实验六马铃薯多酚氧化酶制备和化学性质_第1页
实验六马铃薯多酚氧化酶制备和化学性质_第2页
实验六马铃薯多酚氧化酶制备和化学性质_第3页
实验六马铃薯多酚氧化酶制备和化学性质_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、 料推荐实验六马铃薯多酚氧化酶制备和化学性质一、实验目的1、学习从组织细胞中制备酶的方法。2、掌握多酚氧化酶的作用和化学性质。二、实验原理多酚氧化酶是一种含铜的酶，其最适pH 值为 6-7。由多酚氧化酶催化的反应，如以邻苯二酚为底物， 可以被氧化形成邻苯二醌。由多酚氧化酶催化的氧化还原反应可通过溶液的颜色的变化鉴定， 这个反应在自然界中是常见的，如去皮的马铃薯和水果变成褐色就是由于该酶作用的结果。多酚氧化酶的最适底物是邻苯二酚（儿茶酚）。间苯二酚和对苯二酚与邻苯二酚的结构相似，它们也可以被氧化为各种有色物质。三、实验器材1、实验仪器匀浆机，离心机，冰箱，恒温水浴，烧杯，三角瓶，漏斗，小刀，纱布

2、，2、材料与试剂1）马铃薯2） 0.1mol/L 的 NaF 溶液：将4.2g 氟化钠溶于1000mL 水中。3） 0.01mol/L 的邻苯二酚溶液：将1.1g 邻苯二酚溶解于1000mL 水中，用稀NaOH 调节溶液的 pH 值为 6.0，防止其自身的氧化作用。当溶液变成褐色时，应重新配制。新配制的溶液应贮存于棕色瓶中。4） pH6.8 的磷酸盐缓冲液5） 5%三氯乙酸溶液6） 0.01mol/L 的间苯二酚溶液：将0.11g 间苯二酚溶解于100 mL 水中。7） 0.01mol/L 的对苯二酚溶液：将0.11g 对苯二酚溶解于100 mL 水中。8）硫酸铵晶体四、实验步骤1、多酚氧化酶

3、的制备每三个小组一起，称取150 g 马铃薯（新马铃薯可以不去皮），切块后放入匀浆机，加入150mLNaF 溶液，匀浆后用四层纱布过滤。1 料推荐各组分别量取50mL 滤液置离心管中，于4000r/min 离心 10min ，取上清夜，加入硫酸铵晶体 16g，溶解，于 4放置 30min ，于 4000 转 /min 离心 15min ，弃上清液， 沉淀用 15ml pH4.8的柠檬酸缓冲液溶解，即为粗酶液。2、多酚氧化酶的催化作用按表 1 加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。表 1 多酚氧化酶的催化作用混匀后 37保温 5、10、15、 20min ，观察并试管号酶液邻苯二酚水+表示）记录颜色变化（用115 滴15 滴215 滴15 滴315 滴15 滴3、多酚氧化酶的化学性质按表 2 加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。表 2 多酚氧化酶的化学性质试管号酶液5三氯乙酸邻苯二酚37保温 10min ，观察颜色变化115 滴15 滴210 滴10 滴10 滴4、底物专一性按表 3 加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。表 3 多酚氧化酶的底物专一性试管号酶液邻苯二酚间苯二酚对苯二酚37保温 10min ，观察颜色变化115 滴15 滴215 滴15 滴315 滴15 滴五、 实验结果1、按实验步骤中各表格要切记录实验现象。2、分析每组实验

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 管理策划

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论