2016年一轮复习：生物技术实践练习

1、一、微生物的培养和利用1. (2014 江苏单科，30)为了获得3 -胡萝卜素产品，某小组开展了产3 -胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题。(1) 实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是 ;为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该。 为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是 如图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是 (填序号) 安全阀、放气阀、压力表 放气阀、安全阀、压力表 安全阀、放气阀、温度表 放气阀、安全阀、温度表3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见(4) 为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在菌生长，最可能的原因是 为增加 3 -胡萝卜素提

2、取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是;研磨时(填“需要”或“不需要”)添加 CaCO),理由是 。2、(2014 浙江宁波期末)下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题。困甲图&(1) 图甲是利用 法进行微生物接种，图乙是利用 法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是和;对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是 和酒精消毒。(2) 接种操作为什么一定要在火焰附近进行？(3) 接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养?(4) 如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是(填“图甲”或“图乙”)。3. (2014 四川卷，10)有机农药苯磺隆是一种

3、除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土 壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。接种土燃样晶选择培养划线纯代图甲测定幫碩 隆降解率四类，该实验所用的选择培养基只能以苯(1) 微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、 磺隆作为唯一碳源，其原因是(2) 与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和，这些植物激素一般需要事先单独配制成保存备用。 纯化菌株时，通常使用的划线工具是 。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的 操作失误有。(

4、4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是 ，该实验设计是否合理？为什么？ 。4. (2014 河北邯郸一模，39)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用A的细菌(目的菌)。化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。祐水池屮撮櫥瞪帶若于天匚LSA逛初迭hi至畏阳口的朗(1) 培养基中加入化合物 A的目的是 ，这种培养基属于 培养基。(2) “目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是。 在

5、上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是 。(4) 转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是，操作时采用灭菌的方法。(5) 实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是。(6) 某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了 3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是，此对照实验的目的是。5. (20 14 全国课标I, 39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。(1) 分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中

6、的葡萄糖苷酶可将分解成。在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。(3) 为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+一+培养基乙+一+注：+ ” 表示有，一”表示无。据表判断，培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是;培养基乙(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因6. (2014 课标n,39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量

7、，并进 行了细菌分离等工作。回答下列问题:(1) 该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ;然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为 39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。(2) 该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过灭菌。在第二次及以后的划 线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是(3) 示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4) 该小组将得到的菌株接种到液体培养基

8、中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。7 为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌，科研人员做了如下实 验。请回答问题：(1) 在无菌操作下，使用无菌水对泡菜汁进行 ，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了 CaCO的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑取有 的菌落，继续在 MRS平板上用法分离，得到单菌落。(2) 取分离到的乳酸菌分别接种到MRS液体培养基中，间隔取样测定pH,目的是筛选出 的乳酸

9、菌。(3) 取上一步筛选出的乳酸菌接种到含有NaNO的MRS培养基中，培养一段时间后，用 法测定NaNO的含量，筛选出 的菌株。&回答下列有关微生物培养与运用的问题。KHPQ1.4 gNqHPQ2.1 gMgSQ 7H2Q0.2 gFeCh0.1 gX1 g维生素微量琼脂15 g(1) 上表是筛选异养型细菌的培养基配方。从物理性质上看该培养基属于培养基，其中成分X除了为目的菌提供能源，还能提供 。制备该培养基的一般操作顺序是计算T称量T 灭菌T。对培养基进行灭菌的常用方法是 。2如图A B是纯化微生物培养的两种接种方法，C D是接种后培养的效果。某同学接种培养后获得图C所示效果，则其采用的接种

10、方法是(选填“ A” “ B”)；接种时可能的失误操作是(3) 微生物强化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。为筛选和纯化该类微生物，应向培养基中添加作为唯一碳源；培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取就可获得高效菌株。二、传统发酵技术1. (1)完成图1中的实验流程。(2) 冲洗的主要目的是 ，冲洗应特别注意不能 ，以防止菌种的流失。曲料H產主至(3) 图2装置中的充气口在 时关闭，在 时连接充气泵，并连续不断地向内 。(4) 排气口在果酒发酵时排出的气体是由 产生的 ，在果醋发酵时排出的是 (5) 写

