动物传染病学：马立克氏病

1、马立克氏病 （Mareks Disease, MD）,马立克氏病（MD）是鸡的一种以淋巴细胞增生为特征的病毒性肿瘤病，通常以外周神经和包括虹膜和皮肤在内的其它各种器官和组织的单核细胞侵润为特征。 MD引起的经济损失十分惊人，被列为养鸡业最主要的疾病之一。,一、概 述,1907年Dr. Joseph Marek首先发现 ； 1967年，分离出病毒； MD的研究对肿瘤发生和发展的生物学，遗传学和免疫学方面提供了极好的动物摸型； 1971年研制成预防本病的疫苗； 是世界上第一个用疫苗来预防肿瘤病毒引起癌症的成功例子； 世界各国都存本病的流行，我国在1973年发现本病。,二、病 原,1、属疱疹病毒科

2、-疱疹病毒，线性双股DNA病毒。 2、根据抗原性不同，分为三种血清型， a. 血清l型: 包括所有致瘤的马立克氏病毒，含强毒及其致弱的变异毒株； b. 血清2型: 包括所有不致瘤的马立克氏病毒； c. 血清3型: 包括所有的火鸡疱疹病毒（HVT）及其变异毒株。,三种血清型毒株基因组同源性低（5-10%） MDV I型最大，180kb， MDV II HVT 50 30min，60 10min不能存活。 对常用消毒剂敏感，10min可使病毒失活 反复冻融、超声波处理可使病毒失活,病毒的病理分型,温和型（mMDV） 强毒型（vMDV） 超强毒型（vvMDV） 特超强毒性（vv+MDV）,MDV的毒

3、力有不断增强的趋势： 20世纪80年代分离到超强毒株vvMDV。 20世纪90年代又发现超超强毒vv+MDV。,感染细胞培养物：直径80-100nm裸露的病毒颗粒或核衣壳，体内细胞间感染； 羽毛囊上皮中有成熟的病毒粒子：直径270-400nm的有囊膜的病毒粒子，体外新宿主的感染。,病毒的存在形式,细胞结合性病毒 核衣壳，二十面体对称 存在于感染淋巴细胞中 可通过细胞间接触感染 细胞游离性病毒 囊膜包裹的核衣壳 存在于羽毛囊上皮细胞中， 又称完全病毒。有厚的外壳，抵抗力强。 传播起重要作用。,85-100nm,273-400nm,培养：鸭胚成纤维细胞（DEF）和鸡胚肾细胞（CK），产生CPE，可

4、形成包涵体。,毒种保存,细胞结合性病毒 病毒的感染力与储备物中的存活细胞有关 保存于-196，稀释后的细胞结合性病毒的半衰期为2-6h 细胞游离性病毒 可储存于-70或冻干保存,传染源：病鸡和带毒鸡，病毒存在于血液，肿瘤、羽毛囊上皮，其中以羽毛囊上皮传播作用最为重要。 脱离的角化毛囊上皮、毛屑、灰尘是最重要的传播媒介。 传播途径：高度接触传染，主要是呼吸道，其次为消化道。病毒一旦侵入易感鸡群，其感染率几乎可达100%；不发生垂直传播。,三、流行病学,易感动物： （1）自然宿主是鸡，其次火鸡、野鸡、珍珠鸡、鸭、鹅、鸽、金丝雀、鹌鹑、天鹅等也见有报道。 （2）性别、年龄、品种与MD感染率和死亡率有

5、关。 （3）年龄越轻，易感性越高，因此，1日龄雏鸡最易感。 （4）母鸡比公鸡对本病毒更易感染。,人工感染后2周可见神经和其它器官的单个细胞侵润 人工感染后3-4周才出现临床症状和大体病变 临床病例大多从8-9周龄开始发病，直到16-20周龄才达到发病高峰,潜伏期,四、发病机理,Stage 1,康复,Stage 2,潜伏感染，无溶细胞性感染，也无肿瘤,肿瘤性、炎性、免疫活性和非活性 细胞构成的混合物,自然感染潜伏期：3-4周，至几个月不等。 分为4种表现型：一般分为神经型(古典型)、内脏型 (急性型)、眼型和皮肤型四种，有时可混合发生。,五、临床症状及病理变化,临 床 症 状,神经型（古典型）：

6、多见于弱毒感染或HVT免疫失败的青年鸡（2-4月龄）主要侵害外周神经，造成不全或完全麻痹，多为一侧麻痹。腿：横卧、劈叉；翅：下垂，拖地而行。 内脏型（急性型）：内脏器官发生肿瘤，缺乏特征性症状，突然发病，流行迅速，病程短，死亡率高。,眼型：虹膜色素（特征）消失，变为灰色（灰眼或银眼），瞳孔边缘不整，视光反应迟钝或失明。 皮肤型：此种病型仅在宰后拔毛时发现羽毛囊肿大，形成结节或瘤状物，此种病变常见于躯干、背、大腿生长粗干羽毛部位。,（1）神经型（古典型） 特征症状 病毒侵害到外周神经，一肢或多肢麻痹或瘫痪。,臂神经受侵时翅膀下垂,坐骨神经受侵害时，形成“劈叉腿”。,主要病变：剖检可见一侧神经肿胀

