水通道蛋白4基因敲除对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的影响9500字

1、水通道蛋白4基因敲除对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的影响9500字 摘要 目的 观察水通道蛋白4（AQP4）基因敲除对博莱霉素（BLM）致小鼠肺纤维化过程的影响，初步评价半胱氨酰白三烯受体在此过程的作用。 方法 设AQP4+/+对照组、AQP4+/+ BLM组、AQP4-/-对照组、AQP4-/- BLM组，每组各6只小鼠。每日记录一般情况，第12天处死小鼠，算肺系数及HE、Masson染色观察病理变化，提取蛋白行免疫印迹杂交（Western blotting）检测半胱氨酰白三烯受体1（CysLT1R）、受体2（CysLT2R）的表达。 结果 第12天时，AQP4+/+BLM组小鼠肺系数（14.6

2、51.92）为AQP4+/+对照组（6.971.54）的2.1倍（P 0.05），CysLT2R表达稍有升高，但差异无统计学意义（P 0.05）。见表1、图4。 3 讨论 肺纤维化伴随多种类型炎症细胞的渗透，炎症介质的释放，从而导致血管通透性的增加及慢性肺水肿2，14-15。研究发现经气管内灌注BLM可以造成小鼠肺纤维化，病理组织学和生理学的改变均与人类肺纤维化近似，因此常以该药制作肺纤维化模型16-17。气管内注射BLM后AQP4+/+、AQP4-/-小鼠的肺系数均增高，表明BLM成功诱导小鼠发生肺纤维化，组织病理学结果也证实这一结论。与AQP4+/+BLM组相比，AQP4-/-BLM组小鼠

3、肺系数明显降低，纤维化程度也有所减轻，表明AQP4缺失可能减轻肺纤维化的症状。AQPl、AQP4双敲除小鼠肺内毛细血管与肺泡水通透性较野生型降低1416倍18。重量检测的方法显示AQP4-/-小鼠肺泡毛细血管间水的渗透性明显下降19。本研究结果也提示AQP4在小鼠肺泡毛细血管间水转运过程中发挥重要作用，对BLM诱导的小鼠肺部炎症水肿有促进作用。有文献报道在BLM诱导肺纤维化的小鼠模型中，靶向断裂胞浆磷脂酶A2阻断LTs的生成，可明显减轻肺纤维化的程度20；BLM诱导的肺组织中CysLT1R mRNA表达增高，而CysLT2R mRNA表达降低，CysLT1R拮抗剂孟鲁司特可通过调节CysLT1

4、R和CysLT2R的平衡来改善肺纤维化21。本研究发现AQP4+/+BLM组CysLT1R表达显著增高，与上述文献结果一致，推断AQP4可能通过调控CysLT1R参与肺纤维化的过程，但这一结论尚待进一步实验证实。而AQP4+/+BLM小鼠CysLT2R表达稍有增高但未有显著差异，尽管这种变化的原因尚不明确，但可能与与两种受体的相互作用有关。AQP4参与了气道炎症的病理生理过程22，而肺纤维化是气道炎症之一，提示AQP4在小鼠肺纤维化炎症过程中的重要作用，关于AQP4在调节肺纤维化发生病理生理过程中的具体机制还需通过进一步的研究来证明。综上所述，AQP4-/-可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化过程中

5、的肺水肿，AQP4可能是通过调控CysLT1R参与此过程。本研究初步确定AQP4对小鼠肺纤维化过程的影响及可能的作用机制，为认识AQP4在呼吸系统中的作用提供参考。参考文献1 Davies HR，Richeldi L. Idiopathic pulmonary fibrosis：current and future treatment options J. Am Respir Med，2002， 1（3）：211-224.2 Ward PA，Hunninghake GW. Lung inflammation and fibrosis J. Am J Respir Crit Care Med，1

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