11、出与(4)题有关的反应方程式： 。(6) 若果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？并说明原因。(7) 在酒精发酵时瓶内温度一般应控制在 。醋酸发酵时温度一般应控制在 (8) 果酒制作完成后，可以用 来检测酒精的生成，在酸性条件下，酒精与之反应呈现色。2. (2012 海南单科，30)回答下列关于腐乳制作的问题:(1) 腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和;其产生的能将豆 腐中的脂肪水解为 和。(2) 发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长。(3) 腐乳制作的后期可

12、加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤。卤汤除具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的。3. (2014 河北冀州中学高三期末)腐乳、腌白菜等以其色泽诱人、味道鲜美时常出现在人们的餐桌，这几种食品都是经过腌制加工而成的，请回答下列问题。中A表示，制作腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是 。(2) 腐乳制作过程中加盐的作用是 。制作腐乳的卤汤中通常要加入料酒、黄酒等，含量一般控制在12%左右，其目的是(4) 据图可知腌白菜在腌制 d后食用最佳。4. 利用不同微生物的发酵作用制作食品，历史悠久、惠及民生。请分析回答下列问题：(1) 腐乳制作的流程是：让豆腐上长出 加盐腌制t加卤汤装瓶t密封腌制。用盐腌制时

13、，应注意控制;配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在 %左右。(2) 人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容不正确的是()序号食品果酒果醋腐乳泡菜主要微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌制作装置或操作步骤2二r，囁树广A.B . C . D .制作泡菜的原理是。(4) 蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐。在 条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生 反应后，与N- 1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，估算出的亚硝酸盐含量如图曲线所示，据图可以得出的结论是：5. (2013 全国课标卷I,39)回答下列有

14、关泡菜制作的问题。 制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。(2) 泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即 为乳酸菌进 行的过程。 该过程发生 在乳酸菌 的中。(3) 泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、和等。(4) 从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：。6. (2014 江西景德镇一模，39)下图表示葡萄酒酿制的简单过程，请据图分析。裔萄汁+口糖+酵母菌 天搅样27臥甲斯绝与空吒接触6(1) 从上图可知，甲图是为了使酵母菌进行 ，以增加酵母

15、菌的数量，乙图是为了使酵母菌发酵获得葡萄酒。最后，可以用 试剂检验是否有酒精生成。整个酿制过程一般将温度控制在1825 C,原因是。 为防止发酵液被污染，对使用的发酵瓶要 ，并用消毒。(3) 从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌时，最常用的接种方法有稀释涂布平板法和两种。接种后，培养基上会出现一些分别由一个酵母菌繁殖而成的 (群落、种群)。(4) 泡菜的制作离不开 菌，在泡菜的腌制过程中，还要跟踪检测亚硝酸盐的含量，膳食中的亚硝酸盐一般(会、不会)危害人体健康。亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物 。7 苹果醋具有营养丰富，增加机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果 酒和果

16、醋的过程简图如下，请分析并回答问题。革果汁等原料鲜暉堞汁昙 髙纯度苹果洒上a果醋(1) 过程甲中使用的微生物是 。将鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约 的空间，经过1012天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为 色，说明产生了酒精。(2) 过程乙中使用的微生物是 ，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下：第一步：配制(填“固体”或“液体”)培养基。第二步：对培养基进行高压蒸汽灭菌。第三步：接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。第四步：培养。温度控制在c范围内。第五步：挑选符合要求的 。 在的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为，再将其变为醋酸。&根据传统

17、发酵技术的相关知识，回答下列问题：(1) 果酒的制作 制作果酒时，发酵瓶可用体积分数为70%勺酒精进行 (填“消毒”或“灭菌”)。 从微生物培养的角度分析，果汁能够为制作果酒所用的酵母菌提供水、和无机盐。果醋的制作 制作果醋所用的微生物只有当 充足时，才能进行旺盛的生理活动。 在制作果醋的过程中，要将温度严格控制在 C。腐乳的制作 腐乳的制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是 。 在制作腐乳的过程中，加盐和加酒所发挥的相同作用是 。泡菜的制作 制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是 。 在制作泡菜的过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有 、和食盐用量等。三、植物有效成分的提取1、(全国课标卷)下列是