7、变粗，常发生于坐骨神经、颈部迷走神经、臂神经丛、腹腔神经丛和肠系膜神经丛，神经纤维呈灰白或黄白色。,神经型病鸡常见一侧腰荐神经增粗,主要病变：内脏受损和出现肿瘤。 最常被侵害的器官是卵巢，肿瘤呈菜花样肿大。 重点是法氏囊、脾、胸腺、心、肝、肺，其次为胰、腺胃、肠道、肾、虹膜、肌肉和皮肤等组织器官呈大小不等灰白色肿癌结节。,（2）内脏型 (急性型)： 多发生于产蛋前的后备鸡（产蛋鸡也有发生）； 死亡率高。,Liver tumor of MD field case,Liver tumor of MD field case,肝脏弥漫性肿瘤结节,Liver, spleen and proventicu

8、lus of MD field case,Spleen tumor of MD field case,脾脏变形，有肿瘤病灶,肺脏切面完全瘤化,肾脏肿胀、弥漫性肿瘤增生,腺胃增生、肿大,腺胃壁增厚,腺胃乳头融合,Kidney tumor of MD field case,卵泡停止发育，卵巢肉样变,睾丸肿胀、变形,（3）眼型：主要侵害虹膜，病鸡对光失去调节能力。单侧或双眼发病，视力减退，甚至失明。可见虹膜增生退色，呈混浊的淡灰色(俗称灰眼或银眼)。 瞳孔收缩，边缘不整呈锯齿状。,Control,虹膜褪色，瞳孔边缘不规则,（4）皮肤型：病鸡的皮肤增厚，以皮肤毛囊形成小结节或肿瘤为特征。最初见于颈部及

9、两翅皮肤，以后遍及全身皮肤。多发生于大腿、颈背部。,皮肤型病鸡可见全身毛囊肿瘤性增生,常见大小不一的弥漫性肿瘤结节,腿部和爪部皮肤也可见肿瘤病变,1、流行病学和大体病变 (符合以下条件之一可以做出初诊） 外周神经淋巴组织增生性肿大 16周龄以内的鸡发生多种组织淋巴肿瘤 16周龄或更大的鸡，在没有法氏囊病变的情况下，出现内脏淋巴肿瘤 虹膜褪色和瞳孔不规则,六、诊断,2、病毒分离鉴定：采血分离白细胞、淋巴瘤细胞或脾细胞悬液、羽髓经卵黄囊接种4日龄鸡胚，于19日龄鸡胚绒毛尿囊膜上可生成病毒痘斑。 接种敏感细胞，在几天内会出现特征性的蚀斑（DEF & CK）。,3、血清学检查：琼脂扩散试验、直接或间接

10、荧光实验、中和试验、酶联免疫吸附试验。（1）琼脂扩散试验：采用含有毛髓的羽毛，挤出毛髓为抗原，用标准血清测出未知抗原。,（2）免疫荧光：取鸡的淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞，培养5天后出现蚀斑，用单克隆抗体做间接免疫荧光染色。,七、防制,1、免疫防制 在种鸡和蛋用鸡 1990年中期前，大多数鸡场用冻干的HVT疫苗；1997-1998年后，大多数鸡场改用液氮保存的CVI988/Rispens疫苗，MD显著减少。 在商品代肉鸡 大多数鸡群不用抗MD疫苗，MD病例仅在大日龄鸡群中出现，但MDV感染非常普遍（防控困难）。,注射疫苗：早、快、足（1日龄雏鸡或18-19日龄鸡胚），二价和三价液氮苗效果好，注苗

11、场地用前后严格消毒。 注苗后要隔离：注苗后三周与其它鸡群隔离，尤其是头几天，疫苗7-10天才产生免疫力，要防止早期感染。,野毒的早期感染问题成为免疫失败的主要原因。,2、加强饲养管理和卫生管理,坚持自繁自养，执行全进全出饲养，避免不同日龄鸡混养； 实行网上饲养和笼养，减少鸡只与羽毛粪便接触； 严格卫生消毒制度，常选用熏蒸消毒法； 消除各种应激因素，注意对法氏囊病、禽白血病、禽网状内皮增生病等免疫抑制病的免疫与预防； 加强检疫，及时淘汰病鸡和阳性鸡。,3、抗病育种： 选育生产性能好的抗病品系商品鸡，因不同品系的鸡对MD的遗传抵抗力不同。,总 结,马立克氏病是一种会造成重大经济损失的流行广泛的疾病。 马立克氏病病毒具有较强的抵抗力并能在外界环境中长期生存。 马立克氏病是一种免疫抑制性疾病，常伴有肿瘤病变。它无法被治愈。 鸡会长期带毒和排毒，有时也可能没有症状，这就导致了长期持