比代入、血浆样品标准曲线回归方程,计算、的测得浓度,并与加入浓度比较,得出患者血浆、的浓度。混合标准样和患者血浆色谱图见图、图。刀一一分图混合标准样色谱图舶瑚分棒图患者血浆色谱图两组患者治疗前后血浆左卡尼汀群浓度的比较两组患者治疗前后血浆血药浓度的比较对照组血浆浓度治疗前后各时间之间比较,差别均无统计学意义治疗组血浆浓度给药周与给药前、给药周与给药前、给药周与给药周比较,均明显升高与对照组相比,治疗组给药前血浆浓度无显著性差异,治疗组给药周与给药周血浆浓度与对照组同期相比均明显升高。结果见表。表服液对组患者血浆左卡尼汀浓度的影响结果,注与同组给药前比较,注与对照组同期比较,注与同组给药周比较,两组患者治疗前后血浆血药浓度的比较对照组血浆浓度治疗前后各时间之间比较,差别均无统计学意义治疗组血浆浓度给药周与给药前、给药周与给药前比较,均明显升高,给药周与给药周比较差别无统计学意义与对照组相比,青岛大学硕士学位论文治疗组给药前血浆浓度无显著性差异,治疗组给药周与给药周血浆浓度与对照组同期相比均明显升高。结果见表。表服液对组患者血浆乙酰左卡尼汀浓度的影响结果元,注与同组给药前比较,注与对照组同期比较,两组患者治疗前后血浆血药浓度的比较对照组血浆浓度给药前、给药周、给药周之间比较,差别均无统计学意义治疗组血浆浓度给药周与给药前、给药周与给药前比较,均明显升高,给药周与给药周比较,差别无统计学意义与对照组相比,治疗组给药前血浆浓度无显著性差异,治疗组给药周与给药周血浆浓度比对照组同期明显升高。结果见表表服液对组患者血浆丙酰左卡尼汀浓度的影响结果孑,注与同组给药前比较,注与对照组同期比较,第四章讨论第四章讨论临床上引发的型患者远比型患者多见,在型患者中发病率达,且呈逐年增长的趋势,据报道年至年美国患病率从增长至,其中岁及以上的老年人最多见,已是大多数国家的最常见的病因,约半数以上的型最终死于尿毒症,在型中是仅次于心脑血管并发症的第二大死亡原因,对人类健康危害极大,因此目前对的防治工作异常严峻。发病机制复杂尚未完全明确,考虑其致病因素主要包括高血糖、高血脂、高蛋白饮食、高血压、胰岛素抵抗、氧化应激、肾素血管紧张素系统亢进、细胞因子、吸烟、遗传因素等多方耐。不仅表现为慢性高血糖状态,还常同时伴有脂肪与蛋白质的代谢紊乱【,其中持续高血糖、高血脂各自作为独立危险因素,二者伴发存在则能进一步加重肾脏损伤,以糖脂异常为主要表现的代谢紊乱症候群是各发病机制的主要基础之一。目前针对的治疗也是依据其相关发病因素制定的,期待通过逆转相关危险因素而达到保护肾功能、防治并发症的目的,但所有治疗方法都强调对早期或轻症的治疗,旦进展至尿毒症期则需行透析和移植治疗,疗效差,预后不良,因此强调轻症的及早治疗重要性不言而喻。本临床研究均选择病情较轻的型患者,入选者符合年国际糖尿病联盟糖尿病诊断标准,确诊为型糖尿病的诊断标准参照期分期标斛州,并结合临床实际制定,其中期又称早期,期又尿白蛋白排泄率烬。即尿微量白蛋白总量称临床或显性,尿白蛋白排泄率即尿微量白蛋白总量。本试验选择的病例均为早期期,尿微量白蛋白在。,同和临床早期组期早期组,尿微量白蛋白一时应排除其他疾病如心脏、肝脏等疾病及除以外的其他肾脏疾病。入选的患者均经常规糖尿病治疗,如饮食控制、适当运动、应用降糖药物皮下注射胰岛素,定期血糖监测空腹血糖控制在。左右。本研究临床采血检验后发现大部分患者存在血脂异常,为观察对患者的降脂作用,所有患者均停用其他降脂药物。是体内参与能量代谢的基本物质之一,能促进脂类、葡萄糖以及氨基酸的代谢改善机体能量供应,依靠线粒体膜外侧的卡尼汀脂酰转移酶以及内侧的卡尼汀脂酰转移酶,游离的能将脂肪酸导入线粒体进行氧化,又可与氧化的产物乙酰基结合形成导出线粒体,减少线粒体中乙酰产生,增高与乙酰的比值,进一步加速脂肪酸氧化,同时与乙酰的比例增高可使丙酮酸脱氢酶的活性增强,进而促进葡萄糖的氧化分解】,还可促进支链氨基酸氧化代谢参与维持机体蛋白质平衡的青岛大学硕士学位论文功能川。