园林3第三组植物组织培养.ppt

1、植物组织培养,主要设备仪器的介绍及实验室的管理,无菌操作应在超净工作台中进行。超净工作台内在都装有一个小电动机，它带动风扇鼓动空气先穿过一个粗过滤器，把大的尘埃滤掉，再穿过一个高效过滤器，把大于0.3m的颗粒滤掉，然后这种不带真菌和细菌的超净气流吹过台面上的整个工作区域。由高效过滤器吹出来的空气的速度大约是（273）m/min，所有的污染物都会被这种超净气流吹跑。只要超净工作台不停的运转，在台面上即可保持一个完全无菌的环境，而且这种气流不会吹灭在台面上使用的酒精灯。 为了延长过滤器的使用寿命，超净工作台不要安放在尘埃多的地方，需定期检查超净工作台台面上的风速是很有必要的。在每次开动超净工作台时

2、，应让气流吹10min后再开始操作。在每次操作之前，要把实验材料和需使用的各种器械、药品等先放入台内，不要中途拿进。同时台面上放置的东西也不宜太多，特别注意不要把物件堆得太高，以免挡住气流。在使用超净工作台时应注意安全，当台面上的酒精灯已经点燃以后，千万不要再喷洒酒精消毒台面，否则很易引起火灾。,无菌手套箱（接种箱）,接种箱有各种形状和规格，只要操作方便，能达到无菌状态即可。接种箱一般高约60cm，宽150cm，长50cm左右，木质结构。分双人操作箱和单人操作箱两种。双人操作箱，四个侧面均装玻璃；单人操作箱，三个侧面装玻璃。接种箱要求关闭严密、无缝，便于密闭熏蒸消毒，进行无菌操作。接种箱的正面

3、开两个圆洞(双人接种箱的正反面均开两个圆洞)，洞口上装上布袖套，双手由此伸入操作。圆洞外设有推门，不操作时关闭，保持接种箱内清洁。箱内一般放置接种用的酒精灯、点燃物和常用接种工具如接种针、接种匙等。菌种和被接瓶、袋接种前才放入。由于接种箱的空间小、箱内空气容量少、接种时间长、火焰容易熄灭。因此，可在箱顶两侧开一个直径10cm左右的圆孔，并用数层纱布覆盖，以便利内外空气交换。接种箱内要安装紫外线、杀菌灯进行空间消毒。紫外灯是由灯管、镇流器、启动器、灯座等组成。紫外灯管有多种形状和规格，用于箱内空气消毒的一般采用直形灯管，电压为220V、波长2537?、功率30W的杀菌效果最好。不同功率的灯管配用

4、不同的镇流器和启动器，紫外灯管直接装在箱子顶部。紫外线的穿透力很弱，即使一层很薄的玻璃也能够滤掉大部分射线。因此，紫外线灯适用于空气和物体表面的消毒。消毒时，可把菌种和被接物一起置于接种箱的紫外线下，不会影响其成活率。紫外线对人的眼黏膜及视神经有损伤作用，要关灭后，再打开接在箱内的日光灯或电灯进行接种操作，必须避免直接在紫外灯下工作，也不能直视灯管。但只要正确操作，紫外线消毒时间短、效果好，对人体无多大影响，是一种最好的消毒方法。当然，也可采用成本低的福尔马林熏蒸法进行消毒，但时间长，产生的刺激性气体对人体有不良作用，必须引起注意。目前也有改用气雾消毒等方法进行消毒。接种箱的无菌程度高，效果好

5、，而且可自行制造，成本低，体积小，使用方便。大规模生产时，可用多个接种箱同时接种。,空调机,接种室和培养室的温度保证都需要空调机，安置再较高的位置，有利于排热散凉 恒温箱 有利于植物的培养，可以控制温度、湿度和光照。,除湿机和加湿机、烘箱及冰箱,除湿机和加湿机都是控制培养室的湿度，从而有助于培养物的生长！ 烘箱是用于干燥洗净玻璃器皿，也可以灭菌和测干物的重。用于干燥需要80100度，干热灭菌要150度，达13h。若测定干物无毒要控制再80烘干至完全干燥为止。 冰箱则分为普通冰箱和低温冰箱，主要用于储存母液，各种易变质、分解的化学药品及植物材料！,高压灭菌锅、水浴锅,高压灭菌锅是植物组培的最基本

6、的设备之一，用于进行培养基和器材的灭菌。 水浴锅是用于溶解难容药物和溶化琼脂条！,摇床和转床,用于改变液体培养材料的通气状况及促进酶解原生质体的解离。一般再液体培养中转速为每分钟100次左右，再解离原生质体是每分钟约80次。,显微镜和解剖镜 电子分析天平和托盘天平 磁力搅拌机 酸度计 电炉等加热设备 离心机：用于收集原生质体，转速要求较低。 电蒸溜水器 培养基分装器,各种器材介绍,培养器皿 分注器 离心管 刻度移液器 细菌过滤器 试验器皿,器械用具,镊子类 剪刀类 解剖刀 解剖针 接种工具：包括接种针、接种勾、接种铲等。 钻孔器 其他：酒精灯、电炉、试管、玻璃棒、搪瓷盘,实验室的管理,1：洗涤：器皿和金属用具的洗涤。 2：灭菌：干热灭菌、湿热灭菌、熏蒸灭菌。 3：准备室及灭菌室的管理 4：无菌室和培养室的管理,保证房间的干燥、清洁卫生，药品管理要有专门的药品柜，各种药品要有规则的摆放，最好简历登记制度，做到同一药品先入先出。各种器皿要洗涤干净后放入药品柜存放，小型仪器要使用后页要求清洁干净后入柜,无菌室和培养室要求清洁并无菌，可以采用每年1