18、与芳香油提取相关的问题，请回答：(1) 玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有的性质。蒸馏时收集的蒸馏液( 选填“是”或“不是” )纯的玫瑰精油，原因是 。(2) 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是。(3) 如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 ，原因是。(4) 用萃取法提取玫瑰精油时，采用的溶剂是 ，原理是。(5) 某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为d左右。(6) 从薄荷叶中提取薄荷油时 (选填“能”或“不能”)采

19、用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是。2、研究发现柚皮精油和乳酸菌素 (蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。抑愴玄騎(1) 为了提高出油率，也因为柚皮易焦糊，宜采用 法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质。(2) 为了分离出优良的乳酸菌A,需要制备 培养基；若需长期保存菌种，可采取的方法是(3) 抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。玉米3. (2014 山东卷，下：35)玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如(1) 玉米秸秆中的纤维素经充分水解后

20、的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用 法或稀释涂布平板法计数。(2) 玉米胚芽油不易挥发，宜选用 法或法从玉米胚芽中提取。4. (2013 山东理综，34)胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体 中提取获得，流程如下：的啼选踰养裂解顺、枠淀器眇肌型卜粉碎T燥/(1) 筛选产胡萝卜素的酵母菌 R时，可选用 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是。(2) 培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供 和。(3) 从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制

21、好温度和 以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是。(4) 纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为。5. (2014 江西八校一模，39)回答下列有关植物有效成分提取的问题。(1) 从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和，以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用 法，在鉴定的过程中需要用 作为对照。(2) 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是,分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是 ，除去固体硫酸钠的常用方法是 。(3) 橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会

22、发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生的问题,所以一般采用法。6请回答下列有关“胡萝卜素提取”的问题。(1) 从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是 法。以下为提取胡萝卜素的实验流程：胡萝卜t粉碎t干燥t At过滤t Bt胡萝卜素。其中， A过程叫 , B过程叫 。 在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将 和控制在一定范围内。(3) 图甲为提取胡萝卜素的装置示意图，请指出图中一处错误并改正：。甲C(4) 图乙是胡萝卜素粗品鉴定装置示意图。该鉴定方法的名称是法。图乙中为 ，实验过程中点样时应注意 。 在图乙的胡萝卜素的结果示意图中，A、B、C、D四点中，属于提取样品的样点是 。一、微生物的培养和利用答

23、案1、 答案 （1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）用牛皮纸（报纸）包扎器皿（2）抑制细菌（放线菌）生长（3）（4）接种环温度过高，菌被杀死（5）有助于研磨充分不需要 3 -胡萝卜素较耐酸2、 答案 （1）平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌（2）火焰附近存在着无菌区域（3）避免培养过程产生的水分影响微生物的生长（4）图乙3、 答案（1）氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖（2）细胞分裂素 母液（3）接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对照4、 答案 （1）筛选目的菌 选择（2）化合物A异养需氧型（3）防

24、止外来杂菌污染（4）接种环 灼烧（5）防止造成环境污染（6）不接种的空白培养基检验培养基制备过程中是否被杂菌污染5、 答案 （1）纤维二糖葡萄糖 （2）红 透明圈（3）不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌6、 答案 （1）检测培养基平板灭菌是否合格3.8 X 107 （2）灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落（3）B（4） 溶解氧 营养物质7、 答案 （1）梯度稀释透明圈划线（2）产酸速度较快（3）比色亚硝酸盐降解能力强&答案 （1）固体碳源和氮源溶化倒平板高压蒸汽灭菌法（2）B稀释涂布平板法涂布不均匀（3）石油降油圈大的菌落二、传统发酵技术答案1答案 （1）醋酸发酵 （2）洗去浮尘反复冲洗（3）果酒发酵果醋发酵泵入空气（氧气）（4）酵母酶酶菌 CQ （含氧量少的）空气和 CQ （5）C 6H12C62CnO卅 2CO、GH50出 O2 CHJCOOH- H2O （6）不 能。因为果酒发酵时的缺氧环境抑制醋酸菌的生长，且醋酸菌的发酵条件是氧气充足（7）1825 C30 35 C（8）重铬酸钾灰绿2.答案（1）毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸 （2）微生物 （3）风味3. 答案 （1）丝让豆腐长出毛霉消毒 （2）析出豆腐中的水分，使豆腐变