还是一种优良的抗氧化剂,可增加自由基清除酶活性而对抗氧化应激和炎症反应,对许多脏器和组织起到保护性作用【。目前临床上得到广泛应用,主要应用于缺乏疾病的防治。是一种氨基酸衍生物,其体内来源既可由肝脏、肾脏、大脑内源性合成,又可通过摄取外源性动物性食物或药物吸收补充。饮食中的主要存在于肉类食物内,报道称【】食物中的可在肠道上皮细胞膜主动和被动吸收入血,生物利用度较高,而口服给药时仅以被动吸收为主,加之部分被大肠的微生物将其降解,生物利用度较低。血液中的的清除与重吸收主要是由肾脏来完成的,血液中的经肾小球滤过后绝大部分被近曲肾小管重吸收入血,肾脏在维持血浆浓度的稳定方面起着非常重要的作用【钓。文献报道患者体内含量可较健康人低,伴有视网膜病变、周围神经病变、高脂血症并发症的患者体内缺乏更为明显,给予补充应对并发症有治疗作用。作为慢性并发症之一其体内缺乏程度虽未在文献中同时报道,考虑其比其他并发症缺乏还要显著,因为健康人血液中的经肾小球滤过后绝大部分被近曲肾小管重吸收入血,而患者肾脏功能下降伴有肾小管功能受损,使的重吸收减少而排出增多,而且肾脏自身合成减少,均可加重体内缺乏。尤其是当并发需行血液透析治疗时,由于水溶性好,不易与大分子物质结合,极易透过透析半透膜而流失,使患者体内严重缺乏,因此目前已常规应用于的治疗。发展至时病情重给予补充已不能逆转病情,而对轻症患者补充治疗应有较好疗效,本研究对早期及临床早期组患者应用治疗后取得较好疗效,现针对疗效及其机制分别讨论如下。高血糖被认为是发病的基础启动因素,高血糖引发肾脏损害考虑主要与蛋白质非酶糖基化终末产物,的形成、多元醇代谢途径的激活、蛋白激酶的激活三种因素有关。首先,持续高血糖状态可引发体内蛋白质、脂肪酸、核酸等物质非酶糖基化形成,而沉积在肾小球基底膜使其增厚,可使导致肾小球滤过膜孔径增大,导致肾小球滤过功能下降和白蛋白尿的产生,且与其自身受体结合后,可进一步激活细胞信号传导通路,释放多量的炎性介质、细胞因子和粘附分子,促进的肾脏损掣。其次,高糖、可激活内皮细胞内醛糖还原酶,是多元醇代谢途径的限速酶,被激活可导致过多的山梨醇和果糖生成并积聚在肾小球毛细血管细胞内,细胞内呈高渗状态,大量细胞外水分进入细胞导致结构和功能发生异常,引发肾小球损伤【。此外,持续高血糖状态还导致肾小球内皮细胞与系膜细胞二酯酰甘油增多而激活,作为细胞内信号转导通路关键酶的,可使肾小球基底膜结构改变而通透性增高,并能刺激内皮细胞和系膜细胞分泌细胞外基质增多,增加细胞粘附因子和转化生长因子第四章讨论的表达,参与免疫调节并促使肾小管间质纤维化的发生,多方面损伤肾脏功能加速的发展【叽。因此对患者严格控制血糖能明显延缓的发生和发展,若血糖控制不佳则可加速发生发展。本研究结果发现治疗组给药周、周后患者空腹血糖较前明显下降,治疗组给药周比对照组同期明显下降,因此可以有效的辅助降低患者的血糖,其机制考虑有在促进脂肪酸氧化同时可将线粒体内乙酰基转出,减少线粒体中乙酰产生,增高与乙酰的比率,使丙酮酸脱氢酶复合体的活性增强,促进糖氧化,同时因其促进脂肪酸氧化,使机体获得足够的能量,可减少肝脏糖原向葡糖糖的转化,有利于降低患者的血糖浓度再者,有增强胰岛素敏感性逆转胰岛素抵抗的作用【舢】,临床上以肥胖的的型患者胰岛素抵抗较明显,通过胰岛素增敏剂治疗可以改善其糖类和脂肪代谢、增强肾脏的抗炎能力【】,文献报道证实伴有胰岛素抵抗型患者,其机体缺乏的风险性增加,且给予治疗补充后可提高胰岛素敏感性并有效降低血脂血糖【丐】此外,本课题组在高热量饮食/链脲霉素诱导小鼠动物模型实验前期研究上发现予小鼠口服周后,对血糖。组的小鼠有降糖作用【引,且检测其血液胰岛素水平较前升高,提示除有增强胰岛素敏感性逆转胰岛素抵抗外,在存在一定胰岛功能的前提下,可能还有促进胰岛素分泌的功能。临床上有老年患者服用口服液致低血糖发生的个例报道【】,考虑与老年人药物代谢缓慢蓄积过多及食物摄入较少有关,故为安全起见本试验筛选患者空腹血糖均在乱。左右,且均让患者定期检测血糖,本试验中未见低血糖发生。高血脂症是代谢紊乱症候群的突出表现之一,自世纪中叶和首先提出与高脂血症有关以来,各国实验室和临床研究均证实了高血脂为的重要致病因素,动物研究证明持续高胆固醇饮食可使小鼠、肾小球基底膜增厚和系膜基质扩张,导致小鼠肾脏损伤,而低胆固醇含量的饮食方式可以改善糖尿病小鼠肾功能【,临床也证实脂代谢紊乱与的发生发展密切相关,予降脂治疗后尿蛋白排出减少,肾功能好转【。高血脂症可使尿白蛋白的排泄率增加,加重肾脏功能损伤,考虑与血脂中的有关,是微血管并发症独立危险因素,极易沉积在动脉壁和肾脏的基底膜上,能刺激细胞外基质增生,且非常容易被修饰并被吞噬细胞摄取,脂蛋白被修饰后,可导致系膜细胞增生与系膜基质增厚,使肾小球基底膜的通透性增加,损伤内皮细胞功能而引发炎症反应,以及激活肾素一血管紧张素醛固酮系统等多方面的引发肾脏损害】,此外,高脂血症还可通过增加的表达【】刺激肾小球系膜细胞细胞外基质合成而介导肾脏损害。本研究试验结果发现,治疗组给予口服液治疗后其血脂中、及比给药前明显降低,而比给药前明显升高,其中是心脑血管的重要保护因子,其升高对人体健青岛大学硕士学位论文康有益,而、及升高则对机体有害,证实有良好的调脂功能,应用后可明显改善患者的脂质代谢紊乱,和陈婷与孙晔萍等的报道一致【】。的首要功能即是促进脂肪酸氧化,依靠线粒体膜两侧的和,游离的能将脂肪酸导入线粒体进行氧化,并可结合氧化产物乙酰基形成并导出线粒体,减少线粒体中乙酰产生,与乙酰的比值增高,可进一步加速脂肪酸一氧化,从而改善脂肪代谢紊乱。本研究治疗组给予治疗后患者的尿蛋白排出减少提示肾功能好转,说明可通过调整脂肪代谢降低高脂肪对肾脏的脂毒性而保护患者肾脏的功能,这些结果与此前文献报道副也是一致的。临床上型患者肥胖、高脂血症非常常见,且常伴有高血压,也是的重要危险因素,三者常伴发存在,因此对患者常需要同时降脂、降糖、降压治疗,据报道对中心性肥胖患者,常伴有胰岛素抵抗,在降脂、降糖、降压的治疗同时必须将降脂治疗控制体重放于首位【叭,控制体重后可减缓胰岛素抵抗亦对促进糖脂代谢有利。近年来已成为众所周知的减肥良药,能有效降低肥胖型型患者的血脂与体重,而且能逆转的胰岛素抵抗提高葡萄糖利用率【,本研究结果也证实口服液能明显改善机体脂肪代谢,且治疗组给药周比给药前体重明显下降有良好减肥效果,故口服液对肥胖的患者尤为适用。患者的血脂异常能致血粘度增加导致血流动力学异常,进而增加肾小球灌注压和及肾小球血管的损害,而有降低血脂降低血黏度的作用【,可改善肾脏血液循环而保护肾功能。临床上型并发高血压的比例高达,而进展至临床时则更耐】,众所周知,高血压和肾脏损害互为因果,高血压可以引发肾脏靶器官病变,肾脏病变又可继发血压升高,高血压能使肾脏中小动脉壁细胞结构改变发生硬化,逐渐发生肾脏小动脉玻璃样变性,使肾脏缺血、缺氧,间质纤维化、肾单位硬化坏死,最终出现肾功能不全,从对肾脏的损害程度来看长期高血压要比高血糖等其他因素严重的梦】。高血压肾病和均为的主要病因,因此强调对伴血压升高者必须在纠正糖脂代谢紊乱的同时积极控制高血压才能延缓其肾功能损害【引。对初诊的型患者即应对其特别强调高血压对肾脏的损害作用,尽早干预治疗,能否有效控制高血压直接关系着包括在内的微血管并发症的防治,严格控制血压的受益可同有效控制血糖的好处相媲美【。临床研究已证实将患者血压控制在/以下,可显著降低患者的发病率和减少尿蛋白的排出型】,故我们本研究筛选的患者血压均控制在/以下。目前许多研究已证明氧化应激参与了代谢紊乱的发生,并在的发生发展中起着重要作用,氧化应激已是起病的重要机制之一。患者由于自身清除活性氧基团的能力下降,葡萄糖